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PCR技术检测猪伪狂犬病毒及其潜伏感染部位的研究 总被引：22，自引：1，他引：21
本研究合成了伪狂犬毒糖蛋白ｇｐ５０基因引笺，该引物能够扩增糖蛋白ｇｐ５０基因中４３４－６５１之间的２１７ｂｐＤＮＡ片段，该片段含 ＳａｌＩ酶切位点，应用引物对几种不同的伪狂犬病毒株多聚酶链式反应扩增结果全为阳性。 相似文献
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为了能在野外调查中和野生动物执法检查、打击虎产品走私工作中对发现的可疑虎残余物或虎产品等样品进行快速，准确的鉴定，东北林业大学野生动物资源学院近日建立了可以对虎线粒体ＤＮＡ进行特异性扩增的ＰＣＲ方法。 虎线粒体ＤＮＡ细胞色素Ｂ（Ｃｔｙｂ）段由１１４０个碱基组成，通过用Ｗｄｎａｓｉｓ软件比较１０只苏门达腊虎、１５只东北虎、７只孟加拉虎、３只印支虎及５只华南虎Ｃｔｙｂ的碱荃序列，寻找到它在Ｃｔｙｂ段的保守区域，再与猞猁、雪豹、狮、豹猫、金钱豹、云豹、猎豹及家猫等多种猫科动物和梅花鹿，黑麂、赤鹿、獐、… 相似文献
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在构建的小肠结肠耶氏菌毒性质粒DNA基因文库pYB1～8与pYP1～6的基础上,筛选出了pYB7和pYP6克隆株.用限制性内切酶Bam HI消化pYB7,Pst消化pYP6,可分离出3.8kb和6.4kb的插入性DNA片段.以这两个基因片段为目的基因,用生物素化dUTP和光敏生物素标记,获得了生物素标记的基因探针.该探针能检出10pg以上的强毒小肠结肠耶氏菌DNA,不与无毒小肠结肠耶氏菌及大肠杆菌、鼠伤寒沙门氏菌、金黄色葡萄球菌等18种对照菌反应,具有高度的特异性和敏感性.pYB7与pYP6探针对不同血清型及来源的小肠结肠耶氏菌检测,其结果与自凝性试验、依钙试验等结果相符;对小肠结肠耶氏菌强毒株与无毒株检定的准确率为100%. 相似文献
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表达序列标签（ESTs）及其应用 总被引：3，自引：0，他引：3
表达序列标签(ESTs)是指从(ESTcDNA文库中随机挑取克隆并对其3’或5’端进行单轮自动测序所获得的短cDNA库列，一般长度为300～500bp。要有效获取ESTs，必须对cDNA文库进行预处理，处理方法有衰减杂交法、均一化法和差异显示法。在dbEST中收录了大量各种生物的ESTs。ESTs广泛应用于鉴定基因、发现新基因、电子克隆、构建遗传学图谱、制备DNA芯片、分子标记、研究基因的差异表达及检验病原微生物等方面。 相似文献
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荧光PCR法定量检测动物源性饲料中的牛、羊成分 总被引：1，自引：0，他引：1
疯牛稿是由于健康牛食入含有致病性朊粗的人工蛋白质饲料(肉骨粉)所致，而目前尚未见能有效、快速地检测饲料中牛、羊成分的技术报道。本文在前期研究的基础上．运用荧光定量PCR法．针对牛、羊、鸡、猪几种不同动物的特异性基因序列设计了牛、羊两种动物的特异性探针，通过对整个PCR过程的实对荧光监测，来鉴定饲料中的牛、羊成分，并对其定量范围做了简单的计论。本方法能有效解决普通PCR的样品污染问题，具有特异性强、是敏度高、重复性好等特点。 相似文献
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棉花基因组DNA的提取及RAPD反应组成优化探讨 总被引：1，自引：0，他引：1
针对棉花富含棉酚、多糖、单宁、蛋白质等干扰物质的特点 ,主要通过快速研磨、加入 PVP、挑DNA、不加 RNA酶等方法 ,摸索出一条方便、快捷、产率高、适合棉花基因组 DNA提取的方法。另外 ,本文还探讨了模板浓度、Mg2 、d NTPs、Taq酶等因素对 PCR的影响 ,得到棉花 RAPD分析最佳PCR反应组成为 :60 ng模板 DNA、1 .2 mmo1·L-1Mg2 、0 .2 mmo1· L-1d NTPs、1单位 Taq酶 ,反应体积为 2 0μl。 相似文献