马铃薯损伤诱导型启动子Wun1基因的克隆及其GFP表达活性   总被引：1，自引：0，他引：1  

贾笑英  向云  张金文  王蒂 《分子植物育种》2006,4(3):333-338

通过聚合酶链式反应(PCR),以马铃薯基因组DNA为模板,根据已报道Wun1序列设计了一对特异引物,在优化的PCR反应条件下扩增出了Wun1基因片段,通过序列分析与文献报道的碱基序列有96.86%的同源性,该基因已登录到GenBank(No.AY803296)。以pBIPG(携带GFP基因)的质粒DNA为模板,通过PCR技术亚克隆到了源自水母(Aequorea)大小为756bp的绿色荧光蛋白(GFP)基因,与已知序列同源率为100%。利用GFP基因作为报告基因,构建了用于比较鉴定所克隆启动子活性的pBIG(35S-GFP)和pBIWG(Wun1-GFP)两个植物表达载体,采用基因枪法进行对洋葱表皮细胞的遗传转化,检测Wun1启动子在受体细胞中调控基因表达的活性,结果表明克隆到的Wun1启动子活性强于组成型表达的35S启动子,GFP瞬时表达的分析方法也让我们有效的筛选到用于进行马铃薯抗病育种的调控元件。  相似文献   

Molecular biology of male gametogenesis     

Sheila Mccormick  Catherine Curie  Yoram Eyal  Jorge Muschietti  Lori Dircks  Rima Kulikauskas 《Euphytica》1994,79(3):245-250

Pollen development has been studied at a molecular level in several systems that are amenable to genetic or transgenic analysis. We have characterized several tomato genes that are expressed late in pollen development. Our goals in this research were 1) to determine the cis- and tran-acting factors that mediate pollen expression, and 2) to determine the functions of the proteins encoded by these genes. We currently favor the hypothesis that pollen-specific gene expression is mediated in a combinatorial manner. Antisense experiments have indicated an important role for the LAT52 protein during pollen hydration.  相似文献   

Analysis of puroindoline a and b sequences from Triticum aestivum cv. `Penawawa' and related diploid taxa     

Morten Lillemo  Marco Cosimo Simeone  Craig F. Morris 《Euphytica》2002,126(3):321-331

Flanking sequences of the puroindoline a(pinA) and puroindoline b (pinB) genes from Triticum monococcum, T. urartu, Aegilops speltoides and A. tauschii were obtained by inverse PCR. Two accessions from each of these related diploid taxa were sequenced, and the sequences compared to those of the soft hexaploid wheat cultivar `Penawawa'. As expected from the origin of the D-genome in hexaploid wheat, the highest sequence identity was observed for the A. tauschii sequences, whereas the sequences for A.speltoides were the most divergent. The promoter sequences were further analyzed for putative regulatory elements, and the possible significance of several highly conserved sequence motifs is discussed. Western blots of Triton X-114 extracted proteins separated by SDS-PAGE confirmed the accumulation of pinA and pinB gene products in the endosperm of all the germplasm lines studied. The deduced amino acid sequences for the related diploid taxa do not imply any major structural changes as compared to the wild-type T. aestivum puroindolines, and is therefore in agreement with the soft endosperm texture of these species. This revised version was published online in August 2006 with corrections to the Cover Date.  相似文献   

松土促根剂对土壤质地、冬小麦产量和淀粉糊化特性的影响     

谢迎新  白雪莹  张传忠  靳海洋  郭天财  王晨阳 《华北农学报》2015,(3)

为了解决近年来华北地区麦田因多年旋耕导致土壤耕层过浅、土壤质地变差、小麦根系发育不良以及小麦产量品质降低等问题,在平衡配方施肥的基础上,通过田间试验研究了Agri-star松土促根剂对土壤质地及小麦产量和淀粉糊化特性的影响。结果表明,施用松土促根剂和土壤深耕处理均可起到降低土壤容重,增加单位体积小麦根系质量,改善土壤理化性状的作用。此外,施用松土促根剂能够提高冬小麦成穗数和穗粒数,进而起到提高小麦籽粒产量的效果,其中以1号松土促根剂+配方肥处理籽粒产量最高,平均达7 925 kg/hm2,较单施配方肥处理增产12.9%。研究还发现,施用配方肥、添加松土促根剂或者进行土壤深耕处理能够改善小麦籽粒淀粉品质,同样也以1号松土促根剂+配方肥处理效果最好。综合比较分析,在当前华北地区免耕、旋耕麦田,应用Agri-star松土促根剂可以改善土壤质地,提高小麦产量和改善小麦籽粒淀粉品质,具有广阔的应用前景。  相似文献   

甘蔗增糖增产剂试验结果     

石必晓  何取宏  游建华 《广西农业生物科学》1995,(1)

１９９３年９月下旬至１０月中旬，采用广西农业大学研制、生产的甘蔗增糖增产剂在对旱地和水田蔗的５个品种进行试验，喷药后４０～９０ｄ测定１３个点的甘蔗蔗糖分，平均比对照提高１．３０％（绝对值），甘蔗产量增加５８５０ｋｇ／ｈｍ２；８月份和９月份追施氮肥的甘蔗增糖增产较显著，甘蔗蔗糖分提高１．６９％（绝对值），增产１０３５１．５ｋｇ／ｈｍ２；８月份和９月份不追肥的甘蔗．喷施增糖增产剂的效果相对较差。平均来说，糖厂增利２５８２．２５元／ｈｍ２，农民增收８１９元／ｈｍ２。  相似文献   

花药特异嵌合启动子的构建及雄性不育转基因拟南芥的获得   总被引：9，自引：0，他引：9  

陈潜  汪迎春  张利明  李文彬  孙勇如 《农业生物技术学报》2001,9(1):62-64

为了克服TA29／Barnase转基因雄性不育植物的温度敏感性，在TA29启动子上游串联了CaMV35 S启动子，同时在CaMV35 S启动子上游串联一个调节序列antherbox，构建成嵌合启动子antherbox-CaMV35 S-pTA29。该启动元件调控的GUS基因瞬间表达实验表明它是花药颈毡层特异的启动子。这个启动元件及其调控下的barnase基因构建植物表达载体转化，拟南芥菜，获得了雄性不育的转基因植株。  相似文献   

小麦穗发芽抗性相关Vp1基因启动子的分离及功能验证   总被引：4，自引：0，他引：4  

孙永伟  聂丽娜  马有志  徐兆师  夏兰琴 《作物学报》2011,37(10):1743-1751

成熟期穗发芽严重影响小麦产量和品质。Vp1是调节胚发育, 促进胚成熟和休眠的重要转录因子, 对小麦种子休眠和穗发芽抗性具有重要作用。本研究分离了普通小麦B基因组Vp1基因的启动子, 生物信息学预测结果表明, 其含有9个脱落酸响应元件ABRE、2个DREB和6个MYB干旱响应元件、3个赤霉素响应元件GARE、1个水杨酸响应元件TCA-E、2个茉莉酸甲酯响应元件TGACG-motif、4个SKn-1和1个RYREPE胚乳特异表达元件。采用5′端缺失的方法, 构建了系列含Vp1启动子不同区段融合GUS报告基因的瞬时表达载体和植物表达载体。通过基因枪转化小麦愈伤组织, 瞬时表达结果显示, Vp1启动子在无诱导的情况下不能启动GUS基因表达, 在低温、ABA、GA、PEG和NaCl诱导后可以启动GUS基因表达, 表现诱导表达特性, 且其诱导表达强度随启动子缺失片段长度变短而减弱。利用Gateway方法成功构建了6个启动子各缺失片段类型的植物表达载体, 并通过农杆菌介导转化四倍体小麦Stewart, 获得转基因植株。该启动子可有效启动GUS基因在转基因植株的花药、糊粉层、穗轴及根中表达, 其他组织中没有表达。当启动子片段大于660 bp时, 外源ABA可诱导启动子启动GUS基因在转基因植株茎节中的表达。  相似文献   

陆地棉异质型ACCase基因的种子特异表达载体构建与遗传转化   总被引：3，自引：0，他引：3  

刘正杰  张园  王彦霞  李朋波  苏莹  张曦  王玉美  华金平 《分子植物育种》2011,9(3):270-277

异质型ACCase催化乙酞CoA形成丙二酞辅酶A是植物脂肪酸合成途径中的第一个关键的步骤,也是限速步骤:植物体内过量表达ACCase能够增加脂肪酸合成的底物,有可能导致植株种子含油量的增加.本实验采用GUS基因瞬时表达检测棉花愈伤组织中种子特异性表达启动子AGP的活性;利用RT-PCR扩增,克隆了陆地棉异质型ACCas...  相似文献   

水稻基因启动子Ospz1的克隆与表达特性研究          下载免费PDF全文

赵洋  杨细平  王曼玲  李落叶  夏新界 《农业现代化研究》2011,32(2):234-237

在水稻基因组芯片分析的基础上,克隆到一个在水稻中高水平表达基因OsSG15'末端启动子区域1.6-kb的DNA片断,即Ospz1启动子,构建了由Ospz1启动子引导的GUS重组基因,并经农杆菌介导将重组基因导入到水稻中.对转基因水稻植株中GUS活性的定性测定结果表明,Ospz1启动子可驱动GUS报告基因在转基因水稻植株叶片、芽和根中高效表达,而在其它器官中不表达或表达活性极弱,表现出组织特异性.Ospz1启动子可用于农作物生物技术的遗传改良.  相似文献   

植物HSP70反义基因工程雄性不育表达载体的构建及鉴定     

刘立科  刘根齐  侯宁  刘春光  陈建南  张文会  樊颖伦  吴冰洁 《安徽农业科学》2008,36(16):6698-6700

[目的]为更好地研究HSP70热激蛋白基因与植物雄性不育的关系。用PCR方法克隆了水稻花药特异表达启动子Osg6B,将其与设计合成的HSP70反义片段连接,构建了由水稻花药特异表达启动子Osg6B驱动的HSP70反义表达载体,并进行了PCR和酶切鉴定。[结果]克隆的Osg6B启动子序列与所发表的序列同源性高达97%,启动子区域的顺式调控元件完整;构建的由水稻花药特异表达启动子Osg6B驱动的HPS70反义表达载体通过了菌落PCR验证和表达载体值粒的酶切鉴定,载体构建成功。[结论]该表达载体的构建将为植物基因工程雄性不育的利用奠定基础。  相似文献