蒲公英酶解抗菌肽的分析     

林贺  金平  杨培国  唐姗  张辉  尹春梅 《分子植物育种》2020,(10):3388-3394

为拓展蒲公英抗菌肽在抗菌类新药领域的开发应用,利用酶解法制备蒲公英抗菌肽对比蒲公英蛋白大于10 kD组分、3~10 kD组分、1~3 kD组分、小于1 kD组分的抑菌活性,根据筛选结果对抑菌活性较强的组分使用LC-MS技术进行结构解析来分析药效物质基础。结果表明:各组分对大肠杆菌和金黄色葡萄球菌的生长抑制活性顺序为酶解肽>小于1 kD组分>1~3 kD组分>3~10 kD组分>大于10 kD组分>空白对照。推断分析小于1 kD组分结构发现3个寡肽:PGYGT-T1的结构为NH2-Asp-Val-COOH,PGYGT-T2的结构为NH2-Asn-Glu-COOH,PGYGT-T3的结构为NH2-Val-Arg-COOH;推断分析酶解肽结构发现3个寡肽:PGYGT-M1的结构为NH2-PHe-Lys-COOH或NH2-PHe-Gln-COOH,PGYGT-M2的结构为NH2-His-Cys-COOH,PGYGT-M3的结构为NH2-Val-Arg-COOH,结果说明蒲公英抑菌活性最好的酶解肽组分和小于1 kD组分药效物质均为寡肽类成分。该研究为蒲公英蛋白肽的开发利用及蒲公英抗菌肽新药的生产提供帮助。  相似文献   

以谷蛋白GluA-2信号肽增强外源蛋白在转基因水稻胚乳中的表达与积累     

王红梅  张昌泉  李钱峰  辛世文  刘巧泉  徐明良 《作物学报》2015,41(4):524-530

提高外源蛋白在特定目标组织器官中的表达量是转基因植物研究与开发的核心技术之一。谷蛋白是水稻种子中最主要的贮藏蛋白,其表达具有严格的时空特异性。为进一步研究谷蛋白信号肽序列在指导基因表达中的作用,本研究克隆了水稻谷蛋白Glu A-2基因的启动子及其信号肽编码序列,并与GUS报告基因编码区融合,构建了分别含有和不含有信号肽的表达载体p13GG和p13GSG;经农杆菌介导法分别转入同一水稻品种中,获得了20多个独立转化子,PCR证明外源基因都已整合进了水稻基因组中。Northern杂交结果表明,融合Glu A-2信号肽编码序列可显著提高GUS基因在水稻胚乳中的转录;利用GUS特异的抗体进行Western杂交分析,显示该信号肽序列可显著提高外源蛋白在转基因水稻胚乳中的积累,但是其所指导表达的GUS蛋白在水稻胚乳中并没有表现出相应的活性,其机制有待进一步深入解析。相关结果对于水稻品质改良基因工程研究以及以水稻种子作为生物反应器高效表达外源蛋白具有重要的指导作用。  相似文献   

小肽的吸收机制及其营养作用     

刘冬  付海涛  彭光华  张声华 《农产品加工．学刊》2006,(11):27-30

对小肽的吸收机制、吸收特点,营养作用,以及影响小肽吸收的因素进行了论述,并阐述了小肽研究的最新进展。  相似文献   

Kaurane-type diterpenoids from Chromoleana odorata, their X-ray diffraction studies and potent α-glucosidase inhibition of 16-kauren-19-oic acid     

Wafo P  Kamdem RS  Ali Z  Anjum S  Begum A  Oluyemisi OO  Khan SN  Ngadjui BT  Etoa XF  Choudhary MI 《Fitoterapia》2011,82(4):642-646

A new diterpenoid, 15-angeloyloxy-16,17-epoxy-19-kauronic acid (1), along with five known metabolites, 16-kauren-19-oic acid (2), 6′-hydroxy-2′,3′,4,4′-tetramethoxychalcone (3), isosakuranetin (4), acacetin (5), and kaempferide (6) was isolated from the organic extracts of the roots of Chromoleana odorata. Their structures were determined by spectroscopic evidences. The structures of 1 and 2 were further confirmed by single-crystal X-ray diffraction studies. Compound 2 exhibited significant α-glucosidase inhibitory and antibacterial activities against Escherichia coli and Bacillus subtilis.  相似文献   

章鱼下脚料酶解工艺优化的研究     

于梅  宁杰  朴美子 《农产品加工．学刊》2011,(6):52-54

利用Arazyme蛋白酶酶解章鱼下脚料,以酶解液中的多肽含量为指标,研究加酶量、酶解时间、料水比3个因素对酶解效果的影响,利用正交试验对酶解工艺进行优化,确定酶解的最佳条件。结果表明,在加酶量300 U/g,料水比1∶15,酶解时间3 h,酶解液中的多肽质量浓度达5.079 8 mg/mL。  相似文献   

复合酶解大豆蛋白工艺的研究     

纪蕾  肖军霞  聂小宝  王博华 《农产品加工．学刊》2011,(12):25-28

以大豆蛋白为原料,采用复合蛋白酶Protamex与木瓜蛋白酶酶解,并通过单因素和正交试验分析。结果表明,Protamex酶与木瓜蛋白酶配比为6∶4,pH值为7.0,底物质量分数为5%,酶解时间为8 h,温度为60℃且水解度达到34.59%,为最佳酶解工艺。  相似文献   

奥利亚罗非鱼促性腺激素释放激素cDNA的克隆及原核表达     

曹丽萍  丁炜东 《上海水产大学学报》2006,15(3):270-275

促性腺激素释放激素(gonadotropin-releasing hormone,GnRH)是下丘脑分泌产生的神经激素,对脊椎动物生殖的调控起重要作用。本研究通过RT-PCR方法从奥利亚罗非鱼丘脑中扩增出长约400 bp的目的序列GnRH,并将其克隆到T载体中,经酶切鉴定、序列测定分析后表明其与尼罗罗非鱼和乌颊海鲷具有较高的同源性,处于同一个进化分支上;而与日本青、金鱼、拟鲤、壁虎等的同源性较低。将此cDNA片段定向克隆到表达载体pMAL-c2x中构建重组表达质粒pMAL-GnRH,转化到大肠杆菌TB1中,0.3M IPTG诱导4 h后成功表达出与预期大小相符的约56 kD的融合蛋白。表明大肠杆菌表达系统可以成功地体外表达奥利亚罗非鱼GnRH,为进一步制备抗体了解其免疫调节作用奠定基础。  相似文献   

不同水解程度丝素肽对黑色素生成抑制能力的研究   总被引：5，自引：0，他引：5  

陈芳艳  纪平雄  王林川  彭文芳 《华南农业大学学报》2002,23(4):8-10

探讨了脱胶丝素经盐溶解后进行碱水解时 ,不同条件对丝素水解程度及不同水解程度丝素肽对蚕血黑色素生成的抑制能力的影响 .结果发现 ,温度对丝素的水解程度影响最大 ,时间其次 ,浓度的影响最小 ;丝素蛋白液未水解时 ,其对黑色素抑制率很低 ,只有 2 8.34% ,而丝素水解后 ,抑制率迅速提高到 4 8.95 % ,并且随着水解程度的加深不断提高 ,当氨基氮浓度达 0 .4 76 5g·L-1时 ,其对黑色素生成抑制率达最高值 6 7.14 % ;之后 ,随着水解程度的增加 ,其黑色素生成抑制率反而下降 .  相似文献   

重叠区扩增法合成抗菌肽B基因   总被引：1，自引：0，他引：1  

桑春果  张开春  张军科 《西北农林科技大学学报(自然科学版)》2002,30(1):65-67

人工设计并合成了抗菌肽 B基因的 4个寡聚核苷酸片段 ,通过重叠区扩增法 ,扩增出了相当于抗菌肽基因全长的寡聚核苷酸片段。经克隆测序 ,证明成功地实现了抗菌肽基因的人工合成、拼接和克隆。  相似文献   

革胡子鲶生长激素成熟肽cDNA克隆及其在大肠杆菌中的表达     

杨学明  何荆洲  张立  黄雄军  郭亚芬  蒋和生 《安徽农业科学》2008,36(35)

[目的]构建革胡子鲶生长激素基因原核表达体系。[方法]采用PCR方法,扩增得到了革胡子鲶生长激素基因成熟肽的cDNA序列,将该序列克隆至原核表达载体pRSET-A,构建重组质粒pRSET-mGH,并在大肠杆菌BL21(DE3)pLysS中进行表达。[结果]革胡子鲶生长激素成熟肽cDNA序列全长534 bp,编码1个由178个氨基酸残基组成的生长激素成熟肽,分子量为20.28 kDa,等电点为5.93。SDS-PAGE和Western blot分析表明,表达的目的融合蛋白分子量为27.41 kDa,主要以非可溶性的包涵体形式存在于菌体沉淀中。目的融合蛋白的表达量高达细菌沉淀蛋白总量的36.8%。[结论]该研究为革胡子鲶生长激素的产业化开发和应用奠定了基础。  相似文献