山羊TNNT3基因可变剪切及其对骨骼肌细胞分化的作用     

陈媛  蔡禾  李利  王林杰  仲涛  张红平 《中国农业科学》2021,54(20):4466-4477

【目的】快速骨骼肌肌钙蛋白T（fast skeletal troponin T3,TNNT3）作为肌钙蛋白(troponin, Tn)家族成员,调节横纹肌收缩、参与骨骼肌的生长发育并影响家畜肉质性状。通过获得山羊TNNT3基因的可变剪切体,分析山羊TNNT3基因可变剪切的表达模式及其在肌细胞分化中的作用,深入解析TNNT3基因在山羊骨骼肌生长发育过程中的作用机制。【方法】基于NCBI已公布山羊TNNT3基因（NM_001314210.1）和牛TNNT3基因（XM_010821200）mRNA序列,使用软件Primer Premier 6.0设计引物,以简州大耳羊胚胎期和出生后7个阶段骨骼肌为试验材料,克隆测序获得山羊TNNT3基因的CDS区可变剪切体,利用软件ORF Finder、EditSeq、DNAMAN、ClustalW和MEGA_X_10.1.8等对序列进行生物信息学分析;进一步设计实时荧光定量（real-time PCR,RT-qPCR）及半定量引物,研究TNNT3基因剪切体在7个不同组织（背最长肌（longissimus dorsi muscle,LD）、半膜肌（semimembranosus muscle,SM）、心、肝、脾、肺、肾）和7个发育阶段（胚胎期E75、E90、E105和出生后B3、B45、B150、B300）肌肉组织（背最长肌和半膜肌）中表达模式;此外,对转录本TNNT3_3进行体外编码能力检测确定其具有编码蛋白的能力,并在山羊骨骼肌卫星细胞（skeletal muscle satellite cells,MuSCs）中过表达,观察细胞形态变化以及检测标志基因的表达变化,研究其对山羊MuSCs分化的作用。【结果】①TNNT3（NM_001314210.1）CDS区全序列主要含有18个外显子,其中外显子16/17相互排斥,转录后单一表达。克隆发现山羊TNNT3基因 5个新转录本（TNNT3_1—5）,其外显子数分别是15、15、20、16、14。②生物信息学分析结果显示山羊TNNT3基因核苷酸序列和氨基酸序列与绵羊、牛、猪等哺乳动物具有很高的一致性,而与鱼类和爬行类动物的一致性较低,说明TNNT3基因序列在哺乳动物高度保守。③TNNT3 mRNA在背最长肌、半膜肌、心、肝、脾、肺、肾7个组织中都有表达,其中在骨骼肌中高度富集(P < 0.01),心脏及肺次之,其余组织中较低;TNNT3 mRNA在背最长肌和半膜肌中的表达始终处于一个动态变化中,胚胎期TNNT3在半膜肌的表达量高于背最长肌（P<0.05）;出生后则背最长肌中高于半膜肌（P<0.05）。④山羊TNNT3基因转录本TNNT3_3重复出现保守的外显子9—11（138bp）,体外翻译实验显示其可编码蛋白且蛋白大小与预期基本相符（37 kD）;相较于对照组,在山羊MuSCs中过表达该转录本使肌分化标志基因Myomaker、MyoG和MyH4 mRNA极显著升高(P < 0.01)。【结论】获得了山羊TNNT3基因具有完整CDS区5个新可变剪切体,TNNT3主要在肌肉组织（背最长肌和半膜肌）中高表达,在哺乳动物中高度保守且促进成肌分化。初步表明TNNT3基因在动物肌肉生长发育中具有重要的生物学功能。  相似文献   

滨水环境景观设计研究——以湖州太湖旅游度假区为例     

刘琳琳  海岩 《林业科技情报》2011,43(1):85-87

湖州市是一座江南古城,有着浓厚的文化底蕴.湖州太湖旅游度假区位于湖州市境内,其区域内河道网络纵横交错,产生了众多的桥梁和滨水地带.为进一步提升湖州滨湖度假区环境品质,增加度假休闲氛围,打造国内一流休闲旅游度假区,现对滨湖休闲景现带的景观设计理念进行研究探讨.  相似文献   

东北农牧交错带小尾寒羊集群放牧系统中钙、磷元素营养状况分析     

李国华  温铁峰 《经济动物学报》2010,14(3):146-153

对我国东北农牧交错带内小尾寒羊集群放牧生态系统中5、7、9月钙、磷元素的营养状况进行了分析。结果表明:牧地土壤中钙、磷元素的总平均含量分别为1.46%、178.88μg/g;小尾寒羊2种主食牧草中钙、磷元素的总平均含量分别为0.39%、256.26μg/g;小尾寒羊羊毛中钙元素的总平均含量为2111.45μg/g;小尾寒羊羊血中钙、磷元素的总平均含量分别为69.65μg/g、10.21μg/g;小尾寒羊羊骨中钙、磷元素的总平均含量分别为4.44%、2.45%。据此认为,在该交错带集群放牧的小尾寒羊不会发生钙缺乏症或中毒病,但可能发生磷缺乏症。  相似文献   

高水肥密植条件下大豆地上部干物重变化动态     

宋英博 《黑龙江农业科学》2010,(9):118-119

在高施有机肥、地下亚表层灌水、窄行密植栽培模式下,对大豆合农60及对照品种垦丰16地上部干物质变化动态进行分析。结果表明:合农60荚干重增加明显,后期干物重积累迅速。在高水肥和小垄密植栽培条件下,窄行密植品种间存在差异,合农60为抗倒伏,适合于窄行密植的高产品种。  相似文献   

高钙饲粮对青年蛋鸡血清一氧化氮浓度和抗氧化功能的影响   总被引：1，自引：0，他引：1  

郭小权  黄克和  曹华斌  胡国良  李浩棠  张彩英 《动物营养学报》2012,(5):933-938

本试验旨在研究高钙饲粮对青年蛋鸡血清一氧化氮（ＮＯ）浓度和抗氧化功能的影响。将 ３５日龄 １００羽伊沙蛋鸡随机均分为对照组（含钙 １．００％）和高钙组（含钙 ３．７８％），每组 ５个重复，每个重复 １０羽。每天观察鸡的精神状态、食欲和粪便情况。在饲喂高钙饲粮第 ０、８、１６、２４和 ３２天时，分别测定 ２组鸡的血清中 ＮＯ浓度和丙二醛含量及抗氧化酶系统的变化。结果表明：１）高钙饲粮能引起青年蛋鸡长期腹泻，在饲喂高钙饲粮的第 ８天就发生高血钙症。２）与对照组相比，高钙组在饲喂高钙饲粮第 ８天和第 １６天血清 ＮＯ浓度无显著变化（Ｐ＞０．０５），第２４天和第 ３２天显著升高（Ｐ＜０．０５）；第 ８天和第 ２４天血清超氧化物歧化酶活性、总抗氧化能力无显著变化（Ｐ＞０．０５），第 １６天显著升高（Ｐ＜０．０５），第 ３２天显著降低（Ｐ＜０．０５）；第 ８、１６、２４天血清丙二醛含量无显著变化（Ｐ＞０．０５），第 ３２天显著升高（Ｐ＜０．０５）；第 ２４天和第 ３２天黄嘌呤氧化酶活性有升高趋势（Ｐ＞０．０５）。结果提示，饲喂高钙饲粮可导致青年蛋鸡发生长期腹泻，引起高血钙症，导致其机体内自由基的产生与清除的动态平衡遭到破坏，使自由基的产生远远超出清除能力。  相似文献   

Content and distribution of lithium in La Pampa soils (Argentina)     

《Communications in Soil Science and Plant Analysis》2012,43(4):299-310

Abstract

Extractable li with ammonium acetate was determined by flamephotometry, in normal soils, alkaline soils and saline soils in the Province of La Pampa (Argentina).

The soils were originated from differents parent material, with various rainfalls (arid to subhumid climate) and management.

The higher contents were found in saline soils. In the other soils the extractable lithium content depends on the parent material, but not on rainfall.

Different patterns of vertical and horizontal distribution of extractable lithium were found.

The origin of extractable lithium is here discussed.  相似文献   

农业院校非英语专业学生口语僵化的激活实验研究     

张璐 《天津农学院学报》2012,19(1):52-54,58

非英语专业大学生英语口语中的语言僵化是一个普遍现象。本文通过教学实践和调查具体分析了大学生口语僵化的原因，从而制定出了口语激活策略，从教学理念、教学方法和考试模式三个方面进行改革。通过一年的教学实践，学生在口语表达时的流利程度、语法词汇的正确使用和交际能力方面都有了显著的提高，而且综合英语能力也有很大提高。实验结果证明，非英语专业大学生的口语僵化是可以被激活的。  相似文献   

联苯菊酯10%水乳剂的配方研究   总被引：1，自引：0，他引：1  

刘振邦  董立峰  王智  张保华 《农药科学与管理》2012,33(3):19-22

本研究通过正交优化得到联苯菊酯10%水乳剂的最佳配方：联苯菊酯原药10%,二甲苯20%,农乳602#3.5%,Tween-20 2.5%,农乳500#2%,乙二醇4%,有机硅消泡剂0.2%,去离子水补足至100%。最佳生产工艺为：使用高速剪切机,剪切转速6 000r/min,剪切时间4min。该水乳剂pH值5.7～6.5,稀释100倍于（30±2）℃恒温水浴24h未出现浮油、沉油、沉淀,经（54±2）℃热贮14d,分解率〈2%,制剂表面张力低,倾倒性佳。  相似文献   

Study on the Stability of Blue-tongue Virus after Long Time Storage in Cold Room     

MIAO Hai-sheng  LI Le  ZHU Jian-bo  XIAO Lei  LI Hua-chun 《中国畜牧兽医》2013,40(6):41-44

In order to understand the stability of blue-tongue virus (BTV)storage in cold room for long time, 18 tissue samples which were kept in 4℃ for 10 to 15 years were test by Real-time PCR, and 10 blood samples which were kept in 4℃ for 15 years were subjected to virus isolation process, then was proved by monoclonal antibody staining,research results showed all old samples were positive in Real-time PCR, further more, 5 live virus were isolated from 10 old blood samples. The results suggested the stability of BTV was higher than we thought before.  相似文献   

Calcium and phosphorus digestibility: Metabolic limits     

《The Journal of Applied Poultry Research》2013,22(3):600-608

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