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通过水生动物源性嗜水气单胞菌(Aeromonas hydrophila,Ah)强毒株J-1株与弱毒株MR-1株抑制差减杂交得到gneJ差减片段,该片段与创伤弧菌(Vibrio vulnificus)和人源嗜水气单胞菌的UDP-乙酰葡萄糖胺-4差向异构酶基因有较高的同源性。扩增完整的gneJ基因,进行分布检测并将其克隆至质粒pET32a(+),在大肠杆菌(Escherichia coli)BL21中进行异源表达,SDS-PAGE结果显示,重组表达蛋白的分子量约59.7kD,与理论推测值基本相同。酶活性分析表明,该重组蛋白可将UDP-乙酰葡萄糖胺转化为UDP-乙酰半乳糖胺,确证gneJ基因编码蛋白为UDP-乙酰葡萄糖胺-4-差向异构酶。Western Blot分析显示,嗜水气单胞菌J-1株胞外产物的兔抗血清可识别该重组蛋白,表明该蛋白与天然蛋白有相同的抗原性。以重组蛋白为免疫原,对小鼠进行动物保护实验,结果显示,该重组蛋白对小鼠有60%的保护率,证明UDP-乙酰葡萄糖胺-4差向异构酶可作为亚单位疫苗的侯选成分。 相似文献
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2007~2008年期间,厦门共有32批次蔬菜因未能通过日方质检而导致输日受阻。哪些因素导致了蔬菜的质量问题?质检不合格的原因在哪里?如何使出口蔬菜顺利跨越技术壁垒? 相似文献
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以没食子酰基为功能基团,以改性纤维素为骨架合成功能高分子材料没食子酰化改性纤维素(没食子酰基-1,6-己二亚胺基-羟丙基-纤维素,CG):先将纤维素与环氧氯丙烷反应,然后依次接上己二胺桥链和三乙酰基没食子酰基,最后将没食子酰基脱去乙酰基得到目标产物。功能试验表明,1g产物能结合明胶49.5mg,并可再生使用。1g产物络合金属离子的能力:Fe3 53.4mg,Cu2 38.7mg,Hg2 46.5mg,Mn2 6.8mg,Zn2 27.9mg,Pb2 57.2mg。产物在稀酸、稀碱、稀醇和热水中具有稳定性。 相似文献
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桑天牛羧酸酯酶和谷胱甘肽S—转移酶与杨树次生代谢物质相关性研究 总被引:7,自引:0,他引:7
对取食8种杨树的桑天牛幼虫羧酯酯酶和谷胱甘肽S-转移酶活力进行了测定,证实取食不同杨树的桑天牛幼虫羧酸酯酶和谷胱甘肽S-转移酶活力存在显著差异。采用高效液相色谱法对8种杨树的14种次生代谢物质含量进行了测定,经聚类分析将8种杨树分为2类:加拿大杨、I-214杨、北京杨、J-2杨、J-1杨、山海关杨为一类,毛白杨、新疆杨为另一类。对羧酸酯酶和谷胱甘肽S-转移酶活力与杨树次生代谢物质进行了逐步回归分析,逐步回归方程表明,杨树丁香酸、绿原酸含量高,苯酚、对羟基苯甲酸含量降低,则羧酸酯酶活力会较高;杨树苯酚含量增高,阿魏酸含量降低,则谷胱甘肽S-转移酶活力会较高。 相似文献
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4 香豆酸 :CoA连接酶 (4CL)是木质素生物合成过程中重要的酶 .该文利用简并寡核苷酸PCR法结合cDNA末端快速扩增PCR法直接获得了紫穗槐 4CLAcDNA全长序列 ,避免了复杂的构建、筛选cDNA文库的过程 .先用简并PCR得到了 4CLA1片段 ,又据此片段设计反向嵌套引物 ,用RACE方法获得未知的 5′和 3′端序列 .所获得的全长 4CLAcDNA ,编码 5 40个氨基酸 .氨基酸序列同源性分析表明4CLA是典型的 4CL蛋白 ,含有预计的AMP binding位点、催化反应区和保守的Cys . 相似文献
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LU Xin-xing YANG Jin-li WANG Hai-rong WANG Gui-chao GAO Ai-wu ZHANG Li-min HOU Xian-zhi 《中国畜牧兽医》2015,42(12):3202-3209
To study the effect of nutrient restriction and compensation on weight,serum indexes and gene expression of chest fat adipokine in Mongolian lamb,thirty male lambs were randomly divided into control group (20.26 kg± 3.63 kg) and feed restricted group (21.29 kg±3.00 kg).The experiment lasted for 120 days,including 60 days for feed restriction and 60 days for compensatory feed.At the end of each stage,five lambs from each group were slaughtered and chest fat was collected.Serum concentration of triglycerides,non-esterified fatty acids (NEFA),total cholesterol were measured.Quantitative Real-time PCR were used to determine Adiponectin,Visfatin,PPAR-γ and ACC genes expression.The results showed that:①The lamb body weight of restricted group kept maintain level and that of control group showed a increase tendency.During the compensatory period,the average daily gain (ADG) of restricted group was significantly higher than control group (P< 0.05).②During the restriction period,serum triglycerides concentration of lambs in restricted group was significantly decreased at day 30 and 60 (P< 0.05),and NEFA concentration was significantly increased at day 30 (P< 0.05).After 60 days of nutritional compensation,all serum parameters we tested were not significantly different between restrict group and control group (P >0.05).③During the restriction period,PPAR-γ and ACC gene expression in restricted group were significantly lower than that of control group (P< 0.05),while no significant differences were found during the compensation period (P>0.05).Adiponectin and Visfatin genes expression in chest fat was not significantly changed throughout the experiment (P >0.05).We could know that nutritional restriction reduced fatty acid synthesis and adipocyte differentiation ability,adipose tissue was mobilized energy metabolism,and total cholesterol was recoveried growth on the compensation.However,the ACC and PPAR-γ genes in restricted group were significantly decreased with the body weight increased rapidly during the compensatory stage.Adiponectin and Visfatin were not significantly different between restricted and compensatory stages. 相似文献