气相色谱法快速测定甘草中9种有机氯农药残留量     

何茂秋  张明时  李存雄  赵治兵 《安徽农业科学》2011,39(20):12070-12071,12078

[目的]建立测定甘草中有机氯农药残留量的新方法。[方法]甘草样品采用石油醚超声提取,经浓硫酸磺化后用毛细管柱气相色谱法（GC）测定。[结果]GC对甘草中有机氯农药的最低检出限为0.000 125~0.000 689 mg/kg,相对标准偏差（RSD）为0.78%~4.98%,回收率86.15%~102.12%。所测甘草样品只检测到γ-六六六残留,残留量为0.001 mg/kg。[结论]与传统方法相比较,GC具有更高的灵敏度和准确度,更适合于有机氯农残检测。  相似文献   

曲足侏缘蝽水溶性蛋白毛细管电泳初步研究     

易传辉  和秋菊 《广东农业科学》2011,38(18)

利用毛细管[带电泳技术对曲足侏缘蝽5龄若虫和成虫的水溶性蛋白进行了研究.结果表明,在0～30 min电泳时间内,若虫和成虫分别有38个和50个蛋白质吸收峰,大部分吸收峰位于0～10 min内;大部分蛋白质种类含量较低;成虫产生了与生殖有关的蛋白质种类.  相似文献   

基于荧光检测技术的多花黑麦草EST-SSR指纹图谱的构建   总被引：2，自引：0，他引：2  

刘欢  张新全  马啸  张瑞珍  何光武  潘玲  金梦雅 《中国农业科学》2017,50(3):437-450

【目的】构建基于EST-SSR荧光标记的多花黑麦草(Lolium multiflorumLam.)DNA指纹鉴定体系,为多花黑麦草品种鉴定提供高通量技术手段,为不同品种的合理应用提供参考依据,有效保护农民利益和育种权益。【方法】利用表型性状差异大的3个品种(特高Tetragold、长江2号Changjiang No.2和阿伯德Aubade),通过聚丙烯酰胺凝胶电泳从200对EST-SSR引物中筛选出扩增条带清晰、多态性好、扩增稳定的30对引物。在筛选出的每对引物5′端添加荧光标记FAM后,采用毛细管法通过DNA分析仪检测200个单株不同等位变异的扩增片段,从30对EST-SSR引物中筛选出25对扩增稳定的荧光引物,建立基于高通量荧光SSR标记的多花黑麦草品种鉴定体系。【结果】通过25对EST-SSR引物构建的DNA指纹图谱来进行10个多花黑麦草材料的品种鉴定。25对EST-SSR引物共检测到127个等位基因,等位变异扩增片段长度范围为51—249 bp,每对引物可检测到有效等位基因数为2—11个,特异等位基因最多可检测到11个(N101),平均每对引物4.00个;多态性位点的比率范围为33.33%—100.00%。平均PIC值为0.702,Shannon指数最大为3.322(N101),平均为1.929,基因多样性指数变幅为0.159—0.500,平均0.318,可鉴别的材料数为0—10个;其中14对特征引物在10个品种(系)上可检测出25个特异等位基因。综合来看,引物N101在200对引物中鉴别效率最高,可直接将10个多花黑麦草品种(系)区分开,在长江2号、赣选1号和川农2号上同时检测出特异等位基因。但由于多花黑麦草在品种间与品种内变异均较高,因此为鉴定更多材料,从25对引物中选择了6对扩增和检测效果较好的引物(N54、N101、N146、N151、N154、N156),6对引物可检测到的稳定等位基因数均不小于19个,在达伯瑞和邦德上最多可检测到22个等位基因。通过6对高效引物构建了10个多花黑麦草品种(系)的DNA指纹图谱,包括标准模式图、图谱代码和图谱QR编码。首次利用EST-SSR荧光标记毛细管电泳检测,为10个多花黑麦草材料分别构建了唯一的指纹代码和QR编码。【结论】利用6对高效引物构建了多花黑麦草SSR高通量鉴定体系,其中荧光引物N101多态性最高,可直接鉴别10个多花黑麦草品种(系)。  相似文献   

基于毛细管电泳的日本落叶松MSAP反应体系的建立          下载免费PDF全文

刁姝  孙超  孙晓梅  张守攻 《林业科学研究》2017,30(3):361-367

[目的]建立基于毛细管电泳的日本落叶松最佳MSAP反应体系,获得条带清晰,信号强度均一的DNA甲基化图谱,为今后开展日本落叶松表观遗传变异研究奠定基础。[方法]以日本落叶松未成熟木质部为试材,设置不同梯度的DNA模板用量以及选择扩增体系中引物浓度、Mg~(2+)浓度、dNTP浓度和exTaq DNA聚合酶浓度,确定各组分不同用量对毛细管电泳效果的影响,从而确立最适的MSAP反应体系。[结果]结果表明模板DNA以及exTaq DNA聚合酶浓度对毛细管电泳结果影响不明显,而高的引物浓度会引起条带的减少。Mg~(2+)及dNTP浓度是影响毛细管电泳结果最为关键的因素,浓度过低或过高会导致毛细管电泳图谱条带明显减少,杂峰显著增多。[结论]最终确立的反应体系为:DNA模板100 ng,引物0.75 pmol·μL~(-1),Mg~(2+)2 mmol·L~(-1),dNTP 0.375 mmol·L~(-1)和exTaq DNA聚合酶0.05 U·μL~(-1)。  相似文献   

电泳峰中相关因素对人工神经网络分析的影响     

马晓旻  夏祥华 《安徽农业科学》2010,38(11):6023-6026,6044

采用人工神经网络方法对重叠的毛细管电泳谱图中的相关组分进行了定量分析。结果表明,随着毛细管电泳谱图噪声水平的增大,2种神经网络模型定量分析重叠的毛细管电泳谱图中相关组分的能力下降;随着毛细管电泳谱图总分离度的增大,多层感知器神经网络模型定量分析重叠的毛细管电泳谱图中相关组分的能力提高。  相似文献   

毛细管柱气相色谱法测定菜粕中的异硫氰酸酯   总被引：1，自引：0，他引：1  

姜涛  万渝平  叶梅  王鑫  周易 《粮食储藏》2010,39(5):36-38

建立使用毛细管柱气相色谱法测定菜粕中异硫氰酸酯(ITC)含量的方法,用DB-FFAP毛细管柱分离3种异硫氰酸酯,氢火焰离子化检测器检测。结果表明,内标物与3种单体异硫氰酸酯被完全分离,检测结果相对标准偏差RSD2%。对异硫氰酸酯含量不同的菜粕,与使用硫脲紫外法相比,方法间的数据相对偏差为3.1%～4.8%,两种方法检测数据的相关性回归方程为y=1.0362x-5.6811,相关系数R=0.9993。试验证明,毛细管气相色谱法检测结果准确、精密度高,可用于菜粕中异硫氰酸酯含量的测定。  相似文献   

低分子量谷蛋白亚基在小麦品种形成过程中的变化特征     

杨芮  高翔  陈其皎  李晓燕  董剑  孟敏  赵万春  石引刚  陈良国 《中国农业科学》2013,46(9):1745-1755

【目的】研究普通小麦品种选育过程中低分子量谷蛋白亚基（LMW-GS）的变化特性,理解该基因家族成员多样性的起源,并为小麦品质改良提供参考。【方法】以3套小麦高代杂交品系（F5/F6）为材料,利用毛细管电泳（CE）技术从储藏蛋白水平鉴定LMW-GS亚基的变化;根据GenBank中已公布的LMW-GS编码序列设计特异性引物,进行PCR扩增、克隆、测序及序列分析。【结果】毛细管电泳结果表明,与亲本相比,高代供试品系均保持了相对稳定的LMW-GS数目,但多个亚基在籽粒中的最终含量却发生明显变化;同时,测试品系还产生了亲本所不具有的新条带。对克隆获得的54条序列（GenBank登录号KC222070-KC222121和KC478714-KC478715）进行序列分析,均具有LMW-GS的典型结构,包括相对保守的信号肽、存在丰富变异的中间重复区及保守的C-端,因此属于LMW-GS基因家族成员;子代与对应亲本的相似性分析表明,3套材料中均存在极端保守序列,子代序列与其相应父本序列完全一致,且都属于LMW-m型亚基;相对保守序列所占比例最大,由于微弱的SNPs,双亲都充当变异序列的供体;蛋白质序列分析还揭示了额外Cys亚基的产生过程。此外,还发现含10个或11个半胱氨酸（Cys）残基的LMW-GS。Cys残基的变异主要发生在C-端Ⅲ区,只有1条序列的Cys变异发生在C-端Ⅱ区。【结论】小麦品种选育过程,父源性的LMW-m型低分子量谷蛋白亚基较其它类型亚基更趋于序列的保守,SNPs则是产生LMW-GS多样性的主要动力。  相似文献   

大棚温室节水增产灌溉技术——软管滴灌法     

钟琴 《农业科技与信息》2013,(15):10-11

软管滴灌是专为大棚温室生产而开发的节水增产灌溉技术,属于局部灌溉,使地面局部湿润,无积水且水气蒸发较少。它利用双上孔滴灌带,直接铺设在作物畦面上灌水,能为棚内作物生长提供良好的环境。下面将对双上软管滴灌新技术进行介绍。1灌水方法滴灌是通过安装在毛细管上的滴头把水一滴滴均匀而又缓慢地滴入植物根区附近的土壤中,借助于土壤毛细管力的作用,使水分在土壤中渗入和扩散,供植物根系吸收和  相似文献   

高效毛细管电泳法分离检测鸡蛋中3种喹诺酮类抗菌药     

周梅仙  周业飞  刘文琪  华春 《西北农业学报》2013,22(3):38-43

旨在建立高效毛细管电泳检测鸡蛋中环丙沙星、氧氟沙星和恩诺沙星3种喹诺酮类抗生素的测定方法。研究结果显示,高效毛细管电泳在检测波长为280 nm时,最佳电泳条件是缓冲液为pH 8.53的30 mmol/L Na₂B₄O7-10 mmol/L KH₂PO₄溶液,分离电压为18 kV,温度为25 ℃。在此最佳电泳条件下,3种抗生素在12 min内实现基线分离,且各组分质量浓度与峰面积呈良好的线性关系（r＞0.996 9）,相对标准偏差（RSD）小于3%,平均加标回收率为115.92%~131.77%。该方法快速简便、灵敏度高、重现性好,可用于鸡蛋中喹诺酮类抗生素质量浓度的测定。  相似文献   

坚龙胆中龙胆苦苷含量的测定     

王建科  高言明  陈惠玲 《贵州农业科学》2013,(2):47-49

为扩展坚龙胆中龙胆苦苷含量测定方法及坚龙胆药材资源的更好利用和临床应用,采用高效毛细管区带电泳法(简称HPCE)测定坚龙胆中龙胆苦苷含量,并对坚龙胆的不同部位、不同炮制品中龙胆苦苷含量进行测定。结果表明:HPCE法测定龙胆苦苷在0.06～0.48 mg/mL呈良好的线性关系(r=0.999 3),平均回收率为101.31%,RSD为1.99%,该方法准确性、重现性好;坚龙胆不同部位、不同炮制品中龙胆苦苷含量有较大差异,其根含量>叶含量>茎含量,生品>炮制品。  相似文献