Enpp2基因的分子特征及其在雌性牦牛不同繁殖阶段生殖器官中的表达     

马文斌  王萌  潘阳阳  王靖雷  张燕燕  高丽青  张晖  王军乾  余四九  王立斌 《动物医学进展》2022,43(1):58-64

为了探讨胞外焦磷酸酶/磷酸酯酶2(Enpp2)基因在母牦牛不同繁殖阶段生殖器官中的表达与定位,对Enpp2基因进行克隆,并利用实时荧光定量PCR(RT-qPCR)、蛋白质免疫印迹(Western blot)和免疫组织化学法检测ENPP2在母牦牛生殖器官中的表达与定位.结果显示,Enpp2基因ORF全长2 669 bp,...  相似文献   

牛输卵管上皮细胞转人胶原蛋白cDNA基因及转基因克隆胚胎     

吕自力  王亮  刘婷婷  石国庆 《兽医大学学报》2012,(1):144-150

以2岁奶牛输卵管为材料,用胰酶消化法分离得到了牛输卵管上皮细胞。输卵管上皮细胞在DMEM／F12培养基中生长良好。用一代牛输卵管上皮细胞为靶细胞,对其进行了电穿孔转染,转染对象是分子大小为31085bp的以β-casein启动子为基础的含有人胶原蛋白cDNA基因和EGFP、Neor双标记基因的质粒。电穿孔试验发现,牛输卵管上皮细胞在低渗缓冲液中电转染可以获得阳性转染子,其中以90mOsm／kg为最佳。电压以800V为好,电压高和低都不利于电穿孔的成功。成功转染的细胞用800mg/L G418进行筛选,在10d后获得了较大的阳性细胞克隆簇。对获得的阳性细胞克隆簇进行扩大后,得到了较纯的阳性细胞克隆系,流式细胞仪检测其纯度为81．6％。在荧光显微镜下选择阳性细胞作为核移植供体细胞进行了转基因克隆试验,结果显示以转基因和非转基因细胞为核供体获得的重构胚融合率差异显著（51．9％比63．2％）,获得的桑椹胚／囊胚率差异不显著（20．3％比25．5％）。对获得的具有绿色荧光的胚胎进行DNA分析,结果显示这些胚胎成功转入了外源基因,并且转入的外源基因结构完整。  相似文献   

小鼠输卵管上皮细胞的原代培养及纯化方法研究   总被引：2，自引：0，他引：2  

赵晓娥  兰杰  王妍  杨培先  胡林勇  马保华 《动物医学进展》2009,30(2)

建立小鼠输卵管上皮细胞原代培养及纯化方法.小鼠输卵管上皮细胞原代培养采用组织块培养法和酶消化法.酶消化法于37℃分为4个处理组进行.处理1以2.5 g/L胰酶+0.4 g/L EDTA消化5、10、20 min;处理2以0.5 g/L胰酶+0.08 g/L EDTA消化35、50、75 min;处理3以0.3 g/L的Ⅰ型胶原酶消化60、90、240 min;处理4以2.5 g/L胰酶+0.4 g/L EDTA和0.3 g/L Ⅰ型胶原酶(1∶2)消化60 min,150 min.原代细胞纯化采用差速贴壁和反复差速贴壁法.传代采用胰酶两步消化法进一步纯化输卵管上皮细胞.组织块法原代培养成纤维细胞生长优势明显,传代纯化细胞效果不佳.用酶消化法原代培养时,处理1效果不理想;处理2采用3个消化时间时均取得比较理想的结果;处理3消化240 min时结果较好;处理4消化150 min效果较好.原代细胞纯化,反复差速贴壁得到的上皮细胞较纯,进一步传代纯化细胞取得了理想的结果.小鼠输卵管上皮细胞原代培养采用酶消化法结合反复差速贴壁分离纯化细胞,传代采用两步消化法,可以成功地进行小鼠输卵管上皮细胞的分离纯化培养.  相似文献   

目前蛋鸡不能上产蛋高峰的原因分析     

庞海玲  陈巨清 《今日畜牧兽医》2009,(7):42-43

从2008年冬季以来,经常有蛋鸡生产中不能进入产蛋高峰的情况,经济报酬很低,给养鸡户带来了巨大经济损失。笔者经多方面调查走访、化验检测分析等发现主要与疾病、营养不平衡或不足、  相似文献   

子宫输卵管造影术中对比剂逆流的影像学表现及临床分析     

彭永军  李孔益  彭清慧  杜秀眉 《吉林林学院学报》2012,(1):78-81

目的分析不孕症患者子宫输卵管造影时对比剂逆流的X线征象,探讨其临床意义．方法总结37例子宫输卵管造影有逆流征象病例的X线征象,与临床病史资料进行对照．病例临床诊断均为不孕症患者,对比剂使用76％的复方泛影葡胺注射液或碘海醇注射液．结果所有病例中血管性逆流9例（24．3％）,间质性逆流13例（35．1％）,混合性逆流15例（40．5％）．诊刮结果3例为子宫内膜结核,2例为子宫内膜增生,28例为炎性病变,4例未见异常．结论子宫输卯管造影时发生逆流征象为临床诊断子宫内膜病变提供了主要依据,具有重要临床价值．  相似文献   

支配鸡输卵管蛋白分泌部的感觉神经元定位--CB-HRP法逆行追踪   总被引：1，自引：1，他引：0  

陈秋生 《畜牧兽医学报》1999,30(3):238-243

采用霍乱毒素辣根过氧化物酶（ＣＢＨＲＰ）标记法，逆行追踪鸡输卵管蛋白分泌部初级感觉神经元位置。结果显示，两侧颈静脉神经节、结状神经节以及颈１２至腰荐１２脊神经节出现标记细胞，左侧的标记细胞明显多于右侧。在脊神经节的分布区域内，有两个相对集中区，分别位于胸５至腰荐２和腰荐８至腰荐１０。颈静脉节和结状节的标记细胞数量比脊神经节的少。表明，鸡输卵管虽属单侧发育器官，但其蛋白分泌部接受双侧感觉神经的分布，只是以同侧（左侧）神经支配为主；感觉神经既经脊神经途径传入，也由迷走途径传入，但以前者为主，文中还对交感与副交感传入途径的优势现象进行了讨论。  相似文献   

表皮生长因子对牛输卵管上皮细胞生长、增殖和凋亡的影响     

孙伟  李喜和  郭继彤  巴特尔  杨利国 《华北农学报》2012,(Z1):410-414

研究不同浓度的表皮生长因子对牛输卵管上皮细胞生长、增殖和凋亡的影响,目的是建立高质量的牛体外胚胎共培养细胞系。牛输卵管上皮细胞体外培养技术结合血球计数法检测细胞增殖,并利用流式细胞仪进行细胞周期和凋亡的检测,通过Lysis软件对数据进行分析。结果表明,EGF在0～50 ng/mL浓度范围内,其促增殖、抑制凋亡作用随浓度的增加而增大,呈剂量依赖性;当浓度持续增高时,其促增殖、抑制凋亡能力降低;此外,S期细胞数量明显增加,G2-M期细胞数量有下降趋势。表皮生长因子在一定浓度范围内具有促进牛输卵管上皮细胞增殖和抑制其凋亡的作用,并使其细胞周期发生变化。  相似文献   

日本沼虾输卵管上皮细胞内病毒粒子的超微结构观察     

林小清 《浙江农业科学》2009,(3):585-586

研究了日本沼虾输卵管上皮细胞中的病毒,结果表明病毒粒子球状,直径约100 nm,外有膜包被,其包涵体直径1-3μm,有2种类型,第1种包涵体内充满高电子致密物及多层膜状物,第2种包涵体内电子致密颗粒均匀,边缘有病毒粒子黏附。在输卵管中发现该病毒对研究甲壳动物病毒病的发病机制具有重要价值。  相似文献   

一起蛋鸡输卵管囊肿的诊治     

吴敏  武忠阳  王世刊 《养殖技术顾问》2009,(8):97-97

2009年3月6日，我市某蛋鸡饲养户饲养的2056只190日龄产蛋鸡因产蛋率一直维持在7成半，不能达到高峰。  相似文献   

关养丝毛蛋鸡肛脱原因与防治措施     

王荣林  张旭东 《黑龙江畜牧兽医》2007,(3):113

丝毛蛋鸡肛门脱垂,主要是母鸡输卵管或泄殖腔翻出肛门之外造成的一种疾患,初产或高产母鸡易发。丝毛蛋鸡肛门脱垂的初期,肛门周围绒毛湿润,有时从肛门流出白色或黄白色的黏液,此后有3～4厘米长的肉红色物脱出体外。时间稍久,脱出物由枣红色变成暗红色。如不及时防治,会引起炎症和糜烂,多数以死亡告终。据统计,因此病死亡的鸡可占产蛋期内死亡总数的30%～45%,给生产带来很大的损失。  相似文献