酿酒酵母ADH2基因沉默表达载体的构建   总被引：1，自引：1，他引：0  

林燕环  魏芳  叶冰莹  张积森  陈由强 《亚热带农业研究》2011,7(3):197-200

利用重叠延伸PCR获得酿酒酵母基因沉默组件SADH2,经酶切与酿酒酵母穿梭质粒pYES2.0连接,构建酿酒酵母ADH2基因沉默表达载体。经酶切及测序鉴定成功构建了ADH2基因沉默表达载体pSADH2。  相似文献   

DNA提取方法对转基因甘蔗PCR检测的影响     

王晓音  赵婷婷  冯翠莲  张树珍 《热带生物学报》2011,(2):138-142

研究了不同提取方法和不同生长时期甘蔗提取的DNA对转基因甘蔗植株PCR检测的影响。结果表明,幼苗时期提取的甘蔗叶片模板DNA质量高于田间成熟植株;甘蔗幼苗时期的PCR检测易于成熟植株;CTAB法、SDS法和CTAB-SDS法提取的甘蔗叶片DNA均能满足幼苗期甘蔗抗性植株的PCR检测要求;对成熟转基因甘蔗植株而言,以CT...  相似文献   

木薯MeEFⅠ基因的原位PCR物理定位     

冯耀文  王英  高和琼  庄南生 《热带生物学报》2011,(2):129-132

用原位PCR技术将木薯延长因子基因（MeEFⅠ）定位到木薯染色体上,根据MeEFⅠ基因的全长cDNA序列设计该基因的特异引物,以华南6号木薯根尖为材料制备染色体标本,结果表明：通过原位PCR检测发现,在木薯细胞不同时期的分裂相上均能发现1～2个荧光信号位点;通过核型分析,初步将木薯MeEFⅠ基因定位于华南6号木薯的第1...  相似文献   

正常C57BL/6J小鼠器官组织中胰岛素样生长因子结合蛋白7的表达     

陈嵘祎  陈蕾  林映萍  刘珍 《湛江医学院学报》2011,29(3):241-244

目的 观察正常小鼠器官组织中胰岛素样生长因子结合蛋白7(insulin-like growth factor binding protein,IGFBP7)的表达.方法 利用Real-time PCR、免疫荧光法检测正常C57BL/6J小鼠心、肝、脾、肺、肾、肠、胸腺、阴道中IGFBP7表达.结果 心、肝、脾、肺、肾、...  相似文献   

避免基因组DNA污染的半定量RT-PCR新方法     

卢加举  崔百明  廖文彬  于海川  彭明 《天津农业科学》2011,17(6):6-9

为了消除基因组DNA的污染,在逆转录引物oligo-dT5’端加上通用引物T7B结合序列,根据3’-RACE的原理,用T7B和目标基因特异性引物即可进行半定量RT-PCR分析。用该方法对转GhGAI基因的拟南芥进行表达分析,结果表明:此方法可有效避免基因组DNA污染导致的假阳性。  相似文献   

Clone and Bioinformatics Analysis of Pig SRPK1 Gene 5＇ UTR Region     

E Guangxin  LIU Di  YANG Xiuqin  ZHANG Dongjie  YU Cui 《东北农业大学学报(英文版)》2011,18(3):22-27

  相似文献   

稀有鮈鲫芳香化酶基因的表达及内分泌干扰物（EDCs）暴露对其表达的影响     

王晶晶  刘小林  秦芳  王厚鹏  吴婷婷  胡晓齐  王在照 《西北农业学报》2011,20(1):35-39

克隆稀有鮈鲫芳香化酶基因(cyp19a和cyp19b)片段,半定量方法检测其组织表达特异性,实时定量PCR检测2基因在孵化后18~50 d幼鱼的发育阶段表达情况,对成鱼进行3 d的乙炔基雌二醇(EE2,1 nmol/L)和壬基酚(NP,1μmol/L)药物暴露试验,实时定量PCR检测它们对2个基因表达的影响。结果显示,克隆获得759 bp的cyp19a和407 bp的cyp19b片段,cyp19a主要在卵巢中表达,cyp19b主要在脑中表达。在幼鱼发育阶段,cyp19a的表达没有显著差异,cyp19b在38 d后出现明显的下降;成体稀有鮈鲫cyp19a受到EE2极显著抑制(0.23倍,P<0.01),但NP抑制效果不显著(0.59倍),cyp19b在EE2和NP暴露后都有上调的趋势(1.83、1.02倍)。说明cyp19基因可以作为EDCs的作用靶分子,有助于对高等脊椎动物包括人类进行预测和风险评估。  相似文献   

水稻内稃发育相关基因PAL1时空表达研究     

唐雄杰  郭维  王云月  刘林  李成云  罗琼 《云南农业大学学报(自然科学版)》2011,26(2):149-288

 PAL1是项目前期研究克隆的水稻内稃发育相关基因,为了进一步解释其调控水稻内稃发育的分子遗传机制,采实时用荧光定量PCR方法检测了PAL1基因在日本晴和(或)突变体水稻中的表达情况。在水稻的根、叶和幼穗中都检测到PAL1 mRNA,幼穗中表达水平高于根和叶,在突变体中的表达水平低于日本晴水稻;在孕穗期叶中的表达水平高于苗期叶;在成熟花器官中外稃、内稃、雄蕊和雌蕊均有表达,内稃器官中的表达水平最高。这些结果显示：PAL1在生殖生长阶段可能具有更重要的作用;在花器官发育中, PAL1基因的功很能可能是水稻内稃正常发育所必需;PAL1基因在所有器官中都表达,暗示该基因可能参与水稻多方面的发育调控,是水稻中一个重要的发育调控基因。  相似文献   

春兰GLO基因的克隆和实时定量表达分析   总被引：1，自引：0，他引：1  

向林  李伯钧  秦德辉  郭方其  吴超  孙崇波 《浙江农业学报》2011,23(3)

采用RT-PCR结合RACE技术从春兰(Cymbidium goeringii)中分离到一个GLO基因.该基因含有一个630 bp的开放阅读框(ORF),共编码210个氨基酸.系统进化树分析显示,该基因属于B类MADS-box基因的PI/GLO家族,其编码的蛋白与其他植物PI/GLO类蛋白具有很高的同源性,命名为CgGLO(登录号HM106984).实时荧光定量表达分析表明,CgGLO主要在第二轮花器官唇瓣和花瓣中表达,在萼片、子房和叶片中表达较少,在蕊柱和根中表达量最少,这种表达模式支持了van Tunen对ABC模型的修正,也显示了CgGLO基因可能在春兰花器官以及子房的形成过程中起着重要作用.  相似文献   

Role of exogenous phytohormones on growth and plumbagin accumulation in Plumbago indica hairy roots and conservation of elite root clones via synthetic seeds     

Moumita Gangopadhyay  Saikat DewanjeeDipjyoti Chakraborty  Sabita Bhattacharya 《Industrial Crops and Products》2011,33(2):445-450

The present study describes the role of different exogenous hormones on morphology and plumbagin production in Plumbago indica hairy roots. It was also aimed to conserve elite root clones via synthetic seed technology. Insertion of rolB gene in transformed roots was confirmed by polymerase chain reaction followed by southern blot analysis. Hairy roots were treated with single or in combination of different phytohormones viz. IAA, IBA, 2, 4-D, NAA, BAP, GA₃ and ABA. Cultures incubated with GA₃ (0.5 mg l⁻¹) yielded highest root growth due to formation of profuse lateral branching while NAA (0.5 mg l⁻¹) treatment caused highest plumbagin accumulation. Cultures incubated with 2, 4-D exhibited highest inhibitory effect in terms of both root growth and plumbagin production. All phytohormones were found to be effective at lower concentration. In combinatorial study, GA₃ + NAA (0.5 mg l⁻¹, each) was found optimum for root biomass and plumbagin production at earlier stage of culture. Different combinations of auxins and BAP induced different morphologies ranging from reduction of lateral branching to rapid disorganization of root matrix. The combinations of ABA and selected auxins were not found promising at any of selected concentration. Based on the effect of exogenous hormones on hairy root culture, elite root clones were selected and encapsulated with sodium alginate matrix. Uniform shaped alginate coated synthetic seeds were conserved up to 6 months exhibited high regeneration potential without disturbing plumbagin content.  相似文献