猪流行性腹泻病毒SHpd/2012株Nsp8基因分析及真核表达     

丁思嘉  罗依然  周书亭  马世文  蒲良  杨亮  刘源平  蒋升瑶  叶力波利·达吾力  杨志彪 《上海交通大学学报(农业科学版)》2019,(2):64-69

应用生物信息工具和分子克隆技术对PEDV SHpd/2012株Nsp8基因编码的蛋白进行了结构和功能分析以及体外表达。结果显示,NSP8蛋白是一个含有194个氨基酸的亲水性蛋白,不含信号肽和跨膜区。SHpd/2012毒株高度保守的NSP8氨基酸序列与CV777、AJ1102等毒株同源性高。NSP8蛋白也是一个单体蛋白,共有5个优势抗原表位。此外,本研究成功地在293T细胞内表达了NSP8蛋白,为进一步研究猪流行性腹泻病毒NSP8蛋白的功能提供了理论基础。  相似文献   

京海黄鸡柔嫩艾美尔球虫感染对脾脏和盲肠IL-6、IL-8、CCLi2基因表达量的影响及其相关性     

辛世杰  王晓慧  戴国俊  安婷婷  张涛  张跟喜  谢恺舟  王金玉  王宏胜 《浙江农业学报》2019,31(1):39

白介素6(IL-6)、白介素8(IL-8)和CC趋化因子配体2(CCLi2)3种细胞因子在炎症反应以及机体免疫方面发挥重要作用。为了揭示球虫感染对脾脏和盲肠中IL-6、IL-8和CCLi2的表达量的影响,以京海黄鸡(Gallus gallus)为试验材料,设球虫感染组和非感染的对照组,利用实时荧光定量PCR(qRT-PCR)检测了脾脏与盲肠组织中IL-6、IL-8和CCLi2的mRNA的相对表达量,比较同一组织感染组与对照组间3个基因表达量的差异,同时分析同一处理组的同一组织内、不同组织间3个基因表达量的相关性。研究结果表明:感染组脾脏组织IL-6、IL-8和CCLi2三个基因的表达量均显著高于对照组(P<0.05),其中IL-6基因达极显著水平(P<0.01);感染组盲肠组织中IL-6、IL-8和CCLi2的表达量均极显著地高于对照组(P<0.01)。相关性分析结果表明,感染组脾脏组织中IL-6、IL-8和CCLi2的表达量之间均存在极显著的正相关(P<0.01);在感染组盲肠组织中IL-8、CCLi2与IL-6基因的表达量存在极显著的正相关(P<0.01),但IL-8与CCLi2基因表达量相关不显著(P>0.05);在对照组脾脏组织中,IL-6、IL-8与CCLi2间存在极显著的正相关(P<0.01),其他基因间相关均不显著(P>0.05);对照组盲肠组织中IL-6、IL-8和CCLi2之间均存在极显著的正相关(P<0.01);此外,无论感染组还是对照组,脾脏和盲肠组织间3个基因的表达量相关性均不显著(P>0.05)。以上结果表明,IL-6、IL-8和CCLi2可能在京海黄鸡球虫感染过程中发挥重要作用,研究结果对进一步探讨这3个基因在球虫病抗病育种中的作用提供了依据,对京海黄鸡球虫病抗病育种具有重要意义。  相似文献   

Protective efficacy of vaccination with NcMIC3 and NcMIC8 against Neospora caninum infection in mice     

Taotao ZHANG  Xiao ZHANG  Qun LIU  Jianhai XU  Jing LIU 《农业科学与工程前沿(英文版)》2019,6(2):188

Microneme proteins (MICs) are important for Apicomplexan parasite invasion due to their adhesion to host cells. Several studies have indicated that Neospora caninum MIC3 and MIC8 are important adhesion factors and potential vaccine candidates against neosporosis. In this study, we evaluated the protective efficacy of recombinant proteins and DNA vaccines of NcMIC3 and NcMIC8. BALB/c mice were immunized with rNcMIC3, rNcMIC8, pcDNA3.1-NcMIC3 and pcDNA3.1-NcMIC8 respectively, and challenged with N. caninum tachyzoites. The immune responses were evaluated through cytokine, antibody measurements and the parasite burden in the mice brain tissues. Serological analysis showed that recombinant protein vaccines induced higher levels of immunoglobulin G (IgG) than other groups. The percentage of IgG1 and IgG2a in the recombinant protein groups was higher than the other groups, and with a predominance of IgG1 over IgG2a, suggesting that recombinant protein vaccines elicited a Th2-type immune response, while DNA vaccines mainly produce a Th1-type immune response. In addition, mice immunized with rNcMIC3 and rNcMIC8 a had lower parasite burden in brain tissue compared with the other groups. These results demonstrate that rNcMIC3 and rNcMIC8 could induce humoral and Th2-type immune response, leading to a considerable level of resistance against neosporosis.  相似文献   

基于SEBAL模型和Landsat-8遥感数据的农田蒸散发估算     

《灌溉排水学报》2019,(1)

【目的】及时准确地获取农田蒸散发量,为科学管理农田灌溉、精准估算作物产量和预报土壤水分动态、合理开发水资源等提供有效依据。【方法】以广利灌区为研究对象,基于SEBAL模型利用Landsat-8数据对研究区域农田蒸散发进行估算,通过地表参数计算净辐射通量、土壤热通量和感热通量,利用余项法求得潜热通量及瞬时蒸散发。假定24 h内蒸散比不变,由瞬时蒸散发扩展到日蒸散发量,最终求得研究区的日平均蒸散发量,将模型计算结果与彭曼公式进行了对比,同时结合灌区提供数据对计算结果进行了验证。【结果】彭曼公式计算2014年5月6日和2015年9月14日蒸散量与实测结果相差分别为5.2%和9.4%,SEBAL模型估算得到2014年5月6日和2015年9月14日的日蒸散量与灌区提供日蒸散量相差4.5%、6.0%,且冬小麦及夏玉米蒸散发在空间上存在一定的差异性,主要集中在灌区中部区域及西南区域。【结论】SEBAL模型计算结果具有较高的精度,而且方法相对快捷高效。  相似文献   

二八灰土回填地下粮仓浮力预警试验研究   总被引：2，自引：2，他引：0  

刘海燕  孟伟新  王振清  田栋杰  徐向楠  刘旭 《农业工程学报》2019,35(11):299-305

地下结构的浮力多以阿基米德定律为基础进行计算,未考虑周围回填土体。该文以某地下粮仓为研究对象,考虑周围回填二八灰土的实际工况,分别进行直径为400(模型筒A)、500(模型筒B)、600 mm(模型筒C)的室内缩尺模型试验。试验包含纯水试验和回填二八灰土试验。纯水试验结果表明,以阿基米德定律计算的实际浮力与模型筒自重(包含模型筒上部约束反力所折算自重)的理论浮力基本一致,模型筒A、B、C的实际浮力与理论浮力的误差分别为0.03%、1%、3%。在回填二八灰土试验中,通过缓慢注水,利用位移计、压力传感器监测模型筒位移及模型筒上部的约束反力,分析了模型筒整个上浮过程中位移和约束反力的变化情况。位移突变值滞后于约束反力突变值,压力传感器读数发生明显变化而位移计读数未发生明显变化所测量的水位为警戒水位,压力传感器与位移计读数均发生明显变化所测量的水位为实际起浮水位。以警戒水位和实际起浮水位作为理论计算依据,得出警戒水位和实际起浮水位时模型筒自重(包含模型筒上部约束反力所折算自重)作用下理论抵抗浮力及计算所得的实际抵抗浮力。警戒水位时模型筒A、B、C实际抵抗浮力为理论抵抗浮力的1.93、2.43、1.66倍。实际起浮水位时模型筒A、B、C实际抵抗浮力为理论抵抗浮力的2.15、3.36、2.96倍。从安全储备方面综合考虑,回填工况地下粮仓在预警水位时实际抵抗浮力为理论抵抗浮力的1.5倍,实际起浮水位时抵抗浮力为理论抵抗浮力的2倍,研究结果为今后地下粮仓及其他地下结构的抗浮设计提供参考。  相似文献   

油茶皂苷的制备及提纯工艺研究     

张向杰  陈■  李晴川  傅晓东 《农产品加工．学刊》2020,(4):41-43,67

为研究油茶皂苷的制备及提纯工艺,为中试化生产提供科学的技术支撑,通过正交试验得到最佳工艺为乙醇体积分数75%,料液比1∶2,提取时间120 min,提取温度60℃,得到纯度为55.65%的油茶皂苷粗品,得率16.12%。油茶皂苷粗品配置成质量分数3%水溶液,加入10%体积的1%壳聚糖絮凝剂絮,经凝沉、淀除去杂质,澄清液经AB-8型大孔树脂吸附90 min,用质量分数2%氢氧化钠溶液洗脱杂质,再用体积分数70%乙醇溶液洗脱油茶皂苷,将洗脱液旋转蒸发,除去乙醇并烘干,即得到纯度85.36%的油茶皂苷。  相似文献   

基于Landsat 8遥感影像的土地利用分类研究——以四川省红原县安曲示范区为例   总被引：3，自引：0，他引：3  

王敏  高新华  陈思宇  冯琦胜  梁天刚 《草业科学》2015,32(5):694-701

以四川省红原县安曲示范社区2013年7月23日的Landsat 8OLI影像为数据源,参照国家土地利用分类标准,结合示范区的野外实际调查资料、数字高程模型、草地资源类型等辅助信息,建立了较为准确的解译标志。将目视解译结果视为地表真实状况,对非监督分类、监督分类和基于专家知识的决策树分类的结果进行精度验证。结果表明,监督分类方法对红原安曲示范区的土地利用分类结果与实际类别吻合最好,其分类总体精度可达85.02%,其中面积占示范区总面积约99%以上的草地、湿地、道路及水体的分类精度分别达88.66%、83.42%、83.73%和85.26%。  相似文献   

鸡白介素8的克隆表达及其生物趋化性研究     

高巍  秦爱建  金文杰  邵红霞 《畜牧与兽医》2008,40(5):9-14

鸡白介素8(cIL8)是9E3/CEF4基因编码的一种诱导型趋化因子。用RT-PCR方法,从鸡胚胚体总RNA模板中扩增cIL8的cDNA序列,测序后,将cIL8基因分别克隆入pGEX-6p-1载体和pFastBacI载体进行表达。利用SDS电泳分离原核表达的cIL8融合蛋白,制备鼠抗cIL8血清,并与昆虫细胞表达的cIL8进行免疫荧光(IFA)反应,同时对雏鸡外周血单个核细胞(PBMC)进行生物趋化试验。结果成功扩增了cIL8基因的cDNA序列,在大肠杆菌和昆虫细胞中均能表达,制备的鼠抗cIL8血清能与昆虫细胞表达的cIL8反应。重组cIL8在一定浓度范围内,可使PBMC发生趋化作用,最高趋化指数为4.38±0.49,且是典型剂量依赖的钟形趋化性反应曲线。本研究结果为cIL8的功能研究和探讨马立克氏病病毒类白介素8(vIL8)的生物学作用奠定了基础。  相似文献   

Hypophagic and dipsogenic effect of the 5‐HT1A receptor agonist 8‐OH‐DPAT in broiler chickens     

A. Saadoun  M. C. Cabrera 《Journal of animal physiology and animal nutrition》2008,92(5):597-604

The effects of the 5‐HT_1A receptor agonist 8‐OH‐DPAT on food and water intake in male broiler chickens were investigated. The injection of 25 or 50 μg/kg of 8‐OH‐DPAT 15 min before refeeding in fasted animals produced a decrease in food intake. No effect was observed in drinking. The injection of 25 or 50 μg/kg of the 8‐OH‐DPAT 60 min after the start of refeeding did not produce any significant modification in food intake. No effect on drinking was recorded. The agonist 8‐OH‐DPAT injected 15 min before water presentation in water‐deprived chickens, produced an increased drinking 60 min after the presentation of water. No effect on food intake was observed. The results show that the effect on food intake of the agonist 8‐OH‐DPAT in fasted–refed broiler chickens was similar to those observed in mammals and layer‐strain chickens. However, the agonist did not alter significantly the food intake when the broilers were fed 60 min before the injection. These results are contrary to the observed effects in mammals and in layer‐strain chickens. Probably, the selection for rapid growth rate in broilers causes modifications in the feeding control pattern. The comparison between broilers and layers strain may be a useful tool to elucidate the complex mechanisms involved in food and water intake regulation in chickens.  相似文献   

Application of a recombinant protein for the serological diagnosis of canine leishmaniasis     

Boarino A  Bollo E  Prunotto L  Canale L  Uslenghi F  Poletti P 《Comparative immunology, microbiology and infectious diseases》2008,31(6):527-536

This work reports the results obtained by a new enzyme-linked immunosorbent assay (ELISA) test developed for the serological diagnosis of canine leishmaniasis.The new ELISA is based on a recombinant protein obtained by joining different antigens of Leishmania infantum.Test performances have been evaluated through the screening 227 sera of dogs, infected and uninfected by L. infantum. The new ELISA test has been compared to the indirect immunofluorescent-antibody test (IFAT) as a reference assay of canine leishmaniasis, and to a commercial ELISA.Excluding from the total number of IFAT positive sera the 27 sera with IFAT titre 1:40 (considered doubtful), the recombinant ELISA showed 97.0% specificity, 93.9% sensitivity and 95.5% agreement with IFAT. The commercial ELISA showed 78.2% specificity, 94.9% sensitivity and 86.5% agreement with IFAT.The results demonstrate a higher performance of the new recombinant ELISA test for the detection of negative samples, with a greater agreement with the reference test (IFAT).  相似文献