棉花去泛素化酶基因GhOTUD5原核表达条件的优化     

兰艳平  刘东  赵岩  张丽  陈义  冯加加  渠云芳  黄晋玲 《分子植物育种》2020,(10):3223-3231

棉花组蛋白去泛素化酶GhOTUD5与生殖发育密切相关。为了获得大量可溶性表达的GhOTUD5蛋白,本试验对目的蛋白原核表达条件进行优化。采用分子克隆方法构建重组表达载体pET-22b-GhOTUD5,转化大肠杆菌(Escherichia coli)BL21(DE3)和Transetta(DE3),用异丙基-β-D-硫代半乳糖苷(isopropylβ-D-1-thiogalactopyranoside,IPTG)诱导目的蛋白表达。在对影响原核表达的四个单因素(菌体密度OD600,诱导剂IPTG终浓度,诱导时间和诱导温度)分别分析的基础上,设计三水平的正交试验L9(43),摸索大量可溶性目的蛋白表达的最优条件。结果显示,目的蛋白GhOTUD5在Transetta(DE3)中成功表达,在BL21(DE3)中不表达。在菌体密度OD600为0.8、诱导温度为28℃、IPTG终浓度为0.7 mmol/L、诱导3 h的条件下可溶性目的蛋白表达量最高,达到13%左右。该研究结果为进一步研究GhOTUD5在棉花育性方面的功能提供了科学数据。  相似文献   

贵州白香猪apoA5基因多态性初步分析     

杨远青  刘若余 《黑龙江畜牧兽医》2011,(15)

贵州白香猪为贵州特有的地方品种,为了研究贵州白香猪apoA5基因多态性,试验采用直接测序法对贵州白香猪apoA5基因全序列2 473 bp进行单核苷酸多态性(SNPs)检测。结果表明:在apoA5基因的内含子2和外显子3中分别检测出1个、11个变异位点;有4个突变发生在氨基酸编码区内,其中3个突变为同义突变,而G1 185A突变为非同义突变,导致了密码子由CGC突变为CAC,从而导致氨基酸由精氨酸(Arg)突变为组氨酸(His);另外7个突变位点发生在3'-UTR;在检测出的12个变异位点中,G1 690C及G1 821C突变符合Hardy-Weinberg平衡状态,其余10个位点偏离了Hardy-Weinberg平衡。  相似文献   

Role of the suppressor of cytokine signaling 2 (SOCS2) during meningoencephalitis caused by Bovine herpesvirus 5 (BoHV-5)     

《Comparative immunology, microbiology and infectious diseases》2016

The role of suppressors of cytokine signaling (SOCS) in meningoencephalitis caused by Bovine herpesvirus 5 (BoHV-5) was evaluated by intracranial infection in C57BL/6 wild-type mice (WT) and SOCS2 deficient mice (SOCS2^−/−). Both infected groups presented weight loss, ruffled fur and hunched posture. Additionally, infected SOCS2^−/− mice showed swollen chamfer and progressive depression. Infected WT animals developed mild meningitis, characterized by infiltration of mononuclear cells. Moreover, viral DNA was detected in liver and lung from infected WT group. This group also showed elevated brain levels of IFN-γ, IL-10, CXCL1 and CCL5, when compared with non-infected WT animals. Brain inflammation was exacerbated in infected SOCS2^−/− mice with widespread distribution of the virus and increased brain levels of TNF-α, IFN-γ, IL-10, IL-12, CXCL1 and CCL5, when compared with WT infected mice. Moreover, infected SOCS2 deficient mice exhibited reduced brain mRNA expression of IFNα and IFNβ and increased expression of mRNA of SOCS1, compared with infected WT mice. Taken together, our study provides an insight into the role of SOCS2 in modulating the immune response to BoHV-5 infection.  相似文献   

西瓜新品种农科大5号的选育     

马建祥  张显  张勇  杨建强  杨瑞平 《中国蔬菜》2010,1(14):85-87

农科大5号是以自交系M18为母本,自交系F23为父本配制而成的西瓜新品种一代杂种。早熟,果实发育期28～30d(天),全生育期90～92d(天);易坐果,果实圆形,果形指数1.1;果皮深绿色,覆墨绿色中细条带,皮厚0.93cm,硬韧,耐贮运;果肉红色,肉质沙细,汁多纤维少,口感佳,品质优,中心折光糖含量12.4%,中边糖梯度小;田间调查表明对蔓枯病的抗性强于对照京欣2号,枯萎病零星发生,未见炭疽病和白粉病发生;单瓜质量5.9kg,产量3200kg·(667m2)-1。适宜在陕西及同类生态区早春设施西瓜种植区种植。  相似文献   

5-羟甲基糠醛选择性加氢制备2,5-二甲基呋喃的研究进展     

胡磊  吴真  许家兴  孙勇  林鹿  徐宁  戴本林 《林产化学与工业》2015,(3)

鉴于2,5-二甲基呋喃(DMF)优良的理化性质、重要的应用价值和广阔的市场前景,着重从氢气、甲酸、醇类和水等不同氢供体的角度入手,系统归纳和总结了自2007年以来5-羟甲基糠醛(HMF)选择性加氢制备DMF的催化反应体系及其最新的研究进展,并对今后HMF选择性加氢制备DMF的研究前景进行了展望。  相似文献   

非洲紫罗兰F3'5'H基因的克隆及烟草的转化分析     

焦阳  陈洁  贾海燕  张克  杨凯  王文和 《北京农学院学报》2014,29(3):11-13

本研究利用PCR技术克隆了非洲紫罗兰(Saintpaulia ionantha)花色合成的关键酶,F3′5′H的基因。对克隆序列的分析表明,F3′5′H基因序列上非洲紫罗兰与金鱼草(Antirrhinum Kelloggii)、矮牵牛(Torenia Hybrida)有着较近的亲缘关系。构建了该基因的pCAMBIA1304表达载体,采用农杆菌介导叶盘法转化普通烟草(Nicotiana tabacum),获得了转基因植株。利用高效液相色谱法(HPLC)法检测转基因植株类黄酮含量,转基因烟草类黄酮相对含量升高4.0%~16.3%,同时花色向紫色转变。表明该基因对植物花色的形成有重要作用,可为基因工程蓝色花育种提供理论依据和基础。  相似文献   

植物△1-吡咯啉-5-羧酸合成酶（P5CS）基因的研究进展     

李健  彭东海  张风娟  杨丽涛  李杨瑞 《广西农业科学》2014,45(9):1545-1550

△1-吡咯啉-5-羧酸合成酶（P5CS）是植物脯氨酸生物合成的关键酶.近年来,许多学者对P5CS酶基因克隆、其在植物中的表达特性与在抗逆基因工程上的应用进行了大量研究,证实P5C5基因已成功在许多植物中进行过量表达并能有效提高植物的抗旱、耐盐性.随着分子生物学和现代生物技术的快速发展,今后可进一步挖掘利用植物P5CS基因,有效验证其功能和了解其作用机制,探讨P5C5基因与其他基因的互作及调控植物抗逆的生理生化机理,研究其在植物生长发育及器官发生等过程中的作用;培育出高效、实用、抗逆性强的转基因植物品种,均有待今后进行深入研究.  相似文献   

新疆猪繁殖与呼吸综合征病毒分离鉴定及Nsp2和ORF5基因遗传变异分析     

张美玲  陆桂丽  薛晶  刘丽雅  简子健  夏俊 《广东农业科学》2014,41(17):106-110

为探索新疆猪繁殖与呼吸综合征病毒(PRRSV)的变异特征,利用RT-PCR、ORF5和部分NSP2基因序列进行分析,鉴定从新疆某猪场疑似猪高热病死亡猪肺脏分离出的一株病毒.分离的病毒株被鉴定为PRRSV美洲型,命名为XJ-Q株.该株病毒与香港分离株HK13亲缘关系最近,与国内变异株(HUB1和JXA1)同源性较为亲近.与美洲型标准毒株VR-2332相比,该分离株在481位和532～560位共有30个氨基酸缺失;与国内分离的PRRSV变异株相比,在487～489位有3个氨基酸的独特缺失.结果表明,新疆分离株为PRRSV美洲型,属于新缺失的PRRSV毒株.  相似文献   

毛白杨木质素合成酶基因F5H克隆与生物信息学分析     

王轶男  陈雪  盖颖 《广东农业科学》2014,41(20):131-135

克隆毛白杨阿魏酸-5-羟基化酶(F5H)基因全长序列,并通过生物信息学分析,为进一步研究F5H基因功能提供基础.利用RT-PCR方法成功从毛白杨741组培苗叶片中克隆了F5H基因,并对F5H基因的核苷酸序列及推导的氨基酸序列进行分析,包括疏水性-亲水性、氨基酸翻译后修饰、亚细胞定位、跨膜结构域、蛋白质二级三级功能结构域等进行分析预测和推断.获得的基因长度为l 686 bp,编码区1542 bp,与已公布的毛果杨F5H mRNA序列(GenBank登录号为AJ010324)的编码区相似性达97.45％,并与其他植物的该基因序列具有同源性.F5H是亲水性较强的蛋白,整条肽链有1个跨膜结构域;通过亚细胞定位表明F5H主要位于质体中,并含有磷酸化位点有19个.F5H含有丰富的二级结构,卷曲占44.44％、折叠占7.02％、螺旋占48.54％,并预测了其三维结构.分析结果显示,植物的阿魏酸-5-羟基化酶是一个具有跨膜结构域的亲水性蛋白,在内质网等分泌途径中表达.  相似文献   

5-5型并联机器人位置正解的简单算法     

石志新  叶梅燕  毛志伟  罗玉峰  杨廷力 《农业机械学报》2014,45(3):314-319

对一类5-5台体型并联机器人机构的结构特征进行了深入分析,提出了其位置正解分析与求解的简单方法。首先利用序单开链的思想对该机构进行拓扑特征分析和结构分解,将其运动学方程维数降至最小,然后利用一维搜索法得到全部实数解,最后将该方法应用于具体实例,结果不仅表明了该方法的有效性,而且首次给出了具有20组实数解的机构实例。  相似文献