伽氏疏螺旋体尚志株P66基因的原核表达与鉴定     

于培发  刘志杰  牛庆丽  杨吉飞  王振国  翟斌涛  潘玉平  关贵全  罗建勋  殷宏 《中国畜牧兽医》2017,44(1):214-220

为获得伽氏疏螺旋体尚志株（B. garinii SZ）的P66蛋白,本研究从培养的螺旋体菌液中提取总RNA,反转录合成第一链cDNA,利用PCR扩增P66基因。将目的片段连接表达载体pET-30a（+）,并转化大肠杆菌表达菌BL21（DE3）,经PCR、双酶切及测序验证正确后,进行IPTG诱导表达和纯化,然后将纯化的融合蛋白免疫新西兰大白兔,制备多克隆抗体。SDS-PAGE结果显示,获得约70 ku的表达产物;Western blotting分析表明,表达产物与抗His标签的小鼠单克隆抗体、螺旋体鼠源阳性血清、兔抗P66多克隆抗体均能发生反应,获得的多克隆抗体也可识别天然蛋白。本试验成功表达了B. garinii SZ株P66蛋白,并制备了多克隆抗体,为后续B. garinii SZ株P66蛋白的功能研究奠定了基础。  相似文献   

RP-HPLC法测定杜仲增免液中松脂醇二葡萄糖苷的含量     

郑义  陈晓兰  管远红  贾纪萍  杨海峰  李士洋  李冉 《中国畜牧兽医》2017,44(7):2197-2202

试验旨在建立测定杜仲增免液中松脂醇二葡萄糖苷含量的RP-HPLC法。以Inersustain^® C18（250 mm×4.6 mm,5 μm）为色谱柱,乙腈-0.2%磷酸（15：85）为流动相,流速1.0 mL/min,柱温35℃,紫外检测波长277 nm。以乙酸乙酯作为提取溶剂,在所建立的色谱条件下测定供试品溶液,以理论塔板数和分离度作为系统适用性指标。对对照品松脂醇二葡萄糖苷溶液进行线性回归,确定线性范围,考察分析方法的精密度、稳定性、重现性,并进行加样回收试验。结果显示,用所建立的方法测定供试品溶液中松酯醇二葡萄糖苷理论塔板数为8 588,分离度为3.046。松脂醇二葡萄糖苷对照品溶液在6~192 μg/mL浓度范围内线性关系良好,相关系数为0.9996;精密度试验结果显示松脂醇二葡萄糖苷对照品溶液峰面积相对标准偏差（relative standard deviation,RSD）为0.74%;重现性和稳定性试验结果显示供试品溶液中松酯醇二葡萄糖苷峰面积RSD分别为4.50%和2.69%;平均加样回收率为98.74%,RSD为0.65%（n=9）;在所建立的色谱条件下,供试品中松脂醇二葡萄糖苷的平均含量为0.124~0.127 mg/mL。结果表明,应用该方法测定杜仲增免液中松脂醇二葡萄糖苷的含量,系统适用性好,精密度高,重现性和稳定性好,回收率高,快速简便、准确可靠,可作为杜仲增免液中松脂醇二葡萄糖苷含量测定方法。  相似文献   

基于GIS的星云湖流域生态敏感性评价   总被引：3，自引：0，他引：3  

李益敏  管成文  朱军 《水土保持研究》2017,(5)

基于GIS技术,根据星云湖流域主要生态问题选取6个因子,采用多因子加权求和模型对星云湖流域生态敏感性及其空间分布进行了评价分析,并按生态敏感性评价值将研究区划分为高度敏感区、中度敏感区、低度敏感区和不敏感区4个等级。结果表明:研究区高度敏感、中度敏感、低度敏感和非敏感区域面积分别为104.08km~2,124.52km~2,102.78km~2,39.30km~2;中度及以上敏感区面积约为228.60km~2,占流域总面积的61.67%,生态敏感性总体较高,空间上主要分布在江城镇、星云湖及其湖滨和雄关乡等;建议将高度敏感区划定为生态保护区加以重点保护,中度敏感区划定为控制发展区,低度敏感区和非敏感区为适宜发展区。评价结果能较好地反映流域综合生态敏感性空间分布特征,可作为流域土地资源开发建设和环境规划与保护的依据,并为高原湖泊流域开展类似研究提供参考。  相似文献   

基于BP神经网络的三峡库区重庆段水资源安全评价   总被引：3，自引：0，他引：3  

龚巧灵  官冬杰 《水土保持研究》2017,(6):292-299

三峡库区水资源安全关系到库区的生态安全,对库区水资源安全利用进行评价,找出问题较为严重的区域,明确其限制因子,从而为库区水资源可持续发展和水资源安全提供科学的决策依据。结合2000—2014年三峡库区水资源安全数据,选取BP神经网络构建水资源安全利用评价模型,结合ARIMA模型进行指标预测,分析了三峡库区重庆段水资源安全利用的时空差异。研究表明:(1)三峡库区重庆段2014年水资源安全利用总体分布在较不安全到较安全之间,渝中区和大渡口区为较不安全等级,沙坪坝区等7个区县为基本安全,其他区县为较安全等级;在子系统的评价中,主城区的社会安全与供需安全等级均为最低,为极不安全和较不安全等级。(2)2000—2014年水资源安全利用等级主要受生态安全因子制约,供需安全因子次之;2015—2020年水资源安全利用等级主要受供需安全因子限制,生态安全因子次之。2000—2020年水资源安全利用等级总体呈上升趋势。  相似文献   

聚合氨基酸对北方水稻土中氧化铁存在形态的影响   总被引：1，自引：0，他引：1  

查文文  关连珠  张广才  张昀  高晓丹  陈伟伟  吴春龙  王明达  姜雪楠  潘林林  张婷  赵雅 《中国生态农业学报》2017,25(4):616-622

为了解不同类型水稻土中氧化铁含量特征,探明添加外源聚合氨基酸对水稻土中氧化铁形态变化的影响,本研究以中国北方不同类型水稻土(棕壤型、草甸土型和滨海盐渍型)为研究对象,设置添加占供试土壤干重0.05%的γ-聚谷氨酸和聚天冬氨酸处理,以不添加氨基酸作为对照。通过室内恒温厌氧培养30 d后,测定各水稻土全铁、游离氧化铁、无定形氧化铁和络合态铁含量及氧化铁的活化和络合程度。结果表明:供试的北方3种典型水稻土中,游离氧化铁含量为滨海盐渍型草甸土型≥棕壤型,络合态铁含量为棕壤型滨海盐渍型≥草甸土型,而无定形氧化铁含量为棕壤型滨海盐渍型草甸土型。两种外源聚合氨基酸对不同类型水稻土氧化铁形态转化能力影响存在差异,与不添加氨基酸的对照相比,添加γ-聚谷氨酸的棕壤型水稻土无定形氧化铁和络合态铁含量分别增加27.72%和32.25%,聚天冬氨酸对无定形氧化铁和络合态铁含量无显著促进作用;在草甸土型水稻土中,γ-聚谷氨酸和聚天冬氨酸均能显著增加无定形氧化铁含量,且与对照相比,络合态铁含量分别增加136.24%和12.00%;γ-聚谷氨酸能有效促进滨海盐渍型水稻土中无定形氧化铁和络合态铁的生成。总之,添加γ-聚谷氨酸和聚天冬氨酸对水稻土游离氧化铁的含量没有明显影响;而添加γ-聚谷氨酸能有效增加水稻土中无定形氧化铁和络合态铁含量,降低晶胶率,有利于提高土壤中有效铁含量,显著活化铁氧化物,抑制各类型水稻土中铁的结晶老化;而聚天冬氨酸对水稻土无定形氧化铁和络合态铁没有明显的激发效应。  相似文献   

2个野扁桃自交不亲和SFB基因全长的克隆与序列分析     

曾斌  关鹏  李疆  罗淑萍  李伟阳  田嘉  李鹏 《经济林研究》2017,35(2)

为给野扁桃的遗传改良和自交不亲和机制的进一步研究提供理论依据,以新疆野扁桃花药为试材,利用RT-PCR和RACE技术克隆野扁桃自交不亲和性花粉特异性决定因子编码基因SFB全长序列。采用BLAST进行序列比对,ORF Finder寻找开放阅读框,CDD分析蛋白保守结构域,Prot Param分析蛋白理化性质,TMHMM预测蛋白跨膜区,Signal P预测蛋白信号肽,Sub Loc预测蛋白亚细胞定位,SOPMA分析蛋白二级结构,DANMAN进行氨基酸多序列比对,MEGA6进行系统进化分析,Prot Fun预测蛋白功能。结果表明:克隆到的Pt SFB16基因和Pt SFB17基因属于F-box基因家族,与其它多种植物的SLF/SFB基因的序列相似度为88%,推导的氨基酸序列均具有F-box蛋白典型结构;Pt SFB16基因ORF长1 146 bp,编码381个氨基酸,Pt SFB17基因ORF长1 131 bp,编码376个氨基酸;预测2个SFB蛋白均为略显亲水性、不稳定的细胞质蛋白,二级结构均以α-螺旋,延伸链和无规则卷曲为主,SFB/SLF蛋白在蔷薇科李属植物中具有较高的系统进化一致性,种间同源性可能大于种内同源性,SFB蛋白可能的功能主要有辅助因子生物合成、能量代谢和裂合酶。  相似文献   

清末广州河南伍家花园考     

关晓辉 《广东园林》2017,39(2)

清末的伍家花园是行商伍秉鉴耗巨资在广州河南所修建的私园,其造景手法和营造工艺达到本地区的顶峰水平。在其遗址已经消失的条件下,通过整理和比较同时期造访过伍家花园的西方人留下的游记、绘画、照片等材料,复原伍家花园的布局和主要建筑,为进一步研究这座清代名园提供重要的参考。  相似文献   

基于信息化的国家林业科技推广成果库探析   总被引：1，自引：0，他引：1  

彭鹏飞  祝彦杰  宋红竹  佟金权  关世英 《福建林业科技》2017,44(1)

采用信息化设计,构建基于网络管理的国家林业科技推广成果库信息系统。根据流程式理念,采用不同用户、不同管理权限的方式构建国家林业科技推广成果库信息系统,其中包括成果信息填报、成果信息审核以及成果查询检索等模块,利用查询检索功能实现了林业科技成果的信息化管理与应用。林业科技成果与互联网的结合扩大了社会影响力,可为信息化环境下加快科技成果转化与推广示范奠定一定的实践基础。  相似文献   

基于景观水文理论的郊野型河道景观规划设计——以山东平度市白沙河、泽河为例     

关伟锋  蔺宝钢 《福建林业科技》2017,44(1):116-120

针对我国北方郊野型河流多数存在河道干旱缺水,堤线不完整,缺乏系统的防护林带,垃圾倾倒及生境退化等诸多问题,基于景观水文理论,以山东平度市白沙河、泽河综合治理为例,探讨以"中心浅河道"型河道断面营造"有水则蓝,无水则绿"的常态化有水河道景观;以水文、水利与景观相融合的视角探讨城市雨水、再生水补充河道景观用水的多元化补水方法;以低成本、低管护的野生草花营造郊野型植物景观意向;同时探讨以较少人工干预、较少投资,融绿道体系于郊野型河道,完善其游憩功能的规划设计方法。  相似文献   

(-)-N-二苯亚甲基甘氨酸薄荷醇酯的简易合成          下载免费PDF全文

刘盛蜀  刘章琴  郭鑫  吴萌  马学兵  管晓渝   《西南大学学报(自然科学版)》2017,39(1):128-131

报道了(-)-N-二苯基亚甲基甘氨酸薄荷醇酯的简捷高效的制备方法,由甘氨酸和薄荷醇直接酯化,再和二苯甲酮亚胺缩合,以较高的产率得到目标产物.此过程不需要保护氨基,缩合反应无需使用催化剂,反应条件温和,绿色环保,经济节能.  相似文献