奶山羊CIDEa基因的克隆、序列分析与组织表达     

李君  吴姣  权凯  候霞飞  杨芳慧  张景锋  赵金艳  魏红芳 《畜牧与兽医》2020,(3):6-11

为获得奶山羊CIDEa基因序列并检测其在乳腺组织中的表达,采用RT-PCR技术从奶山羊乳腺组织扩增CIDEa基因序列,利用生物信息学软件对其进行预测分析,并采用荧光定量PCR检测CIDEa在干奶期和不同泌乳时期乳腺组织中的表达。结果表明:通过克隆测序得到奶山羊CIDEa基因CDS区660 bp,编码219个氨基酸,与GenBank公布的绵羊、牛、人和猪的核苷酸序列同源性分别为99%、96%、85%、85%。奶山羊CIDEa蛋白属于碱性、不稳定亲水蛋白,不存在跨膜结构和信号肽;蛋白主要定位在细胞质、线粒体和细胞核。CIDEa蛋白结构主要由α螺旋、β折叠和不规则卷曲组成。奶山羊CIDEa在泌乳前期、盛期和中期乳腺组织中表达量均显著高于干奶期(P<0.05)。说明CIDEa可能参与奶山羊乳腺的泌乳过程,为进一步研究其在奶山羊乳腺组织中的功能及对乳品质的调控作用奠定基础。  相似文献   

延边黄牛ATF3基因组织表达及其多态性与肉质性状的相关性分析     

邵静  尹宝珍  焦石  张珈溯  张洛萌  耿春银  夏广军 《中国畜牧兽医》2020,47(2):488-496

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ghr-miR160, a Class of Gossypium hirsutum L. MicroRNA,Negatively Regulates the Progress of Leaf Senescence     

Duan Shan  Dou Lingling  Cheng Shuaishuai  Guo Yaning  Pang Chaoyou  Ma Qifeng  Wei Hengling  Fan Shu  Wang Hantao  Yu Shuxun 《棉花学报》2018,30(2):111-118

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Cloning and Expression of Bile Salt Hydrolase Gene from Lactobacillus plantarum M1-UVS29     

Yu Chang-qing  Li Rong 《东北农业大学学报(英文版)》2015,(2):60-66

We cloned and expressed bile salt hydrolase gene of Lactobacillus plantarum M1-UVS29 in Lactococcus lactis NZ9000 successfully. Gene-specific primers for amplification of L. plantarum bsh were designed by using sequence which availabled from Gen Bank. The production of PCR amplicon was confirmed by sequencing and cloned into pMD18-T vector, and then recombined into expression vector p NZ8148 and yielding vector p NZ8148-BSH. p NZ8148-BSH was transferred into Lactococcus lactis NZ9000. Sequencing indicated that the cloned bsh fragment contained 995 nucleotides, and shared 99.3% sequence homology with bsh gene from L. plantarum MBUL10. Cloned bsh fragment was successfully transduced into NICE expression system and confirmed by PCR and restriction digest. Recombinant BSH protein was analyzed by SDS-PAGE. The molecular weight of BSH protein was approximately 37 ku. Activity of the expressed protein was 0.77 μmol · min-1. The successfully expressed proteins by genetic engineering technology made the function of lactic acid bacteria be abundant and laid the foundation for further researches into cholesterol-lowering lactic acid bacterium food and probiotics.  相似文献   

荔枝FKBP16-2基因启动子的克隆与瞬时表达分析     

孙琴  孙进华  王树军  李焕苓  王家保 《热带作物学报》2016,37(4):736-741

前期研究中发现了一个果肉低表达而叶片中高表达的荔枝基因FKBP16-2。本文克隆了该基因1 578 bp的启动子片段并对其功能进行了初步分析,结果表明:荔枝FKBP16-2基因启动子序列中含有大量的TATA-box和CAAT-box保守元件,以及TCA-element,ARE,HSE,GCN4_motif,O2-site等各种转录调控相关的顺式作用元件。该启动子能驱动GUS基因在荔枝的花、叶、根、果皮以及种子中表达而在果肉中不表达,表达具有组织特异性。  相似文献   

MdMYB73的分子克隆及其在苹果愈伤组织和拟南芥幼苗中的盐抗性功能鉴定     

张全艳  刘晓  于建强  胡大刚  郝玉金 《园艺学报》2016,43(11):2073-2078

从‘嘎拉’苹果中克隆了一个MYB转录因子基因(序列号:MDP0000894463)。该基因包含长为729 bp完整的开放阅读框,编码243个氨基酸,预测其蛋白质分子量为26.34 kD,等电点为9.29。系统进化树分析表明,这一MYB转录因子与拟南芥AtMYB73同源序列相似性最高,因此将其命名为MdMYB73。功能域分析表明,MdMYB73蛋白含有保守的R2R3-typeMYB绑定域。荧光定量PCR分析表明,MdMYB73在苹果的各个组织均有表达,在叶片和花中表达相对较高;MdMYB73的表达明显受盐胁迫的诱导。将异位表达MdMYB73的拟南芥幼苗进行抗盐鉴定,结果表明MdMYB73负调控拟南芥盐胁迫抗性;同时,AtSOS1,AtSOS3和AtNHX1抗盐相关基因的表达水平显著降低,表明MdMYB73可能负调控SOS反应,影响拟南芥抵抗高盐胁迫过程。将MdMYB73基因遗传转化苹果愈伤组织,抗盐表型分析表明,MdMYB73过量表达也明显降低了转基因愈伤组织对盐胁迫的抗性。  相似文献   

Whole-genome identiifcation and expression analysis of K+eflfux antiporter (KEA) and Na+/H+antiporter (NHX) families under abiotic stress in soybean     

CHEN Hua-tao  CHEN Xin  WU Bing-yue  YUAN Xing-xing  ZHANG Hong-mei  CUI Xiao-yan  LIU Xiao-qing 《中国农业科学(英文版)》2015,(6)

Sodium toxicity and potassium insufifcient are important factors affecting the growth and development of soybean in saline soil. As the capacity of plants to maintain a high cytosolic, K+/Na+ratio is t...  相似文献   

甘蔗黄叶病毒与花叶病毒CP基因RNAi载体构建与转化甘蔗研究     

陈利平  陈平华  陈忠伟  王恒波  许莉萍  刘迪  高三基  郭晋隆  陈如凯 《热带作物学报》2016,37(1):99-106

甘蔗黄叶病和甘蔗花叶病是我国甘蔗最主要的病毒病,感病品种产量下降和品质变劣,传统方法难以防治。RNA干扰技术使培育抗病毒甘蔗品种成为可能。本研究根据甘蔗黄叶病毒和侵染甘蔗的高粱花叶病毒结构与功能特性,广泛收集不同来源病毒分离物CP基因序列,经过比对选取保守序列作为干扰序列。通过在序列两端添加酶切位点,合成并连接成双价甘蔗黄叶病和花叶病毒干扰序列,然后构建到中间载体p HANNIBAL上,形成双价RNAi干扰结构,最后插入到p ART27上形成干扰表达载体。利用基因枪轰击甘蔗品种福农15号愈伤组织进行转化,经G418筛选获得抗性再生植株。通过提取DNA和RNA分析,证实双价RNAi干扰结构不仅以不同拷贝整合到甘蔗基因组中,而且得到了转录表达。  相似文献   

重组减蛋综合征病毒KnobS干酪乳杆菌的构建与表达     

郭建军  袁林  曾静  邱小忠  付锦楠 《华北农学报》2016,(2):81-86

以干酪乳杆菌为传递载体,以开发食品级安全的减蛋综合征病毒疫苗为目标,构建了一个温度敏感型自杀型质粒系统p ORZP-UKD。将该质粒电转化到干酪乳杆菌L.casei中,经过2次升温处理和5-氟尿嘧啶抗性筛选,挑选阳性克隆,采用PCR和SDS-PAGE方法进行鉴定。KnobS基因整合到干酪乳酸杆菌基因组内,并实现融合蛋白KnobS的分泌表达。表明得到了一株具有无任何选择性标记、携带有KnobS表达盒元件的基因组整合的重组干酪乳酸杆菌KnobSΔupp L.casei,且整合的外源基因能够随着细菌的复制而进行表达,为减蛋综合征病毒免疫保护性抗原KnobS疫苗的进一步研制提供了试验数据。  相似文献   

尊重地域特色,表达地域文化   总被引：1，自引：0，他引：1  

许大为  刘中华 《北方园艺》2011,(23):90-93

随着经济全球化发展,哈尔滨市正处在经济高速发展、城市化进程日益加快之际,城市公园建设正在如火如荼进行中.城市公园对地域文化的表达,对城市地域特色的建立起着至关重要的作用.该文针对哈尔滨兆麟公园的地域文化表达进行研究,希望能对哈尔滨城市公园地域文化表达起到一定作用.  相似文献