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991.
992.
为体外构建NLRP3炎症复合体,利用PCR方法扩增目的基因NLRP3、IL-1β、ASC和Pro-Caspase-1,分别连接到相应的载体中,构建重组真核表达质粒p3XFLAG-NLRP3、pEGFP-C1-ASC、pEGFP-C1-IL-1β、PCI-CASP-HA,利用Lipofectamine2000试剂转染到HEK293T细胞后,采用Western blot方法验证各蛋白的表达情况;通过质粒共转染体外构建NLRP3炎症复合体,采用ELISA方法检测IL-1β生成情况。结果显示,3XFLAG-NLRP3、pEGFP-C1-ASC、pEGFP-C1-IL-1β、PCI-CASP-HA重组质粒均被成功构建,各蛋白于HEK293T细胞内均被成功表达;质粒共转染后ELISA检测到高水平的IL-1β生成,表明NLRP3炎症复合体体外构建成功。NLRP3炎症复合体在体外的成功构建,为进一步研究其激活机制奠定了基础。 相似文献
993.
为满足兽用生物制品免疫攻毒试验需求,参照实验动物设施建设相关国家标准及生物安全实验室建筑技术规范,设计和建设了一个双走廊模式、屏障环境、符合生物安全二级要求的动物生物安全二级实验室(ABSL-2),可满足使用清洁级以上的实验动物进行的感染性试验的需求。本文针对ABSL-2的设施设计要点、生物安全控制等相关理念和内容进行了阐述,强调建设过程应高度关注生物安全防护问题,以期为建设相关单位建设实验室提供信息参考。 相似文献
994.
试验旨在研究TLR4(Toll like receptor4)蛋白在子宫内膜组织中具体的分布与表达,从而构建TLR4真核表达载体,为TLR4在细胞水平上的功能研究提供一种技术手段.选择早期妊娠绵羊(9d、13d、17d、21d、25d)子宫组织,采用免疫组织化学和细胞免疫学抗体着色法检测各阶段子宫组织中TLR4蛋白的分布与表达,确定受体蛋白的表达部位.同时将构建的pcDNA3.1-TLR4质粒转染到确定的受体细胞,检测TLR4蛋白的表达水平.结果表明:TLR4蛋白在子宫内膜各部位均有表达,呈一定的动态时空模式,且第17d胚胎附植后主要表达于内膜基质细胞;重组质粒转染到基质细胞后,TLR4蛋白的表达水平明显增强.此研究成功构建pcDNA3.1-TLR4表达载体,为TLR4在生殖细胞免疫学功能的研究奠定了一定的理论基础. 相似文献
995.
996.
复杂的网络舆情给高校的思想政治工作提出了新的挑战,保障高校信息文化安全势在必行。网络信息安全技术保障体系是占领网络舆情阵地的必要保证,文中详细阐述了网络舆情安全技术保障体系建设的要点。 相似文献
997.
结合水产专业近几年的教学生产实习情况,对西南大学荣昌校区水产系实习基地建设的意义、模式和效果进行了总结,并对加强教学生产实习基地建设提出了5项措施:建立相应的组织管理机构,完善制度建设;加大投入力度;加强指导教师队伍建设,充分发挥其教学主导作用;做好学生实习的考核工作;开展教学研究,提高教学水平,保证教学质量。 相似文献
998.
葛恒云 《四川畜牧兽医学院学报》2008,(2):26-30
马克思在运用唯物史观深入剖析和批判资产阶级和小资产阶级社会主义者的公平观的过程中,阐述了马克思主义关于公平的理论,指出公平是一个历史的、社会的、阶级的范畴。马克思的公平理论,是人类历史上对于公平问题探讨的集大成者,是阶级性、革命性和科学性的统一,成为指导无产阶级和广大人民群众争取自身解放的有力武器。维护社会公平,是建设和谐社会不可或缺的重要组成部分。维护社会公平,首先要大力发展经济;科学发展观是推动我国经济社会发展的根本指针和维护社会公平所应遵循的基本原则;我们必须建立健全保障社会公平的制度,制度能营造、保护和巩固社会公平的成果。 相似文献
999.
胡锦涛总书记在党的十七大报告中提出中国特色社会主义民主政治理论。至此,中国社会主义民主政治建设上了一个新台阶。根据中国特色社会主义民主政治建设在不同时期取得的成就将其进程大致分为五个阶段,通过对中国社会主义民主政治建设的发展历程的分析,总结中国社会主义民主政治建设的主要经验,从而以史为鉴,开创未来。 相似文献
1000.
CHEN Teng-xiang LI Hong-mei HU Shui-wang ZHAO Ming-zhe LIU Ya-wei LIU Jing-hua JIANG Yong 《园艺学报》2008,24(6):1155-1160
AIM: To construct prokaryotic expression vector for human C-reactive protein (CRP), to acquire the functional fusion protein purified from BL21(DE3) transformed with vector pET14b/EGFP-hCRP, and to observe the internalization of the fusion protein his-EGFP-CRP into tumor cell line HeLa. METHODS: CRP gene sequence was amplified with the vector p91023/CRP as template by PCR, and was inserted into vector pET14b/MCS-EGFP-(N)36 to construct prokaryotic expression vector. The E. coli cells BL21(DE3) transformed with the re-constructed vector pET14b/EGFP-hCRP was induced by isopropyl-β-D-thiogalactopyranoside (IPTG), and the expressed protein his-EGFP-CRP were purified with affinity chromatography method and refolded with gradient filtration. The HeLa cells were observed under the fluorescence microscopy after the addition of purified renature protein. RESULTS: The results of identification by PCR, digestion with restriction endonuclease and sequencing indicated the construction of vector pET14b/EGFP-hCRP was correct; the SDS-PAGE showed that the transformed E. coli cells could be induced to express the fusion protein his-EGFP-CRP and the purification of proteins were successful. We could found fluorescent signal around the cell membranes, in the cytoplasm and nuclei in the observation of the HeLa cells incubated with his-EGFP-CRP. CONCLUSION: The prokaryotic expression vector for human CRP linked with his and EGFP coding sequence is successfully constructed. The fusion protein his-EGFP-CRP is purified and refolded. The reconstructed protein expressed by prokaryotic cells adheres to the membrane of tumor cell HeLa and is internalized into the cytoplasm and nuclei of the cells. 相似文献