重组tHsp70对罗非鱼腹腔巨噬细胞免疫功能的影响   总被引：1，自引：0，他引：1  

陈明  王秋华  王瑞  甘西  李莉萍  雷爱莹  梁万文  黄维义 《中国水产科学》2012,19(1):145-153

利用酵母分泌表达的重组罗非鱼热休克蛋白70(heat shock protein 70 of tilapia,tHsp70),与海豚链球菌(Streptococcus iniae)抗原在体外非共价结合形成tHsp70-抗原复合物,通过对体外培养的腹腔巨噬细胞NO释放水平、吞噬活性及免疫相关基因表达进行检测,研究tHsp70对罗非鱼细胞免疫功能的影响。结果显示,tHsp70在体外能够与海豚链球菌菌体、胞外分泌物(extracellular bacteria products,ECP)结合形成tHsp70-抗原复合物;tHsp70-抗原复合物和tHsp70均可显著增强罗非鱼腹腔巨噬细胞的贴壁和生长、NO释放及吞噬活性(P<0.01),而ECP单独作用可引起腹腔巨噬细胞死亡,显著降低腹腔巨噬细胞NO释放(P<0.05),但tHsp70与ECP体外非共价结合后可减轻ECP对巨噬细胞的损伤;tHsp70-抗原复合物和tHsp70作用于腹腔巨噬细胞,白细胞介素8(IL-8),热休克蛋白70(HSP70),CXC趋化因子受体4(CXCR4)和颗粒蛋白前体(PGRN)4个基因的表达量均显著高于海豚链球菌抗原单独刺激和无刺激对照组(P<0.01)。研究表明tHsp70具有免疫增强和免疫佐剂的功能,为开发罗非鱼链球菌病Hsp70-肽疫苗提供了实验依据。  相似文献   

动物铁过负荷的临床和实验室诊断技术     

刘俊伟  葛亚明  银梅  王天有 《贵州农业科学》2009,37(5)

为动物铁过负荷建立简单、快捷的临床和实验室诊断技术,利用临床自然病例,采用病理解剖学、组织学和组织化学染色技术,对病猪及病犬的淋巴结、脾脏、肺脏、肝脏和肾脏进行了病理解剖学和组织病理学观察和研究.结果表明,随着铁过负荷的程度不同,富含巨噬细胞的淋巴结呈现出由棕黄色至棕褐色的不同色泽;在H.E染色的组织学标本中,可见巨噬细胞内含有数量不等的棕黄色含铁血黄素颗粒;在普鲁氏蓝染色的组织学标本中,含铁血黄素颗粒则呈蓝色.动物发生铁过负荷时,过剩的铁主要沉积在单核巨噬细胞系统的胞浆内,其次是肝细胞的胞浆内.  相似文献   

Identification of genes required for the fitness of Rhodococcus equi during the infection of mice via signature-tagged transposon mutagenesis     

Nuttapone SANGKANJANAVANICH  Tsutomu KAKUDA  Yasunori SUZUKI  Yukako SASAKI  Shinji TAKAI 《The Journal of veterinary medical science / the Japanese Society of Veterinary Science》2021,83(8):1182

Rhodococcus equi is a Gram-positive facultative intracellular bacterium that causes pyogranulomatous pneumonia in foals and immunocompromised people. In the present study, signature-tagged transposon mutagenesis was applied for the negative selection of R. equi mutants that cannot survive in vivo. Twenty-five distinguishable plasmid-transposon (plasposon) vectors by polymerase chain reaction (PCR), each containing a unique oligonucleotide tag, were constructed and used to select the transposon mutants that have in vivo fitness defects using a mouse systemic infection model. Of the 4,560 transposon mutants, 102 mutants were isolated via a real-time PCR-based screening as the mutants were unable to survive in the mouse model. Finally, 50 single transposon insertion sites were determined via the self-cloning strategy. The insertion of the transposon was seen on the virulence plasmid in 15 of the 50 mutants, whereas the remaining 35 mutants had the insertion of transposon on the chromosome. The chromosomal mutants contained transposon insertions in genes involved in cellular metabolism, DNA repair and recombination, gene regulation, non-ribosomal peptide synthesis, and unknown functions. Additionally, seven of the chromosomal mutants showed a reduced ability to multiply in the macrophages in vitro. In this study, we have identified several biosynthetic pathways as fitness factors associated with the growth within macrophages and survival in mice.  相似文献   

PCV2感染对猪肺泡巨噬细胞Fc受体数量和吞噬功能的影响   总被引：1，自引：1，他引：0  

周双海  赵东升  郭鑫  杨汉春 《北京农学院学报》2006,21(1):21-23

将猪圆环病毒2型(PCV2)BF株经口、鼻接种40日龄健康普通仔猪,在接种后不同时间宰杀,收集肺泡巨噬细胞(PAM),同时设立对照组。用EA花环试验测定Fc受体数目,用吞噬鸡红细胞试验测定吞噬功能,来分析PCV2感染对PAM某些生物学活性的影响。结果显示,PAM表面Fc受体数和吞噬鸡红细胞数的变化规律一致,与对照组相比,两者数量在接种后3 d时下降至最低,之后回升,14 d时基本恢复正常。本研究表明,PCV2感染可引起PAM吞噬和清除病原的能力出现短暂下降。  相似文献   

猪圆环病毒2型感染不会诱发猪肺泡巨噬细胞凋亡     

周双海  赵东升  杨汉春  郭鑫  司兴奎 《北京农学院学报》2006,21(4):37-39

将猪圆环病毒2型(PCV2)BF株经口、鼻接种40日龄健康普通仔猪,在接种后不同时相宰杀,收集肺泡巨噬细胞,用流式细胞术和琼脂糖凝胶电泳检测其凋亡现象,分析PCV2感染对猪肺泡巨噬细胞凋亡的影响。结果显示,在整个试验期内,与对照组相比,两种方法均未检测到攻毒组肺泡巨噬细胞出现凋亡上升现象,表明PCV2感染不会诱发猪肺泡巨噬细胞凋亡。  相似文献   

皮质醇对黄颡鱼头肾巨噬细胞呼吸爆发活动的影响   总被引：4，自引：1，他引：3  

刘小玲  葛海燕  田珍  顾泽茂  雷曼红 《华中农业大学学报》2008,27(6)

用Percoll连续密度梯度离心法分离黄颡鱼头肾巨噬细胞,经含0.1%牛血清的L-15培养液中培养,在光镜和电镜下观察其形态、超微结构和吞噬作用;采用硝基四氮唑蓝（NBT）与多孔酶标仪检测细胞在佛波豆蔻酸乙酯（PMA）刺激下产生的呼吸爆发,并观察外源皮质醇对黄颡鱼体内外头肾巨噬细胞呼吸爆发活动的影响。结果表明：每尾黄颡鱼可分离出1.2-1.6 mL浓度为1&#215;10^7cells/mL的高纯度头肾巨噬细胞;培养3-18 h后,贴壁纯化的头肾巨噬细胞达到95%-98%;分离培养的头肾巨噬细胞具有巨噬细胞的形态结构特征,对福尔马林灭活的金黄色葡萄球菌（F-SA）的吞噬率达95%以上。PMA刺激分离的头肾巨噬细胞产生显著的呼吸爆发活动。在较高浓度和较长作用时间情况下,外源皮质醇对黄颡鱼体内外头肾巨噬细胞的呼吸爆发均产生抑制作用。  相似文献   

韩延华教授运用内异止痛汤治疗子宫内膜异位症的临床经验          下载免费PDF全文

韩亚光  朱小琳  韩延华 《勤云标准版测试》2019,39(7):863-866

龙江韩氏妇科流派是全国首批64家中医流派传承工作室之一。韩氏第四代传人韩延华教授,是龙江韩氏妇科主要传人,韩延华教授根据多年的临床经验,认为子宫内膜异位症的病因虽然多样复杂,但病机最终归属于"瘀血内阻冲任胞宫",故在治疗上以活血化瘀为基本治疗原则,采用自拟经验方内异止痛汤,专用于治疗子宫内膜异位症,临床疗效满意。  相似文献   

重组真菌免疫调节蛋白对巨噬细胞RAW 264.7激活应答的研究     

高艳华  李奇璋  刘玲  郑雨璋  周选围 《上海交通大学学报(农业科学版)》2018,(4):53-58, 65

真菌免疫调节蛋白(fugal immunomodulatory proteins,FIPs)是一类从高等大型真菌中分离的、具有生物活性的小分子蛋白质。在之前的研究中,通过基因改组技术,对来自赤芝(Ganoderma lucidum)和紫芝(G.sinense)的FIP进行了重组改造,获得了具有333bp的FIP突变体FIP-SN15。本研究通过原核表达系统获得了重组FIP-SN15(rFIP-SN15),并利用荧光定量PCR(quantitative real-time PCR,qRT-PCR)技术在转录水平上对rFIP-SN15诱导巨噬细胞TNF-α的功能及其机制进行研究。结果表明,rFIP-SN15在原核表达系统中的产量约为35.31mg/L;rFIP-SN15处理细胞后,TNF-α的转录水平显著上调(P0.05),并且Akt的转录水平上调极其显著(P0.01)。此外,ARG1和mTOR的mRNA水平上调显著(P0.05)。因此,rFIPSN15能够激活小鼠腹腔巨噬细胞RAW 264.7。本研究为进一步验证FIP-SN15的生物学功能提供了有益的参考。  相似文献   

塑化剂DEHP暴露对小鼠巨噬细胞的免疫毒性作用     

韩佳萦  苏伊玲  熊丽  耿辉 《农业环境科学学报》2018,37(4):673-679

为了研究邻苯二甲酸二乙基己酯(DEHP)对巨噬细胞的免疫毒性,采用不同浓度剂量DEHP处理小鼠巨噬细胞株RAW264.7细胞和腹腔巨噬细胞,通过检测细胞吞噬、细胞因子分泌及活性氧水平变化探讨DEHP暴露对免疫系统的毒性作用。结果表明:高浓度(20、40、80 mg·L-1)DEHP处理48 h后对RAW264.7细胞可造成急性损伤。低浓度(1、5、10 mg·L-1)DEHP连续染毒处理10代后,RAW264.7细胞吞噬红细胞百分率及吞噬指数显著抑制(P0.05)。RAW264.7细胞分泌TNF-α、IL-12和IL-23等细胞因子能力明显降低,并表现出一定的剂量-效应关系。随着DEHP暴露浓度的增加,DEHP染毒造成RAW264.7细胞内活性氧产生,受损加剧。除此之外,DEHP暴露还能明显抑制小鼠腹腔巨噬细胞对红细胞的吞噬能力(P0.05)。以上结果表明,DEHP暴露对巨噬细胞具有免疫抑制作用,损伤了巨噬细胞正常免疫功能发挥。  相似文献   

大豆卵磷脂增强免疫活性的研究   总被引：1，自引：0，他引：1  

马挺军秦晓健  贾昌喜 《中国农学通报》2010,26(15):97-99

为了研究大豆卵磷脂对机体免疫作用,进行了不同剂量大豆卵磷脂对小鼠脾指数、巨噬细胞吞噬能力和溶血素产生能力的试验。结果表明：大豆卵磷脂能显著提高巨噬细胞吞噬能力和溶血素产生能力。大豆卵磷脂具有增强免疫的作用。  相似文献