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《中国兽医学报》2015,(4):558-564
根据大鲵蛙病毒(Chinese giant salamander ranavirus,CGSRV)主要核衣壳蛋白MCP编码基因的序列设计合成4条特异性引物,以重组pMD19-T-MCP质粒为模板,通过反应条件与反应体系优化,建立CGSRV的环介导等温扩增(LAMP)检测方法,测定LAMP对CGSRV的最低检测限,并与巢式PCR和普通PCR进行比较。结果表明,该LAMP方法最佳反应温度为62℃,反应时间为40min,对CGSRV最低检测限5copies/μL,而巢氏PCR和常规PCR的检测限为50和5×103copies/μL,表明该LAMP方法的灵敏度显著高于巢氏PCR和常规PCR;且与淋巴囊肿病毒、鲫鱼出血病疱疹病毒2型、云斑尖塘鳢虹彩病毒、鳜鱼传染性脾肾坏死病毒、迟钝爱德华菌、嗜水气单胞菌和维氏气单胞菌等均无交叉反应;反应结束后加入荧光染料EtBr可肉眼判定粉色为阳性,而棕色则为阴性。因此,该方法对CGSRV的检测较巢氏PCR和常规PCR更为简便、快速、灵敏、特异,且不需昂贵仪器设备,更适合养殖现场检测,为CGSRV早期感染的快速检测提供了新方法。 相似文献
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十月中旬,本刊记者来到烟台、威海苹果产区采访,走访了解今年苹果生产和入库保鲜情况。蓬莱、栖霞等地的贮藏企业,从冷库内取出富士苹果让我们品尝,果实酸甜适口,脆而多汁,外观光亮,非常新鲜。大家纷纷称赞他们今年收购的苹果质量好。后来企业告诉我们,这些苹果是去年贮藏的。企业介 相似文献
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肌醇(inositol)又名肌糖、环己六醇。肌醇作为一种维持动物生理功能必需的营养素,被广泛的应用于鱼、虾等水产养殖中。目前国内许多大型饲料企业将肌醇作为营养型饲料添加剂加到水产饲料中。许多研究表明,动物体内,尤其是水产动物体内缺乏肌醇时,会对正常的生长造成极大的伤害。 相似文献
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采用逆转录-重组酶介导等温核酸扩增技术(RT-RAA)和成簇的规律间隔的短回文重复序列(CRISPR)检测系统,建立一种快速、高灵敏度和高特异性的禽流感病毒(AIV)H5亚型核酸检测新方法。通过分析342条禽流感病毒H5亚型的HA基因序列,选取保守性区域设计具有强特异性的CRISPR RNA(crRNA)序列以及RT-RAA引物,并对检测体系中的主要成分LwaCas13a蛋白、crRNA、TaqMan探针、T7 RNA Polymerase、NTP Buffer Mix含量进行优化,建立了基于RT-RAA的AIV H5亚型核酸CRISPR-Cas13a检测方法。取105~1 copies·μL-1含有目的基因的质粒标准品和其他亚型禽流感病毒以及其他禽病病毒分别验证和评价该方法的灵敏性和特异性。结果表明,本文设计的RT-RAA引物与crRNA特异且灵敏,其最佳反应体系中主要成分用量分别为LwaCas13a蛋白(60μg·mL-1)2.0μL、crRNA(100μmol·L-1)3.2μL、TaqMan... 相似文献
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《山东省农业管理干部学院学报》2016,(8):157-158
NTHK1基因是一种乙烯受体基因,由烟草中克隆而来。NTHK1能被Na Cl和PEG诱导,也能被机械损伤,说明其可能在盐和干旱的信号传递中有一定作用。所以,NTHK1可能与多种逆境胁迫有一定的关联。由于NTHK1基因在大豆中的作用还不明确,为了让其在大豆转基因育种中得到更好地应用,需要在大豆的种植中验证其功能。本文将以农杆菌介导法为基础,以大豆为实验对象,对NTHK1基因的功能及其遗传转化进行研究分析。 相似文献
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核酸探针技术通过分析病原生物的遗传结构。根据这段基因结构的序列,就可以设计可与其互补的DNA探针,与病原生物的DNA进行杂交,以此来确定病原携带者和传播者的分子生物学技术。该技术具有灵敏度高、特异性强等优点,近年来在对虾病毒病的检测中倍受青睐。 相似文献
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以江苏环太湖国际旅游区规划为实验对象,重点探讨生态景观吸引力空间异化过程,即从要素磁场分化开始,经由同质景观间的引力异化,导致同类景观片区间的引力空间异化,最终推导出另一种"同质相斥、异质相吸"的新型生态景观吸引力空间结构。 相似文献