青杄转录因子基因PwNF-YB8的克隆与功能分析     

《林业科学》2021,57(5)

【目的】NUCLEAR FACTOR Y(NF-Y)转录因子在真核生物中广泛存在,通常由NF-YA、NF-YB和NFYC 3个亚基形成异源三聚体,来结合下游靶基因启动子中的CCAAT顺式作用元件,进而调控植物的生长发育进程,并参与植物非生物逆境胁迫过程。本研究对青杄中PwNF-YB8基因的表达特性及功能进行分析,揭示其参与的生理过程及对非生物逆境胁迫的响应。【方法】根据实验室前期EST测序及RNA-seq转录组数据分析结果获得青杄NF-Ys家族基因序列,克隆得到PwNF-YB8的cDNA序列,并对其编码蛋白进行序列特征和进化树分析。采用qRT-PCR分析PwNF-YB8在不同组织和花粉萌发过程中的表达特性,以及高温、盐胁迫、甘露醇、ABA处理后的表达变化。亚细胞定位揭示PwNF-YB8在细胞中发挥功能的场所。通过酵母双杂交试验、双分子荧光互补试验分别检测PwNF-YB8的转录激活活性以及与PwHAP5的互作情况。农杆菌介导花序侵染法转化野生型拟南芥(WT),获得纯合的PwNF-YB8过表达株系。利用CRISPR/Cas 9技术获得其同源基因AtNF-YB8的突变体。甘露醇和盐处理后测定野生型(WT)、空载体(VC)、突变体株系(nfyb8-cas9#1/12)和过表达株系(L4、L5)的萌发率、幼苗根长,分析比较不同株系对于渗透胁迫和盐胁迫的耐受能力。【结果】PwNF-YB8基因的开放阅读框为489 bp,编码162个氨基酸,具有典型的NF-YB保守结构域,并且与白云杉同源基因具有较近的亲缘关系。SqRT-PCR和qRT-PCR结果表明在青杄的根、茎、针叶和花粉中均能检测到PwNF-YB8的表达,其在花粉中的表达量最高。亚细胞定位试验结果显示,PwNF-YB8定位于细胞核、细胞质中。酵母自激活试验显示PwNF-YB8自身无转录激活活性。进一步对青杄幼苗进行高温(42℃)、盐胁迫、甘露醇和脱落酸处理后发现,PwNF-YB8对干旱和盐2种非生物逆境处理明显响应。PwNF-YB8参与了花粉萌发过程,在花粉萌发36 h时表达量最高。酵母双杂交和双分子荧光互补试验证明PwNF-YB8能够与NF-YC亚基中的PwHAP5互作,可能共同参与花粉管发育调控。甘露醇或盐处理下,异源过表达PwNF-YB8基因的拟南芥种子萌发率与野生型差异不显著,但其根长表现出一定的生长优势。【结论】青杄PwNF-YB8能够与PwHAP5互作,参与花粉萌发和花粉管生长过程,并在干旱、盐胁迫响应中发挥作用。  相似文献   

摊青时间与茶叶品质     

李传忠 《蚕桑茶叶通讯》2007,(4):39-39

茶鲜叶适当摊青可散发青草气,清香显露;适当破坏叶绿素,成茶色泽更翠绿;使鲜叶变软,有利做形.笔者于3月24日在大悟县悟峰名茶厂开展了茶鲜叶摊青试验,旨在探索在一定条件下鲜叶摊青时间与成茶品质的关系.  相似文献   

桃蛀螟对青霉菌侵染苹果的产卵选择与行为趋向反应     

石霞  艾莹婷  石芮竹  张民照  王海香  杜艳丽 《植物保护学报》2019,46(2):434-442

为探明桃蛀螟Conogethes punctiferalis偏好于在青霉菌Penicillium侵染的苹果上产卵的特点与机理,从苹果、玉米和柑橘上分离、纯化获得15株青霉菌,通过形态学和rDNA-ITS序列分析鉴定后,以健康苹果为对照,测试不同青霉菌菌株侵染的苹果对桃蛀螟产卵选择的影响,并利用四臂嗅觉仪测试桃蛀螟对青霉菌诱导的苹果挥发物的行为趋向反应。结果表明,15株青霉菌分别属于皮落青霉P. crustosum、橘青霉P. citrinum、苏门答腊青霉P. sumatrense和指状青霉P. digitatum的不同株型;桃蛀螟对其中的12株青霉菌侵染的苹果的产卵选择率均极显著高于健康苹果,尤其对皮落青霉CO5菌株、苏门答腊青霉OR3菌株和指状青霉OR5菌株侵染的苹果的产卵选择率最高,分别达到67.73%、61.50%和68.39%;桃蛀螟对感染皮落青霉CO5菌株和指状青霉OR5菌株的苹果挥发物的选择率分别为31.37%和29.19%,均显著高于对感染橘青霉OR1菌株和苏门答腊青霉OR3菌株的苹果挥发物的选择率18.14%和21.31%,且前二者之间、后二者之间均无显著差异。表明青霉菌可通过影响寄主植物挥发物释放,从而影响桃蛀螟对寄主植物的产卵选择和行为趋向反应。  相似文献   

不同处理对蛭石栽培的微型薯疮痂病防控效果及其微生态效应分析   总被引：1，自引：0，他引：1  

胡洪涛  朱志刚  周荣华  杨靖钟  蔡兴奎  颜冬冬 《华中农业大学学报》2021,40(4):72-79

通过田间小区试验评价了6个不同处理对蛭石栽培的微型马铃薯疮痂病的防效,并采用16S核糖体基因高通量测序技术研究了蛭石中细菌群落结构的变化.试验结果显示,棉隆+青霉菌34107处理对疮痂病防效最好(93.43％),显著高于对照药剂中生菌素处理(65.10％);而且商品薯的数量和经济效益也最高,分别达到348.3万个/hm...  相似文献   

喷施爱增美对洛阳青枇杷果实品质的效应     

杨照渠  夏鋆彬  刘才宝  王卫利  徐友根  丁秀清 《河北农业科学》2007,11(5):34-35

研究了喷施爱增美对洛阳青枇杷果实品质的效应.结果表明:在其幼果发育期喷施爱增美水剂3 000～5 000倍液30 mg/kg,枇杷单果重与果实可食率均有增加,果实可溶性固形物、总糖、Vc及胡萝卜素含量也有不同程度的提高.喷施爱增美对枇杷果实的外观品质与内在品质都有一定改善,处理浓度以3 000倍液为佳.  相似文献   

家兔的春季饲养繁殖技术     

郭凤花 《黑龙江动物繁殖》2007,15(2):46

1加强营养增加全价配合饲料和优质青绿饲料的喂量。种公兔每天的饲喂量:精料50～100g,青绿饲料为500～600g。种母兔每天的饲喂量:优质青干草125～175g,多汁饲料100～200g,混合精料35～45g。  相似文献   

青鳞鱼鱼肉提取物在加热过程中的性质研究     

邓尚贵 《福建水产》2000,(1):17-22

本文以青鳞鱼鱼肉为原料,采有冷水法和酶水解法制备提取物并对其在加热过程中的性质进行了研究。结果表明：①青鳞鱼鱼肉蛋白含量为68．3-71％且水溶性蛋白与水不溶性蛋白之比约为2：9;②酶水解法提取物非蛋白氮约为其总氮的50％．而冷水法提取物则为41．5％;③酶水解法提取物在50℃、60℃、70℃、80℃和90℃的温度条件下加热2h后．颜色明显加深,同时产生大量的呈香物质。但常规成分基本无变化;而冷水法提取物在同样的温度条件下,其颜色、滋味等感官特性变化不明显,但常规成分变化却明显;④提取物水溶性蛋白的变性温度为60—70℃,70—90℃时提取物总氮大部分是非蛋白氮。青鳞鱼提取物在加热过程中的这些性质为其加工和利用提供了重要的理论依据。  相似文献   

EFS40和EFS60对青鳉胚胎毒性的研究     

秦洁  张清靖  刘盼  贾成霞  田树军 《水产科学》2010,29(12)

以青鳉受精卵为试验材料,研究了2种抗冻液EFS40和EFS60对5个不同发育期的胚胎的毒性作用.试验结果表明,青鳉的囊胚期胚胎对EFS40和EFS60的毒性耐受力最差,在EFS40 和EFS60中处理2 min后的成活率分别为41.7%和35.6%,孵化率分别为38.2% 和31.9%,与对照组成活率(96.7%)与孵化率(93.3%)差异极显著(P<0.01);6肌节、16肌节和24肌节胚胎对EFS40 和EFS60的耐受力依次增强;发眼期胚胎的耐受力最强,其胚胎在EFS40中处理30 min后的成活率仍为93.3%,孵化率为77.3%,其余各时期胚胎成活率均显著地降低(P<0.01),发眼期胚胎在EFS60中处理20 min的成活率为75.9%,孵化率70.6%,其余各时期胚胎的成活率都显著地降低(P<0.01).各时期的青鳉胚胎在EFS40和EFS60中都随着毒性处理时间延长其成活率和孵化率逐步降低.EFS60对青鳉胚胎的毒性大于EFS40.  相似文献   

病毒感染过程中青鳉irf2基因过表达的双面性     

姜正正  罗君志  申萍  王志  庞连慧  潘启华  刘红  陈天圣 《水产学报》2021,45(9):1465-1477

为了探究干扰素调节因子2 (interferon regulatory factor,IRF2)如何通过调控干扰素(IFN)表达影响鱼类的免疫,实验从青鳉中克隆了irf2 (Olirf2),发现该基因在青鳉各个组织中均有表达;将构建的真核表达载体pTol2/CMV-IRF2/IE1-pr转染到胖头鱥肌肉细胞系(FHM)后,发现瞬时过表达Olirf2能够显著促进鲤春病毒血症病毒(spring viremia of carp virus,SVCV)的复制,并抑制抗病毒相关基因mx1、ifn和irf3的表达。进一步通过双荧光素报告系统发现,Olirf2能够显著抑制NF-κB和ISRE的活性,说明Olirf2可能通过抑制细胞的天然免疫应答进而促进病毒的增殖。然而持续过表达Olirf2则增强了细胞的抗病毒能力,同时促进干扰素相关基因mx1、ifn和irf3的表达。因此,Olirf2基于表达的持续时间不同而具有抗病毒或者促病毒的双面效果。实验通过研究Olirf2在抗病毒信号通路中发挥的作用,为通过基因编辑或者转基因手段来构建抗病毒的鱼类提供了理论基础。  相似文献   

捕食性天敌黄斑青步甲的研究     

吴彤林  谢凤云  赵同贵 《中国南方果树》2009,38(1)

黄斑青步甲Chlaenius micans (Fabricius)在贵州一年发生3代,以成虫在土壤、杂草、石缝等处越冬,为柑桔害虫的重要天敌,主要分布在柑桔等果树上,对柑桔害虫有很强的控制作用.黄斑青步甲主要以成虫捕食猎物为主,一昼夜最大捕食量为8头.  相似文献