实时荧光定量PCR检测PrP基因在金黄地鼠脑组织的动态表达     

宁章勇  赵德明  杨建民  周向梅  于博  孔小明  尹晓敏 《中国兽医杂志》2007,43(9):3-6

金黄地鼠是研究动物传染性海绵状脑病的理想模型动物之一,其脑组织内朊蛋白基因动态表达数据的测定对探讨该类疾病的发生、发展和分子致病机理具有重要意义。我们利用实时荧光定量RT-PCR技术,对不同年龄金黄地鼠大脑、小脑、丘脑和脑干PrP基因的表达进行了定量。结果发现,脑的四个检测部位都呈现高的表达量,但是同一年龄段不同组织每纳克总RNA中朊蛋白基因的表达量和每毫克组织中朊蛋白基因的表达量有显著的差别,不同组织在不同年龄出现表达高峰。本研究的结果对于探讨朊蛋白的基本功能和脑组织在传染性海绵状脑病病理发生中的作用,提供了基础数据。  相似文献   

猪白细胞介素-18基因表达及重组蛋白的纯化   总被引：1，自引：0，他引：1  

裴仉福  陈瑞爱  唐秀英  朱文冠  唐满华  李琳  程含波  温纳相 《中国兽药杂志》2007,41(2):5-9

以pcDNA3.1-IL18为模板进行PCR扩增获得猪白细胞介素-18(IL-18)的成熟肽基因,以KpnⅠ、SacⅠ双酶切PCR产物作为供体,KpnⅠ、SacⅠ双酶切的pET41c和pET32c作为载体,连接载体供体,转化DH5α,经双酶切、PCR鉴定及测序筛选出阳性重组质粒,并命名为pET41c-IL18和pET32c-IL18。将pET41c-IL18和pET32c-IL18转化大肠埃希氏菌BL21(DE3),用1 mmol/L IPTG 37℃诱导表达。SDS-PAGE及W estern-blotting分析结果表明,所表达的重组蛋白主要以包涵体形式存在,pET32c-IL18重组蛋白分子质量约33 ku,与预期大小相符。将包涵体提取物用8 mol/L脲变性,经N i-NTA柱纯化,透析复性,得到了纯化的IL-18蛋白。  相似文献   

饲料中脂肪酸对动物脂肪合成酶及其基因表达的影响   总被引：4，自引：0，他引：4  

熊文中  楚胜捷 《饲料研究》1998,(1):11-14

本文综述了饲料中脂肪酸对动物组织中脂肪酸合成酶的酶活性,酶基因表达的影响,并就脂肪酸与家畜生产性能的关系进行了讨论。  相似文献   

核桃种子油脂转化期转录组分析     

《果树学报》2017,(9)

【目的】从分子水平上探索核桃(Juglans regia L.)种子油脂转化时期的脂肪酸合成相关基因的表达模式。【方法】基于Illumina Hi SeqTM4000高通量测序平台,以新疆早实核桃‘新新2号’(J.regia‘Xinxin2’)品种种子的种仁为材料,对核桃种子油脂转化期3个不同阶段(花后60~70 d,简称G1;花后90~100 d,简称G2;花后120~130 d,简称G3)进行转录组测序比较分析。【结果】组装得到174 545条Unigene,其中G2 vs G1、G3 vs G2和G3 vs G1分别有9 408、8 316、6 398条上调表达的差异基因和11 916、10 485、5 218条下调表达的差异基因。代谢通路富集分析发现,3个阶段之间差异基因富集最显著的是脂肪酸生物合成代谢途径。随机挑选8个基因进行荧光定量验证,结果与测序数据一致,表明核桃种子油脂转化期的转录组测序结果可信度高。不同时期基因差异表达富集度最高的为脂肪酸生物合成代谢通路。在脂肪酸生物合成途径上乙酰辅酶A的羧基转移酶α亚基基因acc A、生物素羧基载体蛋白基因acc B和生物素羧化酶亚基基因acc C的表达量在G1到G3持续上升,β-酮酰ACP合酶Ⅱ基因fab F、β-酮酰-ACP还原酶基因fab G和硬脂酰-ACP去饱和酶基因FAB2的表达量在G1到G3也持续上升,并且G2与G1之间上调表达的差异基因最多。【结论】核桃种子的油脂转化在G2阶段脂肪酸合成最活跃,脂肪酸生物合成途径与油脂合成有关的accA、accB、accC、fabF、fabG、fabI和FAB2基因均呈上调表达。  相似文献   

游离脂肪酸对3T3-L1细胞IL-6mRNA及蛋白表达的影响     

袁继红  朱意  付家忠 《江苏农业科学》2013,41(2)

用不同种类游离脂肪酸(FFA)处理体外培养成熟的3T3-L1脂肪细胞,用实时荧光定量PCR和EHSA分析FFA处理前后IL-6 mRNA和蛋白质水平的表达差异.结果表明:各类脂肪酸对IL-6 mRNA的表达均具有上调作用,并且各种脂肪酸显著影响IL-6蛋白的分泌.  相似文献   

姜黄素对中速型黄羽肉鸡生长性能、腹脂沉积、抗氧化能力、肝脏脂肪代谢相关酶活性及基因表达的影响     

《动物营养学报》2021,33(10)

  相似文献   

脂蛋白脂酶(LPL)生理功能及特异表达   总被引：4，自引：0，他引：4  

陈文  陈代文  黄艳群 《中国畜牧兽医》2004,31(4):29-30

脂蛋白脂酶(lipoprotein lipase,LPL)是甘油三酯降解为甘油和游离脂肪酸(FFA)反应的限速酶,与机体的脂质代谢及肥胖与否密切相关.白色脂肪组织(WAT)中的LPL活性升高有助于机体脂质的贮存,棕色脂肪组织(BAT)的LPL活性与机体产热有关,而骨骼肌的LPL活性升高有利于机体利用能量.动物饥饿或禁食,下调控LPLmRNA;动物补饲,上调控脂肪-LPL活力.胰岛素可增加脂肪细胞内LPL活性,轻度降低骨骼肌LPL活性;儿茶酚胺和β-肾上腺素能制剂(AMP)在脂肪组织或脂肪细胞中抑制LPL活性,在心肌和骨骼肌却是提高LPL活性.  相似文献   

水稻GA20ox-2基因mRNA的TaqMan荧光定量RT-PCR检测   总被引：2，自引：0，他引：2  

高东  何霞红  王云月  李成云  朱有勇 《中国水稻科学》2009,23(3)

成功建立了一项基于TaqMan 实时荧光定量的RT-PCR技术,定量分析水稻半矮化关键基因之一GA20ox-2转录水平.该技术体系中重组质粒标准品的制备方法具有很好的实用性;质粒标准品对基因GA20ox-2表达的实时定量准确、可靠、便捷.标准曲线表明,所建立的GA20ox-2基因mRNA表达实时荧光定量PCR检测方法,特异性好,灵敏度高,可达102拷贝;线性范围广,可达102～107拷贝;扩增效率高(E=100.3%);稳定性、重复性好,可靠性高,批内和批间变异系数仅分别为0.12%～0.31%和0.21%～0.34%;循环阈值与PCR 体系中起始模板量的对数值之间有着良好的线性关系(r＝0.999),可对GA20ox-2基因表达进行准确实时定量.  相似文献   

活性氧和一氧化氮在植物——病原体互作反应中的作用     

王罗霞  张盛敏  陈银华 《热带作物学报》2009,29(6):77-84

植物被病原体感染后，植物体内活性氧产量急剧增加，这一现象被称为氧爆。活性氧族包括如单线态氧1O2、超氧阴离子自由基O2-.、氢过氧自由基HO2·、过氧化氢H2O2、羟自由基·OH等。与ROS关系密切的一氧化氮，属于活性氮族。ROS和NO参与植物生长发育调控和对环境胁迫的应答反应，特别是在对抗外来病原体的入侵的防卫过程中发挥了重要作用。本文主要讨论ROS和NO在植物与病原体相互作用中发挥的作用。  相似文献   

皮蝇Hypodermin A基因的克隆及表达质粒构建   总被引：3，自引：0，他引：3  

唐立刚杨东英  罗建勋欧阳五庆 殷宏 《动物科学与动物医学》2004,21(1):22-23,19

参照牛皮蝇Hypodermin A（HA)基因的核苷酸序列．设计一对引物．以皮蝇总RNA为模板进行RT--PCR扩增牛皮蝇HA基因．将扩增基因进行克隆测序。序列分析表明．所克隆获得的基因与GenBank中已经登录的核苷酸和氨基酸的同源性分别为97．2％和99．3％。同时．将该基因与表达载体PGEX-4T-1连接．构建并获得阳性重组表达载体。  相似文献