家蝇幼虫双翅肽MdDpt I成熟肽基因的克隆与原核表达     

孙小宁  马红霞 《中国兽药杂志》2015,49(1):1-5

对鸡沙门氏菌诱导家蝇幼虫构建的抑制性消减文库(SSH)中筛选得到的家蝇双翅肽I(Musca domesticaDiptericin I,MdDptI)基因进行克隆、表达,并对表达产物的抑菌活性进行初步研究。以沙门氏菌诱导家蝇幼虫cDNA为模板,采用cDNA末端快速扩增技术(RACE),对MdDptI基因进行扩增,并对扩增产物进行测序和生物信息学分析,进一步去掉信号肽并构建重组表达质粒pET-28a-MdDptI,转化大肠杆菌BL21(DE3),IPTG诱导表达,对表达产物进行SDS-PAGE电泳分析。借助亲和纯化获得目的蛋白,并验证目的蛋白的生物活性。MdDptI基因全长为419 bp,包含一个300 bp的完整开放阅读框(ORF),编码99个氨基酸,其cDNA序列与GenBank中登录号为FJ794602.1的家蝇双翅肽基因同源性为95%。构建了家蝇MdDptI基因的成熟肽原核表达质粒pET-28a-MdDpt-I,并获得成功表达,表达产物约为12 ku,与预期结果一致。纯化后的目的蛋白表现出一定的抑菌活性。本试验获得了MdDptI基因的全长序列,构建了原核表达载体,并成功获得表达纯化。  相似文献   

不同药剂浸泡处理对山桃稠李种子发芽的影响   总被引：1，自引：0，他引：1  

周金梅  朱敬 《经济林研究》2015,(1)

为了促进山桃稠李种子萌发,提高山桃稠李种子繁殖的发芽率,以清水作为对照,采用不同浓度的高锰酸钾、过氧化氢、赤霉素对山桃稠李种子进行处理,比较不同药剂、不同浓度及不同处理时间对山桃稠李种子发芽的影响。结果表明:不同药剂处理的种子发芽率有显著差异,不同处理时间之间没有显著差异,各药剂处理按照发芽率由高到低的顺序排列依次为高锰酸钾、赤霉素、过氧化氢、水处理。对发芽促进效果最佳的组合是0.7%的高锰酸钾浸泡处理48h,发芽率可达88%。  相似文献   

Quantification of allele E198A in beta-tubulin conferring benzimidazole resistance in Monilinia fructicola using real-time PCR     

Luo Y  Ma Z  Michailides TJ 《Pest management science》2007,63(12):1178-1184

BACKGROUND: Thiophanate-methyl, a member of the benzimidazole class of fungicides, is used in California to control brown rot of stone fruit caused by Monilinia fructicola (G. Wint.) Honey. The goal of this study was to develop a real-time polymerase chain reaction (PCR) assay as an efficient method to quantify the E198A allele of beta-tubulin that confers benzimidazole resistance. RESULTS: Using the real-time PCR assay, the frequency of allele E198A (FEA) in a population was determined from the quantities of DNA amplified with the E198A allele-specific primer pair HRF/HRR and the M. fructicola-specific primer pair MfF6/MfR6. The average proportions of highly resistant isolates determined with the conventional fungicide sensitivity method were within the range of average FEA values determined with the real-time PCR assay. We also determined the FEAs of M. fructicola populations sampled from 21 stone fruit orchards in California. Only one orchard showed a high FEA over 0.20, seven orchards had values between 0.01 and 0.1, and 13 orchards had values less than 0.01. CONCLUSION: The real-time PCR assay developed in this study provides a potentially useful tool to efficiently quantify benzimidazole resistance for large M. fructicola populations.  相似文献   

梅PmARF17克隆及其在花发育中与内源激素的调控模式     

李艳林  SHAHID Iqbal  侍婷  宋娟  倪照君  高志红 《中国农业科学》2021,54(13):2843-2857

【目的】分析梅PmARF17的生物学功能,探究梅花发育进程中其表达丰度与内源激素动态变化的关系,为梅花发育的调控研究提供依据。【方法】以梅品种‘大嵌蒂’为试材,克隆PmARF17,利用生物信息学软件分析基因结构、系统进化及其与其他物种同源蛋白的差异;亚细胞定位确定PmARF17蛋白在细胞中作用的部位;以梅品种‘大嵌蒂’和‘龙眼’不同发育阶段的花芽、叶芽、花器官为试材,利用qRT-PCR检测PmARF17时空表达模式,通过UPLC法测定IAA、GA₃、ABA、ZT含量的动态变化,并与PmARF17的表达进行相关性分析;克隆PmARF17启动子,分析启动子的顺式作用元件,利用瞬时表达解析PmARF17与GA₃的调控模式。【结果】从梅品种‘大嵌蒂’中克隆得到PmARF17,系统进化树分析表明PmARF17蛋白与其他植物的ARF蛋白序列高度同源;亚细胞定位表明其作用于细胞核和细胞膜上;qRT-PCR表达和内源激素含量的相关性分析表明,PmARF17的表达与IAA含量的变化趋势没有明显的相关性。PmARF17在雌蕊完好花芽中的表达水平相对不完全花芽显著上调,而GA₃含量与PmARF17的表达趋势一致。ABA和ZT含量总体上与PmARF17的表达呈相反的趋势,表明两者可能抑制PmARF17的表达。PmARF17启动子含有GA顺式元件,且具有启动活性和组织表达特异性,在花瓣、雄蕊及根部特异表达。【结论】 PmARF17可能是梅花发育的正调控基因,促进梅雌蕊的正常发育。PmARF17的表达可能受到GA₃的正调控,其可能通过作用于雄蕊和花瓣,进而影响梅的雌蕊发育进程。  相似文献   

阿拉善荒漠区蒙古扁桃的种群龄级结构与空间分布格局     

黄小鹏  斯琴巴特尔  吴榕 《内蒙古林业科技》2014,(1):7-11

根据样地调查数据,编制了阿拉善荒漠区敖隆敖包及乌兰腺吉蒙古扁桃种群静态生命表,并由此求得蒙古扁桃种群大小级结构图、存活曲线及死亡率曲线,从而对两地蒙古扁桃种群空间分布格局进行了比较研究。结果表明,两地蒙古扁桃种群幼龄和老龄级个体较少,中龄级个体较多。总体上,敖隆敖包蒙古扁桃种群年龄结构呈稳定型,而乌兰腺吉种群趋向衰退型。两地存活曲线处于DeeveyⅡ和DeeveyⅡ2。两地种群空间分布格局均呈聚集型分布。分析表明,草畜平衡在蒙古扁桃种群稳定型中发挥着重要作用。  相似文献   

Changes induced by osmotic stress in the morphology,biochemistry, physiology,anatomy and stomatal parameters of almond species （Prunus L. spp.） grown in vitro     

Shakiba Rajabpoor  ;Soghra Kiani  ;Karim Sorkheh  ;Farahnaz Tavakoli 《林业研究》2014,25(3):523-534

We investigated the influence of different levels of osmotic stress on growth and development in selected wild almond species(eight Prunus spp.) grown in vitro. The study, while endorsing the efficacy of in vitro screening of auxiliary buds of wild almond for osmotic stress tolerance, showed species variability in its response to osmotic stress. Osmotic stress reduced growth and development of all the species. However, the putative tolerant Prunus spp. showed better performance than the putative susceptible genotypes. On average there was an 80% decrease in shoot dry weight at-1.2 MPa. Reduction in shoot weight was more common in osmotic stress-susceptible species in the section labeled ‘Euamygdalus'. The tolerant Prunus species produced smaller changes in biochemical responses than the sensitive cultivars for malondialdehyde content, catalase activity, relative permeability of protoplast membranes, and net photosynthetic rate. The tolerant species maintained cell integrity better than drought sensitive species. Wild almond species in the section labeled ‘Spartioides'(Prunus arabica(Olivier) Neikle, Prunus glauca (Browicz) A.E. Murray, Prunus scoparia Spach) and ‘Lycioides'(Prunus lycioides Spach, Prunus reuteri Bossi. et Bushe) were best adapted to osmotic stress. Increase in chlorophyll concentration and leaf thickness under high osmotic stress can be considered as preliminary selection parameters for osmotic stress tolerance in Prunus spp. The study confirmed the efficacy of the in vitro method for screening of large number of genotypes for osmotic stress tolerance in wild almond species.  相似文献   

基质配方和容器对红叶樱花容器苗生长的影响   总被引：2，自引：0，他引：2  

王慧娟  孟月娥  王利民  李艳敏 《河南农业科学》2014,43(8)

为促进新优园林观赏植物容器苗的培育和应用,以红叶樱花为试验材料,研究基质配方和容器类型对容器苗生长的影响.结果表明:基质配方对容器苗的生长有一定的影响.其中A2基质(泥炭∶珍珠岩∶蛭石=5∶3∶2)容重最小,饱和含水量最大,分别为0.283 0 g/cm2和47.243％;植株在此基质中生长表现最佳,其地径、根冠比和根系活力均最大,分别达到4.488 mm、5.502 4和71.343 3μg/(g·h).容器类型对容器苗根系发育的影响较为明显.控根容器最佳,其中植株根冠比最大,达到5.603 3;根系活力为67.379 3 μg/(g·h),约为塑料营养钵和无纺布袋的1.3倍,并且根系结构合理,须根数量极多;其次为无纺布袋容器.综合考虑,红叶樱花容器苗的最佳培育基质配方为泥炭∶珍珠岩∶蛭石=5∶3∶2,培育容器为控根容器.  相似文献   

干旱胁迫对福建山樱花和日本樱花幼苗内源激素的影响     

李书平  魏建康  张迎辉  荣俊东  许雅明  郑郁善  陈礼光 《热带作物学报》2014,35(6):1143-1147

以1年生福建山樱花和日本樱花实生苗为试材,设置对照(CK)、轻度干旱胁迫(LS)、中度干旱胁迫(MS)、重度干旱胁迫(HS)4种处理,探究干旱胁迫对福建山樱花和日本樱花幼苗内源激素的影响。结果表明:2个树种在LS处理下,GA3(赤霉素)和IAA(生长素)的含量均高于对照,ABA(脱落酸)的含量和对照无显著差异。在MS和HS处理下,GA3和IAA含量呈现明显降低趋势,ABA、ABA/GA3和ABA/IAA的含量呈现明显的增加趋势。随着干旱胁迫处理时间的延长,在LS处理下,GA3、IAA和ABA的含量无显著变化,而MS和HS处理中,GA3和IAA含量呈现出下降趋势,ABA含量、ABA/GA3和ABA/IAA呈增加的趋势。随着干旱胁迫程度的加深,福建山樱花ABA、GA3、IAA、ABA/GA3和ABA/IAA的含量均要低于日本樱花,这表明日本樱花比福建山樱花可能存在着更强的通过调节自身的激素水平来应对外界干旱胁迫的能力,这可能正是日本樱花比福建山樱花更加抗旱的生理机制之一。  相似文献   

木奈叶片乙醇酸氧化酶基因全长 cDNA的分离与表达研究     

赵利  陈桂信  潘东明  王玉珍  吕恃衡  姜翠翠 《江西农业大学学报》2014,(5)

乙醇酸氧化酶（ glycolate oxidase,GLO）是植物光呼吸途径中的一种限速酶,催化羟乙酸盐氧化成乙醛酸盐和H2 O2,与植物的诱导抗病性密切相关。试验从已构建好的木奈（ Prunus salicina Lindl．var．cordata J．Y．Zhang et al．）5个不同生长发育时期叶片的均一化全长cDNA文库中分离得到了一个乙醇酸氧化酶（ GLO）基因,命名为PsGLO。序列分析表明,PsGLO基因cDNA全长为1531 bp,开放阅读框为1122 bp,编码374个氨基酸。氨基酸多重序列比对表明,该基因与陆地棉乙醇酸氧化酶基因相似性最高,为90％。荧光定量PCR分析表明, PsGLO基因在木奈叶中木奈叶芽、展开叶、幼叶、成熟叶、老叶5个不同生长发育时期中都有表达,其中,老叶中表达量最高,叶芽最低。  相似文献   

3种植物生长调节剂对紫叶稠李扦插生根的影响   总被引：2，自引：0，他引：2  

许宏刚  汉梅兰  程晓月  王梅 《甘肃林业科技》2014,39(3):23-26

试验研究不同质量浓度（50、100、200 mg/L）的植物生长调节剂吲哚乙酸（IAA）和吲哚丁酸（IBA）、萘乙酸（NAA）和不同处理时间（30 min、60 min）对紫叶稠李扦插生根的影响。结果表明：30 min、60 min不同质量浓度IAA和NAA均未显著促进紫叶稠李扦插生根,而与CK相比,30 min、60 min IBA处理50、200 mg/L显著促进了紫叶稠李的生根率、根长及根数,且60 min IBA处理50 mg/L效果显著。表明植物生长调节剂IBA对紫叶稠李扦插生根的效果优于IAA和NAA,且60 min IBA处理50 mg/L是最佳组合。  相似文献