基于UPLC-QTOF/MS的小麦发芽代谢组学分析方法   总被引：1，自引：0，他引：1  

Li-Na WANG  Bu-Jun WANG 《作物学报》2019,45(12):1899-1904

为探究不同提取方法对发芽小麦代谢物提取效果的影响,本研究建立了基于超高效液相色谱-四级杆飞行时间质谱(UPLC-QTOF/MS)的发芽小麦非靶向代谢组学样品前处理方法和分析方法,以发芽2 d周麦26籽粒为材料,设计提取溶剂、提取方式、提取时间3个因素在3个水平上L9(34)正交试验,并通过主成分分析和聚类分析确定提取效果最佳的组合。以80%乙腈(0.1%甲酸)震摇提取30 min可检测出1609个代谢峰,说明提取溶剂对代谢物提取效果起主要作用。共鉴定出92种小麦代谢物。  相似文献   

适用于转录组测序的大白菜小孢子总RNA提取方法筛选     

林燕  李菲  张淑江  张慧  章时藩  孙日飞  张振贤 《中国蔬菜》2014,1(11):15

为了找到适用于转录组测序要求的大白菜小孢子总RNA 提取方法，以出胚率较高的吉红82 为试材，以热激诱导处理后的小孢子为研究对象，比较分析了TRIzol 法、改良CTAB 法及超纯试剂盒法3 种方法的RNA 提取效果。结果表明：TRIzol法（磨样）和改良CTAB 法提取的RNA 浓度较高，但完整性较差；超纯RNA 提取试剂盒法提取的RNA 质量最高，且完整性好，能够满足转录组测序的要求。  相似文献   

高含固率木质纤维素厌氧发酵物总DNA的4种提取方法比较     

马旭光  刘素君  江滔  常佳丽  唐琼 《中国沼气》2020,(2):28-35

不同的样本特性和提取方法对获得微生物总DNA的质量有重要影响。文章基于高含固率木质纤维素厌氧发酵物腐殖酸、酚类物质含量高、质地均一性差、微生物浓度低的特点,研究了4种方法提取不同高含固率粪秸厌氧发酵物中微生物总DNA的效果。结果表明,常规的十二烷基磺酸钠法(sodium dodecyl sulfate,SDS)、十二烷基磺酸钠和溴化十六烷基三甲铵结合法(sodium dodecyl sulfate and cetyltrimethyl ammonium bromide,SDS-CTAB)和商业的粪便试剂盒法提取的DNA质量均较差,SDS法和试剂盒法未能获得聚合酶链式反应(polymerase chain reaction,PCR)扩增目的条带,SDS-CTAB法得到的条带较模糊;改进SDS-CTAB法获得的DNA杂质少、纯度高,具有较好的稳定性,A260/A280和A260/A230值分别为1.74~1.86和1.65~1.86,每克样品的DNA浓度在50 ng·μL^-1以上,电泳条带单一齐整、清晰明亮,PCR扩增的目的条带清晰度高,适宜后续分子生物学技术的分析。林格氏液洗脱、聚乙烯吡咯烷酮-40(Polyvinyl Pyrrolidone-40,PVP-40)洗涤液除杂以及裂解液和多种酶联合破壁是改进SDS-CTAB法获得该类专一性样本高质量微生物总DNA的关键步骤。  相似文献   

三七素提取工艺及检测方法的优化     

段绍凤  陈庚  闫静  覃忠明  张广辉  梁艳丽 《热带作物学报》2019,40(11):2255-2260

本研究以三七（Panax notoginseng）植株及其产品和近缘种为研究对象,采用L₉(3 ⁴)正交试验对三七素的提取工艺进行了优化,然后利用HPLC法检测三七素含量,并对各样品中的三七素含量进行了比较分析。结果表明：优化后的三七素提取条件为超纯水、料液比1∶20（g/mL）,提取1次（10 min）;三七素在三七花蕾中的含量最高,其次是根状茎和主根,但是三七茎叶中也有较高含量的三七素,说明三七花蕾和茎叶均可作为三七素的提取原料;在三七产品中三七花的三七素含量最高,达到3.33%,其次是剪口（根状茎）、筋条（侧根）和须根;但三七素的含量与三七个头大小（头数）并无明显的相关性;在三七近缘种姜状三七（P. zingiberensis）和野三七（P. vienamensis var. fuscidiscus）主根、珠子参（P. japonicus var. major）根状茎中的三七素含量显著低于三七主根三七素含量,也显著低于三七其他部位的三七素含量,说明三七是最佳的三七素来源植物。三七素的含量主要受到物种和部位的影响,与产品规格无关。本文所建立的三七素提取方法和HPLC检测方法,能够快速简便、稳定可靠测定样品中三七素含量;并可为三七素相关标准的建立奠定基础,为三七的综合利用开发提供依据。  相似文献   

超高效液相色谱串联质谱法对水产品中硝基呋喃代谢物的测定     

王狄  张嘉楠 《河北渔业》2016,(7):47-51

建立了使用Waters UPLC Xevo TQ超高效液相色谱串联质谱仪检测水产品中4种硝基呋喃代谢物的分析方法。匀浆后的样品在酸性环境下水解,并用2-硝基苯甲醛衍生16h,经磷酸氢二钾提取,LMS固相萃取小柱净化后,在三重四极杆多反应监测模式下进行测定。方法采用同位素内标法定量,四种代谢物的检出限(LOD)均低于0.25μg·kg-1,线性范围在0.5μg·L~(-1)到10μg·L~(-1)间,相关系数大于0.99。在0.5、1.0和5μg·kg-1浓度下分别进行添加回收试验(n=5),回收率在75.2%~123.3%之间,相对标准偏差(RSD)小于9.4%。  相似文献   

仙草多糖提取工艺条件优化研究     

林慧霞  肖玉娟  黄华斌  傅奇  何少贵 《热带作物学报》2016,(4):22-26

采用水提法浸提仙草，以仙草多糖的提取率为指标，研究料液比、浸提温度、浸提时间及浸提次数4个因素对其提取率的影响，并从中挑取合适的因素水平进行正交试验及SPSS分析。结果表明：在这4个因素中，对提取率影响最大的因素是浸提温度，然后是浸提时间，再次是料液比，最后是浸提次数；在料液比1:60、温度100 ℃、浸提时间3 h的最优条件下，仙草多糖的提取率高达17.89 %，此时仙草多糖的含量为44.13 %。  相似文献   

An improved method for extraction of sorghum polymeric protein complexes     

《Journal of Cereal Science》2020

A method for fractionating sorghum proteins using extraction solvents and techniques designed to obtain polymeric protein structures (especially disulfide linked) was developed. Extraction and separation conditions were optimized in terms of completeness of protein extraction, sample stability, and analytical resolution. After pre-extraction of albumins and globulins, a 3-step sequential procedure involving no reducing agents was applied to ground whole sorghum flour. The three fractions obtained represented proportionally different protein polymer contents and molecular weight distribution as evidenced by comparative size exclusion chromatography. Protein composition also varied among the extracts with differences in kafirin composition and non-kafirin proteins detected in the fractions by RP-HPLC and SDS-PAGE analysis. The ability to quantify and further characterize sorghum polymeric protein complexes will be useful for additional studies linking protein structures with functionality and digestibility and variations for these properties within diverse sorghum germplasm.  相似文献   

裂褶菌多糖的研究进展     

贺凤  黄龙花  刘远超  李诚斌  胡惠萍 《食用菌学报》2016,(2):88-93

裂褶菌多糖(Schizophyllan)是裂褶菌(Schizophyllum commune)的主要活性成分之一.综述了裂褶菌多糖结构、提取纯化工艺和生理活性功能等方面的研究进展.  相似文献   

地稔凝集素的提取及凝血活性的研究     

邓政东  程爱芳  李秀丽 《黑龙江农业科学》2015,(2):56-58

为研究和利用地稔的促凝血活性物质,以地稔为试材,提取地稔凝集素,研究pH、温度和糖等理化因素对凝血活性的影响。结果表明:经硫酸铵沉淀及透析提取的地稔凝集素具有红细胞凝集活性;碱性条件下,抑制作用明显,而酸性条件有较强促进作用;温度对凝集素凝血活性影响很小;半乳糖有明显促进作用。  相似文献   

Importance of Noncrystalline Hydroxide Phases in Sequential Extractions to Fractionate Antimony in Acid Soils     

《Communications in Soil Science and Plant Analysis》2012,43(11-12):1487-1501

Abstract

Sequential extraction techniques have been used to make inferences about speciation of phosphorus (P) and to a lesser extent arsenic (As) in soils. However, sequential extraction studies on the less‐abundant group V element, antimony (Sb), are limited. In this work, a widely used P sequential extraction scheme was modified and used to extract P, As, and Sb from two acidic soils from the Macleay River floodplain, NSW, that were enriched with Sb (26.9 and 23.0 mg kg^?1). An ammonium oxalate–oxalic acid step was included in the extraction sequence to dissolve the noncrystalline iron (Fe) and aluminium (Al) hydroxide phase. It extracted 30 to 47% of Sb, indicating the importance of this fraction, which may be mobilized in the floodplain by acid sulfate soil processes and periodic waterlogging. The original method overestimated P, As, and Sb in the residual fraction (30–71%). Relative efficiency values of extracts for P, As, and Sb were compared, and inferences about phase distributions were made. The results suggest some potential in using extractions to assess bioavailability of Sb in soil.  相似文献