鸭坦布苏病毒一步法RT-PCR检测方法的建立和应用   总被引：1，自引：0，他引：1  

张帅  云涛  叶伟成  邓晓辉  崔言顺  华炯钢  张存  张燕 《浙江农业学报》2012,24(1):37-40

鸭坦布苏病毒(Duck Tembusu virus,DTMUV)是一种新发现可引起鸭产蛋下降的新型黄病毒,建立一种病原学检测方法对于疫病的诊断和流行病学研究具有重要意义。在对DTMUV序列的比对分析的基础上,设计了1对特异性引物,通过优化PCR反应条件,建立了DTMUV的一步法RT-PCR检测方法。该方法具有特异、快速、敏感、准确等特点,可以检出1.82个TCID50的病毒核酸。对2010年至2011年6月份前的106份产蛋下降鸭群临床病料进行了检测,结果显示样品阳性率为46.2%,表明DTMUV在浙江及其周边省份的产蛋鸭群具有较高的感染率。  相似文献   

2种水稻矮缩病毒一步检测方法的建立   总被引：3，自引：0，他引：3  

杨迎青  周国辉  蒲玲玲  兰波  李湘民 《华中农业大学学报》2012,31(3):337-340

水稻黑条矮缩病毒(RBSDV)和南方水稻黑条矮缩病毒(SRBSDV)是引起水稻矮缩病的2种主要病毒,这2种病毒病在田间危害症状较相似,难以准确鉴定。为建立这2种病毒的一步快速检测方法,从混合引物配比、退火温度2个方面优化了反应体系与反应程序,并用这2类病毒的总RNA进行了RT-PCR验证,最终建立了准确、灵敏、快速的一步检测方法。利用建立的方法对从江西省大余县和南昌县采集的水稻矮缩病毒叶片样品进行检测。结果表明:大余县10份样品均为南方水稻黑条矮缩病毒(SRBSDV),检出率为100%;南昌县10份样品中有7份样品检出南方水稻黑条矮缩病毒(SRBSDV),检出率为70%,另外3份样品检出水稻黑条矮缩病毒(RBSDV),检出率为30%。  相似文献   

柽柳一步成苗离体培养技术   总被引：1，自引：0，他引：1  

韩琳娜  周凤琴 《湖北农业科学》2010,49(11)

为解决沿海滩涂对柽柳(Tamarix chinensis Lour)种苗的大量需求及柽柳快速繁育问题,利用柽柳的嫩芽作为外植体,进行离体培养。结果表明,外植体灭菌使用加有吐温-20的0.1%HgCl2溶液最佳,消毒时间为3min;筛选出的最佳一步成苗培养基为MS+1.00mg/L6-BA+0.05mg/LNAA,其再生植株的频率达7.2。壮苗后的柽柳组织培养苗可以直接移栽到育苗基质中,成活率可达82.7%,说明柽柳一步成苗离体培养技术大大缩短了育苗周期。  相似文献   

基于Erns基因的猪瘟病毒一步法RT-PCR快速检测方法的建立和应用   总被引：2，自引：0，他引：2  

于新友  ;李天芝  ;王金良  ;李峰  ;沈志强 《养猪》2014,(6):93-95

根据猪瘟病毒Erns基因保守序列设计了1对引物,建立了检测猪瘟病毒一步法反转录-聚合酶链（RT-PCR）方法,并对其特异性、敏感性进行了研究。该一步法RT-PCR对CSFV扩增结果为阳性,对照毒株扩增结果均为阴性;对猪瘟病毒检测的灵敏性为10 pg总RNA量。以上结果表明,该一步法RT-PCR特异性强、敏感性高、简便、快速,可用于猪瘟的早期确诊和病毒鉴定。  相似文献   

小麦一簇毛麦6VS／6AL易位材料幼胚一步成苗培养技术集成     

陈升位张琼仙  毛孝强刘思严 王晓丹 《云南农业大学学报(自然科学版)》2006,21(1):20-23,31

基因型差异是影响小麦幼胚一步成苗培养的主要因素。比较了小麦一簇毛麦易位材料与扬麦5号和中国春的一步成苗培养的污染率、成苗率、再生植株生根培养效率等主要技术指标，建立了适用于小麦一簇毛麦易位材料幼胚的一步成苗培养的有效技术体系，为培养纯合的普通小麦一簇毛麦6VS／6AL，小片段易位体系提供了技术支持。  相似文献   

一种构建载体的新方法：一步式混合胶回收连接法     

李顺姬  胡珏  刘双清  成小文  黄国华 《湖南农业大学学报(自然科学版)》2015,41(1):58-62

  相似文献   

水稻花培一次成苗的研究Ⅲ．提高籼稻花培一次成苗效率的试验     

江树业  尹若春  陈启锋 《福建农林大学学报(自然科学版)》1995,(3)

以１５个籼稻品种（系）为花药供体，对籼稻花培一次成苗的培养效果进行了研究．结果表明，１５个籼稻品种（系）的平均愈伤组织诱导率，一次成苗与多级成苗的相近．而平均绿苗分化率，一次成苗明显高于多级成苗的，使籼稻一次成苗的平均绿苗率比多级成苗的高出近１倍；一次成苗还具有白苗率低的优点，其平均白苗率只有多级成苗的１／２．说明一次成苗技术具有推广应用的价值．本文还对完善一次成苗技术及白化苗问题进行了讨论．  相似文献   

低浓度2，4－D提高水稻体细胞成苗研究     

过全生  沈瑛 《中国水稻科学》1996,(2)

以较低浓度（０．２、０．４、０．８ｍｇ／Ｌ）的２，４－Ｄ作为水稻（ＯｒｙｚａｓａｔｉｖａＬ．）的外植体（种子）诱导愈伤组织培养基中的生长素类激素，发现０．８ｍｇ／Ｌ的２，４－Ｄ能较早地使胚的盾片产生大量的愈伤组织，但这些愈伤组织在原培养基上不能分化出绿芽。含０．２ｍｇ／Ｌ的２，４－Ｄ能在胚芽鞘节等部位产生一些较光滑、致密、白色颗粒状的结构或愈伤组织，虽然它们出现较迟，但这些结构物能在原诱导培养基上逐渐转化成芽簇，并产生一些纤细的根。将芽簇分割成小块，转移到加有ＫＴ等的成苗培养基上，能形成大量的幼苗，绿苗频率达８０％以上，明显高于一般报道的水平。试管苗经大田种植后生长整齐一致，能产生出正常的种子。  相似文献   

一步样品处理测定饼干中的油脂和脂肪酸——气相色谱法     

王宗义  庄苑  陈玉莹  黄漫青  韩涛  艾启俊 《北京农学院学报》2013,28(4):67-69

建立了一步样品处理、气相色谱测定饼干中油脂和脂肪酸的新方法。样品、乙酰氯-甲醇和正十九烷酸甲酯的正己烷溶液,于密闭水解管中80℃水浴2h,碳酸钾溶液中和,分层后取上清液,经毛细管柱气相色谱分离,火焰离子化检测器检测。分别以测得的脂肪甲酯总量和相对分量表示样品中油脂含量和各脂脂肪酸的相对组成。结果表明,本法与索氏提取法测定的油脂含量之间无显著差异(P<0.20);市场采集的10个饼干样品中,油脂的含量为18.65%~38.70%,十二烷酸、肉豆蔻酸、棕榈酸、硬脂酸、油酸和亚油酸是脂肪酸组成的主体,5个样品有反式油酸检出,最高含量达总脂肪酸的23.04%。  相似文献   

猪繁殖与呼吸综合征和猪乙型脑炎双重一步法RT-PCR诊断试剂盒的研制     

余波  谭诗文  冉懋韬  徐景峨  史开志  杨丽娟 《广东农业科学》2013,40(10):152-154

根据GenBank中的猪繁殖与呼吸综合征病毒（PRRSV）ORF7N基因、猪乙型脑炎病毒（JEV）NS1基因序列,设计了2对引物,通过反应条件的优化,成功研制了检测PRRSV和JEV的双重一步法RT-PCR诊断试剂盒,扩增产物分别为245、504 bp。敏感性、 特异性结果显示,该RT-PCR诊断试剂盒对2种病毒的最低核酸检测量分别为PRRSV0.2ng/L、JEV 0.4ng/L,而对猪瘟病毒、猪伪狂犬病毒、猪圆环病毒2型、猪细小病毒的扩增结果均为阴性。对52份疑似病猪样品的检测结果表明,该双重一步法RT-PCR诊断试剂盒检测结果与单一PCR检测结果完全符合。结果表明该双重一步法RT-PCR诊断试剂盒具有很好的特异性和敏感性,可用于临床猪繁殖与呼吸综合征和猪乙型脑炎的检测。  相似文献