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小花棘豆生物碱薄层色谱分析及GC-MS检测 总被引:2,自引:1,他引:1
为确定小花棘豆生物碱的种类,建立小花棘豆生物碱指纹图谱,为其毒性作用机理及药理作用研究提供理论依据。用溶剂萃取法提取小花棘豆各极性段生物碱,并通过薄层层析进行初步分析;将萃取量少、小极性的氯仿、乙酸乙酯部分生物碱合并进行硅胶正相柱层析分离,薄层色谱跟踪检测;将洗脱量少、改良碘化铋钾显色明显的洗脱部分合并,应用微量GC-MS进行分析鉴定。结果表明,各萃取段粗碱经不同展开体系薄层展开H2O2/10%醋酐无水乙醇/Ehrlich’s试剂显色较佳,且各显色点呈斑点性强;将氯仿、乙酸乙酯部分生物碱经柱层析分离得到的改良碘化铋钾显色明显的组分合并,经GC-MS分析鉴定出16种生物碱,相对含量大于3%以上的有3种,占总提取物的26.72%,相对含量大于2%的有1种,相对含量大于1%的有5种,皆属首次从此植物中发现。 相似文献
122.
123.
[目的]为抑制素质粒的大量提取与纯化寻找一种成本低的方法。[方法]采用碱裂解法与DEAE-纤维柱层析法提取与纯化抑制素质粒DNA,用分光光度法测定其浓度和纯度。[结果]抑制素质粒DNA的等电点为2.0~2.5,低于大部分蛋白质。pH值为8.0时,抑制素质粒DNA带负电荷,且电荷数量与RNA和蛋白质不同。用紫外分光光度计测定的柱层析后洗脱峰1、2、3在260和280nm波长处的吸光度值分别为3.01和2.9、0.95和0.51、0.84和0.76,其OD260nm/OD280nm分别为1.04、1.86和1.10。3mol/L NaCl的洗脱峰1大部分是蛋白质,0.6mol/L NaCl的洗脱峰2是浓度为93.0ng/ml的抑制素质粒DNA,3mol/L NaCl的洗脱峰3是杂质。[结论]利用碱裂解法能从大肠杆菌细胞中分离出抑制素质粒DNA,DEAE-纤维柱层析法纯化的抑制素质粒DNA达到了要求的纯度。 相似文献
124.
刺葡萄皮中花色苷的分离纯化与结构鉴定 总被引:1,自引:0,他引:1
为研究刺葡萄花色苷的结构及其纯化分离的柱层析法,将刺葡萄色素粗提液依次经大孔树脂HP-20、聚酰胺树脂、葡聚糖凝胶Sephadex LH-20吸附纯化,利用超高效液相色谱三重四级杆飞行时间质谱联用技术对分离所得花色苷进行结构鉴定,并运用荧光光度法探索荧光图谱与花色苷结构的关系。研究发现,聚酰胺树脂对部分花色苷产生了吸附作用,而Sephadex LH-20凝胶能起到较好的分离作用,最终得到3种色素,经鉴定,确定色素I为锦葵素-3,5-O-双葡萄糖苷,通过质谱信息初步确定色素III可能为锦葵素-3,5-O-双葡萄糖苷-香豆酰,色素IV可能为飞燕草素-3-O-芸香糖苷和锦葵素-3-O-芸香糖苷的混合物,经高效液相色谱以归一法计算峰面积,色素I和色素III的纯度分别达到了98.64%、98.33%,得率分别为0.114%和0.076%。研究结果为花色苷的分离及鉴定提供参考。 相似文献
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126.
127.
中压硅胶柱层析连续纯化茶叶中EGCG及ECG的研究 总被引:6,自引:0,他引:6
采用一种连续中压硅胶柱层析分离高纯度表没食子儿茶素没食子酸酯(EGCG)及表儿茶素没食子酸酯(ECG),原料为含量高于 98 % 的茶多酚.连续中压柱层析分离工艺条件为:160~280μm 硅胶为填充料,1 200 mm×80 mm 的自制不锈钢中压层析柱,洗脱液为乙酸乙酯-石油醚-甲酸(体积比6:4:1),洗脱流速为 30 mL/min,负载量为 35 g/kg(以硅胶计,下同),可以得到纯度大于 98 % 的EGCG产品(平均回收率为 85.5 %)和 98 % 的ECG产品(平均回收率均为 80.3 %).回收的洗脱剂先校正pH值,再经薄层层析校正后可重复使用.使用后的层析柱用乙酸乙酯再生,石油醚为平衡剂平衡,平衡后的层析柱可重复使用. 相似文献
128.
高含量大豆皂苷的制备工艺研究 总被引:2,自引:0,他引:2
为了得到高含量大豆皂苷,该文对6种大孔吸附树脂即AB-8,XAD-2,HPD-100,ADS-7,HPD-300,HPD-600进行优选,以上样量、洗脱率和产品纯度为指标,用柱层析法对低含量的大豆皂苷提取液进行初步分离,得到大豆皂苷粗品。然后通过结晶进一步提高其纯度。考察并优化了结晶时的溶剂、大豆皂苷的初始浓度、降温速率等工艺条件。结果表明:ADS-7树脂为合适的吸附剂;优化的柱层析条件为:上样和洗脱温度60℃,上样原料浓度6 mg/mL,上样和洗脱流量均为1.0 BV/h;优化的结晶工艺条件为:结晶溶剂30%~40%乙醇,大豆皂苷初始浓度165 mg/mL,降温速率3.2℃/h。在上述条件下,用柱层析法可使大豆皂苷的含量从原料中的3.0%提高至45%以上,大豆皂苷收率大于90%。再通过结晶可得含量大于96.0%的大豆皂苷,大豆皂苷收率大于50%。说明该文研究的制备工艺明显优于现有的萃取工艺,具有重要的工业应用价值。 相似文献
129.
【目的】探索实验室低成本、规模化制备单一聚合度纤维寡糖的方法,并得到聚合度分别为2—5纯度较高的单一组分纤维寡糖。【方法】采用制备型常压硅胶柱层析(ø22 mm×900 mm),选择干法填柱、干法上样对混酸降解法制备得到的纤维寡糖进行分离纯化。采用薄层色谱法(TLC)对分离过程进行监测,用荧光辅助糖电泳(FACE)对分离后的各单一组分进行定性检测,并用电喷雾-飞行时间质谱(ESI-TOF-MS)对各单一组分进行分子质量的确认。【结果】采用制备型常压硅胶柱层析法对于聚合度在2—5的纤维寡糖具有很好的分离效果。ESI-TOF-MS法检测本试验得到的4种单一聚合度纤维寡糖分子质量(钠离子峰)分别为365、527、689和851,分别对应纤维二糖、纤维三糖、纤维四糖和纤维五糖的分子质量。本试验一次上样300 mg纤维寡糖混合物,可分别获得28 mg纤维二糖、43 mg纤维三糖、59 mg纤维四糖和52 mg纤维五糖。荧光辅助糖电泳(FACE)能非常灵敏地定性检测纤维寡糖。【结论】制备型常压硅胶柱层析能较好地分离纤维寡糖,得到聚合度分别在2—5的单一组分纤维寡糖。 相似文献
130.