circRNA-Zfp609对C2C12成肌细胞增殖和分化的影响     

刘壮  何茹月  曹洋  李村院  张云峰  胡圣伟 《中国畜牧兽医》2022,49(12):4535-4544

【目的】试验旨在探究circRNA-Zfp609调节C2C12成肌细胞增殖和分化的潜在分子机制。【方法】利用RT-PCR和测序分析小鼠骨骼肌组织和C2C12成肌细胞中circRNA-Zfp609的表达,实时荧光定量PCR检测小鼠心脏、肝脏、脾脏、肺脏、肾脏、胃、小肠、骨骼肌组织及增殖12、24、36、48 h和分化0、1、3、5 d的C2C12成肌细胞中circRNA-Zfp609的相对表达量;实时荧光定量PCR检测分化0、1、3、5 d的C2C12成肌细胞中肌细胞生成素（MyoG）和肌球蛋白重链（MyHC）的相对表达量。用circRNA-Zfp609的干扰表达载体（siRNA）干扰细胞,通过CCK-8测定siRNA对C2C12成肌细胞增殖率的影响;用实时荧光定量PCR检测siRNA干扰对circRNA-Zfp609、MyoG和MyHC相对表达量的影响。通过TargetScan 7.0和miRDB软件预测circRNA-Zfp609上与肌肉分化相关的miRNA位点,将筛选的miRNAs的过表达载体转染HEK293T细胞,利用双荧光素酶报告试验验证circRNA-Zfp609与miRNA的互作关系。根据miRNAs对circRNA-Zfp609的互作,构建circRNA-Zfp609的野生型和突变型载体并转染HEK293T细胞,利用双荧光素酶报告试验验证circRNA-Zfp609对miRNA的靶向关系。【结果】PCR和测序结果表明,小鼠骨骼肌中可表达circRNA-Zfp609;circRNA-Zfp609在小鼠骨骼肌中表达水平最高,在其他组织中的表达量由高到低依次是肾脏、肺脏、心脏、肝脏、胃、脾脏和小肠。与12 h相比,在C2C12成肌细胞增殖的36和48 h circRNA-Zfp609的相对表达量显著增加（P<0.05）;与分化第0天相比,在C2C12成肌细胞分化的第1、3和5天circRNA-Zfp609的相对表达量均显著增加（P<0.05）,MyoG、MyHC的相对表达量均极显著增加（P<0.01）。与NC组相比,siRNA组C2C12成肌细胞的增殖率和circRNA-Zfp609相对表达量均极显著降低（P<0.01）,MyoG和MyHC的相对表达量显著降低（P<0.05）。circRNA-Zfp609上有miR-150-5p、miR-327、miR-344g-3p和miR-615-5p 4种与肌肉分化相关的miRNAs。circRNA-Zfp609与miR-615-5p的吸附能力最强,具有靶向结合作用。circRNA-Zfp609可以作为分子海绵与调控肌肉分化相关的miR-615-5p相互作用。【结论】circRNA-Zfp609在小鼠的组织中广泛表达,在骨骼肌中表达水平最高;circRNA-Zfp609在C2C12成肌细胞增殖和分化的不同时期差异表达,circRNA-Zfp609上有4个与肌肉分化相关的miRNAs,其中miR-615-5p与circRNA-Zfp609具有靶向关系。本研究结果可为与家畜骨骼肌生长发育相关的研究提供参考。  相似文献   

藏绵羊KLF7基因表达特征分析及其过表达对前脂肪细胞增殖分化的影响     

张雪萍  石斌刚  金夏阳  王向彦  兰丽娟  时钰  祁有鹏  赵世杰  李少斌  胡江 《中国畜牧兽医》2022,49(8):2920-2930

【目的】分析藏绵羊Krüppel样因子7(Krüppel-like factor 7,KLF7)基因表达特征,研究过表达该基因对前脂肪细胞增殖及分化的影响。【方法】从藏绵羊脂肪组织中分离前脂肪细胞进行培养及成脂诱导,应用实时荧光定量PCR技术检测KLF7基因在藏绵羊7个组织(大脑、皮下脂肪、肾脏、背最长肌、瘤胃、睾丸和回肠)和前脂肪细胞不同分化阶段(第0、2、4和8天)的mRNA相对表达水平;应用RT-PCR方法从藏绵羊脂肪组织中扩增KLF7基因CDS区序列,并将其连接到pcDNA3.1(+)真核表达载体获得pcDNA3.1-KLF7过表达质粒,转染前脂肪细胞;应用实时荧光定量PCR方法检测脂肪细胞增殖及分化标志基因mRNA表达水平;采用EdU和CCK-8方法分别检测过表达KLF7基因对EdU阳性细胞数和细胞活力的影响;采用油红O染色检测过表达KLF7基因后脂肪细胞脂滴生成量。【结果】KLF7基因在藏绵羊7个组织中均有表达,其中在大脑中的表达量最高,其次为皮下脂肪和肾脏,均显著高于其他组织(P<0.05);诱导分化第2、4和8天脂肪细胞mRNA表达量均显著高于分化前(P＜0.05),且分化第2天表达量最高;pcDNA3.1-KLF7过表达质粒转染前脂肪细胞2 d后显著或极显著抑制增殖标志基因CDK4、CyclinB1和CyclinD1的表达水平(P＜0.05;P＜0.01),极显著降低细胞活力及EdU阳性细胞数量(P＜0.01);pcDNA3.1-KLF7过表达质粒转染前脂肪细胞,诱导分化8 d后,脂肪细胞分化标志基因PPARγ、Glut4和ELOVL6的mRNA相对表达水平显著或极显著下调(P＜0.05;P＜0.01),且脂质沉积极显著减少(P＜0.01),表明过表达KLF7基因可抑制藏绵羊前脂肪细胞增殖及分化。【结论】KLF7基因在藏绵羊多个组织中广泛表达,且大脑、皮下脂肪、肾脏中表达量较高;诱导分化后脂肪细胞表达量显著高于分化前,且分化第2天表达量最高;过表达KLF7基因可抑制藏绵羊前脂肪细胞的增殖及分化。试验结果为阐明藏绵羊脂肪沉积的分子调控机制提供了基础数据。  相似文献   

沙棘木蠹蛾综合控制技术研究   总被引：6，自引：0，他引：6  

骆有庆  宗世祥  许志春  张金桐  路常宽  张连生 《林业科学》2007,43(11):146-150

沙棘木蠹蛾是近几年在我国内蒙古、辽宁、山西、宁夏、陕西和甘肃等地大面积成灾的一种钻蛀性害虫,主要以幼虫危害沙棘的根部和干部.由于该虫以前从未大面积发生危害,相关的研究报道较少.笔者从沙棘木蠹蛾的成灾原因、生物生态学特性、可供监测和防治的性引诱剂,以及天敌种类和自然控制效果等方面进行了较全面的研究,取得了重要研究成果.  相似文献   

板栗花器分化发育期气候因子对其产量形成的影响     

陈顺伟  童修耀 《浙江林业科技》1995,15(3):30-41

利用淳安县１９７３～１９９２年板栗产量和相应的气象资料，就板栗花器分化期一系列气象因子变他对其产量形成的作用显著性及其丰歉年景作用权重作分析研究。结果表明，４月和５月日照时数、越冬极端最低温度、５～６月降水量是影响气象产量的关键因子，此４因素对气象产量的作用权重占年总气象产量的７５．５５％～９４．４５％，在此基用上进一步提出了该县板栗产量模式及丰产建议。  相似文献   

胎里红柿早期丰产栽培技术     

王建斌 《河北林果研究》2004,19(3):246-248

胎里红柿早期丰产栽培技术要点为，施足基肥，大穴栽植；科学施用肥、水，冬、夏剪相结合，调控营养生长与生殖生长；使用生长调节剂及各种农业技术措施促花和提高坐果率，科学防治病虫害等。  相似文献   

板栗雌花分化相关影响因素研究进展   总被引：1，自引：0，他引：1  

吕明亮  东建敏  陈顺伟 《浙江林业科技》2007,27(2):77-80

板栗雌花数量少是其高产的主要限制因子之一,本文概述了近年来我国在板栗雌花分化的主要影响因素中的品种、树龄、密度、C/N、N、P、K营养及植物生长调节剂、整形修剪等方面的研究进展,并提出了选育优良板栗品种,辅以相应管理技术,实现板栗高产高效栽培的建议。  相似文献   

影响非洲菊离体培养器官分化的因素   总被引：9，自引：0，他引：9  

郑秀芳  王桔红  李名扬 《江苏林业科技》2002,29(1):29-31

采用非洲菊的 4个不同切花品种 ,主要通过对花托外植体进行离体培养 ,从基因型、激素组合、基本培养基、蔗糖质量浓度等方面研究了非洲菊器官形成的规律。结果表明 :幼小的花托是非洲菊最适宜培养的外植体。虽然品种之间存在着差异 ,但在 2个月内均能从愈伤组织上直接产生不定芽。芽的产生以IAA 0 1mg/L及BA 10mg/L为最佳激素配比 ,而基本培养基诱导芽分化的效果是B5>1/ 2MS >MS ,1%蔗糖较之高质量分数蔗糖更有利于芽的分化。  相似文献   

生长素对植物维管分化的信号诱导作用   总被引：1，自引：0，他引：1  

王丰  程方民 《江苏林业科技》2004,31(1):40-44

植物维管系统与植物生长发育关系密切，维管组织的分化机制也因此倍受关注。生长素可诱导植物维管组织分化，它根据自身浓度的高低产生系列信号，从而通过这些信号来控制其所在部位及其周围区域维管组织的分化状况。该文重点论述了生长素在细胞间的极性运输方式及其信号转导途径、生长素对维管组织分化的信号诱导作用及其表现特征，以及生长素诱导植物维管组织分化的分子机理。  相似文献   

天然红松种群遗传多样性和遗传分化的研究     

冯富娟  韩士杰  王洪梅 《林业研究》2006,17(1)

ISSR是一种特异性较强、稳定性较高的分子标记方法。本研究采用ISSR-PCR技术,检测了红松(PinuskoraiensisSieb.etZucc)在伊春市汤旺河高峰林场、长白山二道白河、黑河胜山林场和俄罗斯海参崴市郊的四个种群的遗传多样性和遗传分化。15个引物的扩增结果表明:红松群体的多态位点比率是60.70%,平均每个引物3.6个多态位点,多样性水平在松科植物中是较高的;红松分布中心区的遗传多样性要高于边界区;和大多数木本植物一致,红松群体的基因多样性主要来自种群内部,占总基因多样性的73%;红松四个种群的遗传距离和地理距离之间无正相关性。根据研究结果推测,天然红松分布区逐渐缩小的原因不是由于遗传多样性水平过低引起的,而是由于人类的破坏作用,再加上火灾和风倒等因素造成的。  相似文献   

樟子松成熟胚的离体培养与不定芽的形成     

康明  田建强  郑均宝 《河北林果研究》1993,(4)

沙藏45d的樟子松种子,剥胚培养在5个系列17种培养基上.在6BA0.2～2.0(mg/L,单位下同)+NAA0.05～0.5以及6BA1.0+IAA0.2～0.5的激素配比范围内,可诱导胚形成不定芽.KT与NAA或IAA配合时无不定芽形成.不定芽分化部位明显受激素种类控制,6BA与NAA配合可诱导胚轴分化出不定芽,而6BA与IAA配合,则可从子叶顶端和基部诱导出不定芽。  相似文献