鸭瘟病毒的PCR检测及其产物分析   总被引：6，自引：0，他引：6  

陈建君  张毓金  杨增岐  宋长绪 《动物医学进展》2003,24(5):71-73

根据基因库中已有的鸭瘟 Ul6的序列 ,合成一对引物 ,对 3株鸭瘟病毒进行 PCR扩增 ,均扩增出大小约 42 0 bp的特异性片段。进行测序 ,结果表明 3个毒株扩增后的片段均为 42 1bp。经重复实验后确定最佳反应条件 ,按该条件对两例临床病料进行检测 ,结果均出现大小约为 42 0 bp的特异片段。PCR产物与 L ake Andes株的相关序列比较 ,广东毒株与 L ake Andes株同源性较高  相似文献   

小鹅瘟的PCR诊断方法的建立     

李福伟  张桂红  吴玄光 《黑龙江畜牧兽医》2006,(6):63-64

小鹅瘟是由鹅细小病毒(Goose Parvovirus,GPV)引起的雏鹅和雏番鸭的一种急性或亚急性、败血性传染病。该病主要侵害3~20日龄小鹅,以渗出性肠炎,肝脏、肾脏、心脏等实质器官炎症为主要特征。该病传播快,发病率和死亡率高,是严重危害养鹅业的重要传染病。1956年国内学者方定一教授首先发现了该病,此后世界许多国家均有该病的报道。检测GPV的传统方法多为血清学方法,如中和试验、琼脂扩散试验、免疫荧光试验、免疫过氧化物酶染技术、ELISA以及PCR、核酸探针等方法。其中PCR方法是目前这些方法中快速、敏感、特异的检测手段,已被广泛应…  相似文献   

鸡传染性喉气管炎病毒gB基因的扩增及酶切分析   总被引：1，自引：0，他引：1  

张七斤刘思伽  红梅申之义  关平原李平安 《中国兽医科技》2003,33(8):19-22

以从内蒙古区分离的2株传染性喉气管炎病毒(ILTV)株的DNA为模板，用设计好的1对引物对这2株毒株的gB基因进行了PCR扩增，并对扩增产物分别用BglⅡ、PstⅠ、HindⅢ限制性内切酶酶切分析。结果表明，2个分离株均能特异性地扩增出该病毒gB基因片段，片段大小完全一致，为2．6kb；扩增产物的酶切图谱与参考株完全一致。  相似文献   

耐药基因tetC的PCR扩增及序列分析   总被引：1，自引：0，他引：1  

《四川畜牧兽医》2003,30(B09):28-28

  相似文献   

中国巴马小型猪内源性反转录病毒的检测   总被引：2，自引：0，他引：2  

徐斯日古楞  吕茂民  吴健敏  章金刚 《动物医学进展》2003,24(6):79-81

目的 :对我国特有巴马小型猪内源性反转录病毒 ( porcine endogenous retrovirus,PERV)的存在与 m RNA的表达情况进行检测 ,了解巴马小型猪内源性反转录病毒的携带情况。方法 :根据以往建立的 PCR、RT-PCR检测方法 ,对来自于巴马小型猪外周血淋巴细胞的 DNA和RNA样品进行 PERV核心蛋白基因 ( gag)、多聚酶基因 ( pol)及囊膜基因 ( env)的存在与表达进行检测 ;同时 ,根据目前通用的 env基因分型方法检测 PERV env-A、env-B、env-C的存在与表达。结果 :在 1 2个被检的 DNA样品中均检出了PERV特异性 DNA的存在 ;同样 ,在 1 2个被检的 RNA样品中均有 PERV特异性 RNA的表达 ,且所表达的 PERV均为 A型和 B型 ;其中有9个 DNA样品检测出 PERV-C型的存在 ,所有样品中均未检出 C型 PERV的表达。结论 :检测结果表明 1 2个被检巴马小型猪基因组中存在着内源性反转录病毒序列 ,且能以 m RNA的形式表达 ,这一结果为我国特有小型猪的开发、利用及其病毒安全性评价奠定了基础。  相似文献   

T7 RNA多聚酶基因的克隆、序列测定及其在E.coli中的表达     

余兴龙  涂长春  徐兴然  张茂林  张青婵  李作生 《中国兽医学报》2003,23(5):452-454

从BL21(DE3)E．coli菌株中以PCR的方法扩增得到了与T7RNA多聚酶(T7RNApolymerase，T7pol)基因大小一致的DNA片断。将PCR产物纯化后直接克隆到pGEM—T载体中，经酶切鉴定和DNA序列分析表明克隆得到了正确的T7pol基因。将T7pol基因亚克隆入pET-28b( )中，构建得到原核表达质粒pET28T7。该质粒的BL21(DE3)pLysS转化菌在IPTG的诱导下可表达约98800的蛋白，这与T7pol的相对分子质量一致。将该质粒转化DH5α、JMl09、HBl01、BL21(DE3)和BL21(DE3)pLysS等5种不同的宿主菌，仅有转化T7pol酶活性受到抑制的宿主菌BL21(DE3)pLysS才能得到转化子，而其余4种T7T7pol酶活性不受抑制的E．coli宿主菌不能得到转化子。pET28T7原核表达质粒这种仅能在T7pol酶活性受到抑制的宿主菌中才能存活的现象说明本试验所克隆的T7pol基因能正确表达出具有RNA转录酶活性的蛋白。  相似文献   

利用PCR对鸭瘟和鸭"传染性肿头症"的鉴别诊断   总被引：4，自引：0，他引：4  

齐雪峰  杨晓燕  罗薇  岳华  刘内生 《四川畜牧兽医》2003,30(10):21-21

本文利用聚合链反应(PCR)技术对鸭瘟和鸭“传染性肿头症”进行鉴别诊断。结果证明该方法具有特异、快速的特点。可对这两种临床症状较为相似的鸭传染性疾病进行快速鉴别诊断。  相似文献   

PCR技术在畜禽细菌病诊断中的应用     

刘红亮  袁逢新 《河南畜牧兽医(综合版)》2002,23(4):9-10

聚合酶链反应（PCR）又称无细胞克隆技术，是一种根据生物体内DNA复制的某些特点而设计的在体外对特定DNA序列进行快速扩增的新技术。近几年来，随着PCR技术的迅速发展及世界各国对畜禽传染病的日益重视，PCR技术在兽医实验室诊断中的应用已屡见不鲜。本文仅概述其在畜禽细菌性疾病诊断和研究中的应用。１沙门氏菌Nguyen根据肠炎沙门氏菌C７具有特异性的序列（２．１kbHingIII片断）设计出１对引物，从２３种沙门氏菌中扩增出２．０kb的产物，其它１９种肠道细菌对照没有扩增产物。李景鹏等根据H１基因序列设计１对引物扩增H１基…  相似文献   

犬埃立克体实验模型初步研究   总被引：1，自引：0，他引：1  

潘华  孙洋  马玉海  佟世德  莫卓寿  张雪颍  陈香蕊 《中国兽医学报》2001,21(3):271-273

将犬埃立克体标准毒株（Florida株）体外细胞纯培养物和我国犬埃立克体病病犬血白细胞分别接种于C3H小鼠，接毒后d，经PCR检测证实均感染成功。本试验为犬埃立克体病小动物模型的建立打下了基础。  相似文献   

苏铁珊瑚状根及根周围土壤中蓝细菌的PCR指纹图谱     

陈彬  宋铁英  郑伟文 《福建农业学报》2004,19(1):58-61

以福建苏铁(Cycas reualuta)珊瑚状根及根周围土壤的蓝细菌分离物的悬浮液作为PCR反应的模板．用引物STRRmod、STRRspecial和Hip TG对分离物进行PCR扩增．比较其指纹图谱。结果表明，苏铁珊瑚状根内蓝细菌的指纹图谱不同于其周围土壤中蓝细菌的指纹图谱；也证实了同一地方不同株苏铁根周围的土壤蓝细菌具有多态性，苏铁珊瑚状根的不同分支的蓝细菌也具有多态性。  相似文献