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101.
102.
103.
磺胺甲恶唑单克隆抗体的研制   总被引:1,自引:0,他引:1  
常用的磺胺类药物有十几种,磺胺甲恶唑(Sulfamethoxazole,SMX)是其中一种。近年来磺胺类药物不合理应用带来其不良后果,造成耐药菌株增加,动物性食品中磺胺类药物的残留,以及可能对人们的健康造成潜在的危害等,由此已引起了国内外的高度重视。因此对磺胺类药物残留的检测日显其重要。目前检测磺胺类药物残留的化学方法有高效液相色谱法、薄层色谱法和气相色谱法等,这些方法虽然灵敏、准确,但检测时间长、耗资大、对人员要求高,不适合大量样品的筛选测定。  相似文献   
104.
通过SDS-PAGE方法对猪囊尾蚴囊液抗原成分进行了分离鉴定,并分别分离纯化了其中的16 000和10 000特异性蛋白质成分;将16 000和10 000纯化蛋白质成分分别做成佛氏佐剂苗,分组免疫BALB/c小鼠,超免后,无菌取脾脏制备脾细胞,分别与NS0骨髓瘤细胞进行融合,经阳性筛选和特异性鉴定获得2株分泌猪囊尾蚴特异性单抗的杂交瘤细胞,命名为TSCF-1611H12B8和TSCF-1012G5B5。免疫学鉴定结果表明,单抗TSCF-1611H12B8和TSCF-1012G5B5与猪细颈囊尾蚴、旋毛虫、住肉孢子虫和蛔虫抗原间不存在交叉反应;单抗TSCF-1611H12B8识别囊液中16 000和10 000蛋白质抗原条带,而单抗TSCF-1012G5B5识别囊液中的10 000蛋白质条带。  相似文献   
105.
以纯化的猪传染性胃肠炎病毒重组M蛋白免疫BALB/c小鼠,按常规方法进行融合、筛选,最终获得3株抗TGEVM蛋白的杂交瘤细胞系1B3、3C2、4A5,染色体平均记数为89对、92对、90对,间接ELISA检测1B3、3C2、4A5细胞培养上清的效价分别为1/4000、1/1000、1/4000,腹水效价分别为2×10~4、2×10~5、2×10~5。通过间接ELISA做病原检测,这3株单抗不与猪流行性腹泻病毒、猪伪狂犬病病毒和猪轮状病毒发生交叉反应,而与传染性胃肠炎病毒显示良好的特异性。用制备的单抗通过间接免疫荧光做病原检测,发现染色后TGEV感染的细胞培养物在胞浆和细胞膜上出现黄绿色荧光,未接种病毒的细胞培养物未见有黄绿色闪亮荧光,结果表明,所制备的抗重组TGEVM蛋白的单抗对病原检测具有很高的特异性,为TGEV准确快速的病原诊断和TGEV感染相关的基础性研究提供了物质基础。  相似文献   
106.
己烯雌酚(Diethylstilbestrol,英文缩写为DES)是一种人工合成的二苯乙烯类雌激素药,最初曾作为添加剂被添加在饲料中以促进动物生长。虽然随着其致癌性的发现,我国农业部在1997年以3号文公布禁止使用该药,但当前我国在畜禽产品及水产品中滥用DES现象依然存在,检测工作依然十分必要。目前己烯雌酚的残留检测工作已逐渐简化,而样品的前处理过程越来越成为兽药残留分析过程中的关键[1]。经典的样品前处理方法通常繁琐复杂、操作时间长、选择性差,满足不了兽药残留分析发展的新要求。免疫亲和色谱技术作为一种新的样品前处理技术被逐渐应用到…  相似文献   
107.
用与细胞色素C交联的氨苄青霉素(Ampcy)免疫的BALB/c鼠脾细胞与SP2/0鼠骨髓瘤细胞融合,经筛选、克隆,获得3株能稳定传代并分泌抗青霉素的单克隆抗体的杂交瘤细胞(1C1,2C11K和207),并分别制备它们的单克隆抗体腹水。3株单克隆抗体腹水的间接ELISA效价在10“以上,1C1和2C11的抗体类型及亚类均为IgG1,而207为IgM,3株单克隆抗体的轻链均为k链。3株单克隆抗体(1C1、2C11、2G7)的青霉素50%抑制质量浓度分别为45.3、60.1、80.0μg/L。间接竞争酶联免疫吸附试验(CI—ELISA)显示,3株单克隆抗体对青霉素类和先锋霉素类抗生素有特异性反应,而对链霉素、卡那霉素、氯霉素、土霉素、四环素、新霉素其他抗生素没有交叉反应,可用于青霉素类抗生素残留的检测。  相似文献   
108.
为建立利用单克隆抗体检测猪附红细胞体病的间接免疫荧光(IFA)方法,用抗猪附红细胞体的单克隆抗体,对48份疑似猪附红细胞体感染的病猪猪血进行免疫荧光检测,并与血涂片镜检及PCR检测方法进行比较,结果显示IFA检测的阳性率为68.75%,与PCR检测阳性率为77.08%符合率较高,比血涂片的瑞氏和姬姆萨染色镜检阳性率高出近30个百分点;而用猪肺炎支原体、猪链球菌和猪巴氏杆菌作对照,结果均呈阴性。建立的用抗猪附红细胞体的单克隆抗体检测猪附红细胞体病的IFA特异性强,敏感性高;检测临床样品的结果准确可靠。  相似文献   
109.
尼帕病毒和亨得拉病毒核蛋白单克隆抗体的制备与鉴定   总被引:2,自引:0,他引:2  
尼帕病毒(Nipahvirus,NiV)和亨得拉病毒(Hendravirus,HeV)是近年来出现的2种新的高致病性副粘病毒,在我国尚未发现。为防范2种病毒在我国的出现,本研究开展了前瞻性工作,成功研制了针对2种病毒核蛋白(N)的单克隆抗体,可用于病毒监测与诊断。首先利用大肠杆菌表达的2种病毒N蛋白免疫BALB/c小鼠,细胞融合后应用间接免疫荧光的方法对杂交瘤细胞克隆进行筛选,获得了5株N蛋白特异单抗。单抗腹水的抗体效价均超过2×10^5,培养上清抗体效价1:64~1:256。Western—blot和间接免疫荧光试验证明,5株单抗均特异针对N蛋白,其中1株(H4D11)只与HeVN蛋白反应,而不与NiVN蛋白反应,表明它具有鉴别2种病毒的能力。所研制的单抗对建立2种病毒的检测技术,用于动物监测,以防范2种新发传染病在我国流行具有重要意义。  相似文献   
110.
抗猪附红细胞体单克隆抗体的制备   总被引:1,自引:0,他引:1  
以纯化的猪附红细胞体免疫BALB/c小鼠,运用淋巴细胞杂交瘤技术进行细胞融合,并用间接ELISA方法进行筛选,经过间接ELISA方法、免疫印迹和间接免疫荧光试验进行鉴定,共获得5株分泌抗猪附红细胞体单克隆抗体的杂交瘤细胞,分别命名为1H1、1H2、3A5、5B1和7E11,其单抗亚类鉴定分别属于IgG2b、IgG1、IgG2b、IgG2b和IgG2b。这5株McAb均能与猪附红细胞体全菌蛋白发生特异性反应,而不与猪肺炎支原体、猪链球菌、大肠杆菌和猪繁殖与呼吸综合征病毒发生反应,并且1H1、3A5和5B1能识别同一抗原位点,1H2和7E11识别另一抗原位点。  相似文献   
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