成年小鼠雄性生殖细胞的冷冻保存   总被引：1，自引：0，他引：1  

李莲军  阮承迈  张锐  李德雪  文兴豪  张学明  岳占碰  于卫东 《中国兽医学报》2002,22(4):339-340

在含10％小牛血清（NBS）的DMEM培养基中，分别各添加5％，10％，15％，20％和25％的二甲基亚砜（DMSO）,丙二醇（PG），乙二醇（EG）和甘油（G），对成年小鼠睾丸生殖细胞冷冻保存；复苏后台盼蓝染色测定细胞复苏率。结果显示，5％－25％DMSO冻存液组的细胞复苏率分别为88.5%,88.0%,65.6%及51.3%;5%-25%PG冻存液组的细胞复苏率分别为87.2%,86.4%,79.0%,73.4%及40.1%.;5%-25%EG冻存液组的细胞复苏率分别为6.6%,80.9%,60.8%,51.3%及30.0%;5%-25%G冻存液组的细胞复苏率分别为86．5％，86．3％，65．3％，36．0％及31．4％。其中各抗冻剂5％和10％组的细胞复苏率最高，与15％组相比均存在显著或极显著差异。4种抗冻剂的最高细胞复苏率之间无显著差异。DMSO，PG，EG和G分别冷冻保存成年小鼠睾丸生殖细胞对的最小损失率分别为4．8％，6．1％，6．7％，6．8％。结果表明，采用慢速冷冻时，DMSO，PG，EG及G均适宜用作成年小鼠睾丸生殖细胞的抗冷冻剂，最佳使用含量均为5％－10％。成年小鼠睾丸生殖细胞分别在含5％－10％的DMSO，PG，EG和G的DMEM（含10％NBS）冻存液中，2步慢速降温，液氮储存，37℃水浴复苏，是一种具有较高复苏率的冷冻保存方法。  相似文献   

In vitro conservation of tropical plant germplasm — a review     

F. Engelmann 《Euphytica》1991,57(3):227-243

Summary In vitro medium term conservation of tropical plant germplasm is used routinely in many laboratories. Growth reduction is achieved by modifying various parameters, such as temperature, culture medium, gaseous environment. For long term conservation, cryopreservation (i.e. storage in liquid nitrogen, –196°C) is the only current method available. Each successive step of the process requires precise conditions which have to be defined for each material. Cryopreservation protocols have been set up for more than 40 tropical species. Results obtained with various culture systems such as cell suspensions, protoplasts, calluses, meristems and embryos are discussed. The first example of the large scale application of cryopreservation (oil palm somatic embryos) is presented.  相似文献   

Cryopreservation of pollen from two rose cultivars     

R. Marchant  J. B. Power  M. R. Davey  J. M. Chartier-Hollis  P. T. Lynch 《Euphytica》1992,66(3):235-241

Summary An investigation was undertaken on the storage characteristics of pollen collected from two English rose cultivars. A rapid decline in viability was observed in pollen stored at +4° C and –20° C, whereas the viability of pollen, stored at ultra-low temperature (–196° C), remained constant. Cryopreserved pollen was shown to retain its ability for fertilisation. The effects of the stage of flower development and anther dehiscence were assessed on both pre-and post-cryopreservation viabilities. Successful long-term storage of pollen will facilitate hybridisation of rose species and cultivars that do not flower synchronously.  相似文献   

用冻干精子生产ICSI小鼠   总被引：1，自引：0，他引：1  

朱锦亮  严阿勇  陈学进  苟克勉 《农业生物技术学报》2007,15(1):177-178

前期研究中，我们采用小鼠卵母细胞胞浆内精子注射（ICSI）技术，成功地用新鲜精子获得了生理健康的ICSI小鼠。在此基础上，本文结合细胞冻干技术，进行了冻干精子ICSI生产试管小鼠的尝试。B6D2F1成年公鼠的精子在Tris-HCl-EDTA（pH8.2）溶液中冻干4 h后解冻，将其精子头注入到KM小鼠成熟卵母细胞的胞质中。6 h后，83.0%的卵子受精。用CZB溶液体外培养发现，冻干精子生产的胚胎，体外发育至2-C (92.0% vs 99.5%)、4-C（52.7% vs 97.2%）、桑椹胚（36.6% vs 86.3%）和囊胚的比例（21.4% vs 68.7%）极显著地（p<0.01）低于新鲜精子生产的ICSI胚胎。移植2-C期冻干精子ICSI胚胎检测体内发育，结果发现，D10的着床率为63.0%（17/27）；胎鼠的出生比例为21.7%（13/60），这些ICSI小鼠成年后的生理和生殖能力正常。试验结果说明，精子冻干后，仍能生产ICSI动物，冻干技术可以用于哺乳动物精子的保存。  相似文献   

猪胚胎冷冻保存技术     

桑国俊  贺奋义 《广西农业生物科学》2006,25(Z1):156-161

猪的胚胎移植技术应用面较小,但由于猪的生长周期短,商品化程度高,许多生产性能暂时与社会需求不符的猪种已经消失或濒临灭绝,在活体保种很难实施的情况下,实施胚胎保种是一种选择.本文论述了猪的胚胎保存技术方法和目前的进展情况,以作为利用胚胎距离移植技术实施猪种保种和长距离引种工作的参考,从而能与大家一道共同推进本项研究工作.  相似文献   

牛精子体外获能前后元素变化的研究     

冯怀亮  刘建民 《中国农业科学》1993,26(2):63-70

 本文应用x射线能谱技术，对获能前后精子质膜表面（头部、中段）和内部（顶体内、中段线粒体内）的元素进行了分析测试。结果表明，牛精子用肝素+咖啡因体外获能后，头部、中段质膜表面的Na、Al、S、K含量升高，Cl、Ca含量降低；顶体内Na、Mg、Si、P和Fe含量降低，而Ca、K、Cl和S含量升高；精子中段线粒体内Na、P、Si、Cl和Ca升高，而Mg、S、K和Fe却降低。获能过程中精子顶体内Na/Ca、Na/K、Cl/Ca、Cl/K和Na/Cl的浓度比分别为42.13、12.43、15.36、45.31和2.74；而摩尔比又分别为73.42、21.13、17.37、4.99和4.23。本文并对可能的获能机理进行了讨论。  相似文献   

葡萄双受精过程的形态学观察     

孙善英  马玉英  和纯成 《西北农林科技大学学报(自然科学版)》1986,(4):60-66

观察了葡萄双受精过程中雌雄性核的融合。结果表明:花粉管通过珠孔穿入退化助细胞,释放出二精子;精子核接近并贴附在卵核和次生核上,二者核膜融合,精核沉入卵核及次生核,染色质松解,并与雌性核染色质融合,出现雄性核仁,两性核仁融合,形成合子及初生胚乳核。卵核完成受精较次生核晚。受精属有丝分裂前型。精核进入卵核前看到了它的核仁。少数胚囊具有两套卵器。  相似文献   

4℃平衡时间对PCK细胞低温保存的影响(英文)     

陈少鹏  杨先乐  瞿小英  黄艳平  芮行知 《上海水产大学学报》2003,(Z1)

主要阐述了在以二甲亚砜为抗冻剂,不同的4℃平衡时间对PCK细胞低温保存的影响。把第24代PCK细胞悬浮于含10％二甲亚砜(DMSO)的冻存保护液,置于4℃冰箱,按不同的时间间隔取出细胞,重新培养,用来研究不同的平衡时间对细胞的贴壁率及生长的影响。将19代PCK细胞,按40min、1h、2h三种不同的4℃平衡时间进行-700℃冻存,再以较低的细胞密度(2×10~4个/mL)复苏细胞,用以研究不同的平衡时间对细胞冻存的复苏率及形态学的影响。结果表明,较长时间放置在4℃,DMSO的毒副作用明显,不利于细胞的生长。同直接传代的细胞相比,放置24h以上明显影响细胞的贴壁率及单层形成时间。在PCK细胞的-70℃保存中,4℃下平衡40min,DMSO不能对细胞形成充分的保护,细胞碎片较多;平衡2h以上,DMSO有影响了细胞对低温伤害的抵御能力,同样不利于细胞的冻存;平衡1h,细胞复苏及生长情况最佳。  相似文献   

家兔精子体外获能与体外受精试验   总被引：4，自引：0，他引：4  

徐君  钱菊芬  张涌 《西北农林科技大学学报(自然科学版)》1990,(1):19-24

本试验目的在于建立一种简便而有效的系统,能使家兔射出的精子完成体外获能,并获得体外受精、早期卵裂和正常产仔。精子体外获能采用三种方法:A.HIS(15min)+DM(1～2h);B.HIS(15min)+DM(11～12h);C.m-HIS(15min)+m-DM(2～4h)。经上述方法处理的精子与512枚输卵管卵母细胞进行体外受精和体外培养的结果表明,A组的受精和早期卵裂发育延迟;B组的受精卵大都停留在原核期;C组的受精和早期卵裂发育正常。将C组60枚2-4细胞移植至9只受体兔,5只妊娠,其中2只产4只试管仔兔,另外3只获得12个胎儿。  相似文献   

不同品系小鼠精子冷冻及冻融精子体外受精的研究   总被引：6，自引：1，他引：6  

陆晔  唐一岷  刘丽均  谢恩  薛智谋  徐平 《上海交通大学学报(农业科学版)》2003,21(Z1):6-9

采用小鼠精子冷冻、冻融精子体外受精的方法,进行小鼠保种、引种、生物净化及品系标准化的可行性研究,并初步探究小鼠精子冷冻的影响因素。实验选用同一年龄5种不同品系小鼠分别进行精子冷冻、复苏,并比较各品系冷冻效果及冻融精子的体外受精(IVF)率。结果显示,冷冻后各品系小鼠精子复苏存活率约在15%～50%之间;冻融小鼠精子体外受精结果随遗传背景的不同差异显著,受精率分别为:KM小鼠68.4%、ICR小鼠30.3%、DBA/2J小鼠47.2%、C57BL/6J小鼠6.8%、BALB/cA小鼠25%。冻融精子IVF得到的胚胎可以耐受体外培养。  相似文献