Prd29A启动子在小麦中的诱导表达活性及大肠杆菌海藻糖合成酶基因的转化   总被引：1，自引：0，他引：1  

康旭升  刘立科  刘根齐  侯宁  戴秀玉  刘春光 《农业生物技术学报》2007,15(3):434-438

以gus基因为报告基因，通过瞬时表达测定了Prd29A诱导型启动子在小麦愈伤组织中的诱导表达活性。结果表明，Prd29A-gus基因的表达水平可在不同浓度NaCl盐的胁迫条件下得到显著提高。由此证实，Prd29A启动子在小麦中具有较强的诱导表达活性。在此基础上，将Prd29A诱导型启动子驱动下的大肠杆菌海藻糖合成酶基因（otsA）采用花粉管途径导入目的小麦品系，经PCR筛选、Southern鉴定及转化后代海藻糖含量的测定，获得了一批otsA转基因植株及株系，为进一步选育耐盐抗旱的转基因小麦新品系奠定了基础．  相似文献   

加强Psy基因表达和通过RNAi抑制Lcy基因表达的载体构建     

万群  张兴国  宋明  苏承刚 《农业生物技术学报》2007,15(3):477-481

通过基因工程手段加强八氢番茄红素合成酶（Psy）基因的表达和通过RNAi抑制番茄红素β-环化酶（Lcy）基因（该基因是调控番茄红素转化为其他类胡萝卜素的主要的基因）的表达是培育高番茄红素品种的重要手段之一。根据GenBank中拟南芥的Psy基因序列（NM-121729），通过聚合酶链式反应（PCR）从拟南芥的cDNA中扩增出了长1296的Psy基因。根据GenBank中番茄的Lcy基因序列（X86452）和Pds启动子序列（U46919）分别设计特异引物从番茄中扩增出了Lcy基因的高度保守的长302bp的DNA片段和长1790的Pds启动子片段。根据RNAi的原理，将Lcy基因的长302bp的DNA片段以正反两个方向通过一段内含子序列连接在一起形成RNAi片段插入到抗Kan的pVCT2020的表达载体中，并通过具有果实特异性特点的启动子——八氢番茄红素去饱和酶基因（Pds）启动子控制该干扰片段的表达，同时将Psy基因在Pds启动子调控下插入到同一载体中，从而构建成了能同时加强Psy基因的表达和抑制Lcy基因表达的植物表达载体。  相似文献   

新牧1号苜蓿抗逆相关基因MvNHX1启动子表达载体的构建     

代文俊  朱彦卓  晁朝霞  任燕萍 《湖南农业科学》2015,(1):4-5

为了进一步研究新牧1号苜蓿抗逆相关基因MvNHX1启动子的功能,采用双酶切的方法,用核酸内切酶SacⅠ和NcoⅠ分别双酶切pCAMBIA1304质粒和阳性重组质粒pEASY-T1-simple-pMvNHX1,然后回收目的片段。通过T4DNA连接酶将目的片段和空载体相连后获得连接产物。将连接产物导入到宿主菌DH5α,通过画板,卡那霉素筛选后挑单菌落摇菌。然后用菌液PCR及双酶切鉴定该载体后,用冻融法将其导入农杆菌EHA105。结果表明,成功培养出含有抗逆相关基因MvNHX1启动子pMvNHX1∶GUS∶EHA105的菌落;成功构建出新的植物表达载体pMvNHX1∶GUS。  相似文献   

小麦及其近缘物种中类燕麦储藏蛋白Avenin-like基因的克隆综述     

孙杨柳 《安徽农业科学》2015,(8):40-42

介绍了小麦的品质及品质的形成、小麦的储藏蛋白及储藏蛋白的分类.综述了近年来关于类燕麦储藏蛋白Avenin-like基因发现、Avenin-like基因的胚乳特异性表达的时空表达模式以及Avenin-like基因的启动子的作用元件和时空表达特异性研究.  相似文献   

荠菜(Capsella bursa-pastoris)生长素极性运输PIN3基因cDNA及其启动子序列的克隆和分析     

胡清云  朱占伟  彭彦  赵燕  黄妤  刘晓柱  张学文 《中国农业大学学报》2015,20(1):29-36

  相似文献   

NOS/HuIFNa嵌合基因的构建及其与Ti质粒载体的拼接     

李全义  王金生  方中达  侯云德 《南京农业大学学报》1991,(3)

将人α干扰素(HuIFNa)基因的全长cDNA克隆到nos启动子的下游,并在3＇端加上nos的3＇末端片段,得到人α干扰素基因插入方向同nos启动子一致的重组质粒pLQP24和方向相反的重组质粒pLQN2,并分别同Ti栽体pARCl2拼接。将NOS/HuIFNa引入到pARCl2的T区端臂内,构建成重组质粒pLPP3和pLNP20通过接合转移将这两个重组质粒引入到根癌土壤杆菌LBA4404。  相似文献   

超强表达可豇豆胰蛋白酶抑制剂基因（CpTI）转化苹果的研究   总被引：7，自引：0，他引：7  

达克东  金德敏等 《园艺学报》2001,28(1):57-58,I001

通过农杆菌介导法将超强表达载体PECp中的豇豆胰蛋白酶抑制剂基因CpTI转入了苹果品种‘嘎拉’。GUS检测和Southern杂交结果证明CpTI基因已经整合进苹果基因组。  相似文献   

水稻OsN1基因5’端启动子不同区域序列分析     

吴智丹  王光  李林  刘凤权  邵敏 《江苏农业学报》2012,(1):1-6

为了研究水稻OsN1基因启动子(OsN1p)的表达调控机理,用OsN1基因ATG(ATG中的A为0)上游-1 089 bp、-881 bp、-489 bp和-245 bp的启动子序列分别取代pBI121中的35S启动子,构建植物表达载体pBIN1.1p、pBIN0.9p、pBIN0.5p和pBIN0.2p。将这些表达载体经农杆菌介导转化水稻日本晴,获得转基因植株。对启动子的表达特点和启动活性进行了分析,结果表明,由-1 089 bp启动子、-881 bp启动子和-489 bp启动子驱动的gus基因能在愈伤组织中表达,-245 bp启动子不能驱动gus基因在愈伤组织中表达,说明启动子OsN1p具有启动活性的最小启动序列为ATG上游的-489 bp;-489 bp启动子驱动的gus基因在转基因植株根中表达,在根冠不表达;用5 mmol/L水杨酸(SA)喷施转基因植株叶片后,GUS定量分析结果表明转基因植株的GUS活性增高,转-881bp启动子植株的GUS活性比转-1 089 bp启动子植株的活性高。可见,启动子OsN1p具有组织特异性表达和受SA诱导表达的特性。  相似文献   

绵羊MSTN基因启动子区SNPs分析     

贺三刚  陈芯  刘晨曦  刘国松  刘明军 《华北农学报》2012,27(3):81-85

采用测序和PCR-RFLP的方法,分析了MSTN基因启动子区在7个品种绵羊中的单核苷酸多态性,结果表明:存在2个SNP位点(-959T/C,-784G/A),表现为6种基因型(TT、TC、CC、GG、GA、AA),在-959T/C位点中,国外肉用绵羊品种陶赛特、德国肉用美利奴及我区的巴士拜羊,TT为优势基因型,地方品种绵羊巴音布鲁克羊、多浪羊和阿勒泰羊在该位点中CC为优势基因型,经χ2检验,其群体的基因频率和基因型频率均处于Hardy-Weinberg平衡状态,群体遗传多态性分析表明,这6个绵羊品种中群体的多态信息含量(PIC)均处于0.25～0.50之间,为中度多态,特克赛尔羊在该位点未发生突变。在-784G/A位点中,除陶赛特与特克赛尔羊在该位点未发生突变,其他5个品种绵羊优势等位基因均为G等位基因。经χ2检验后,其群体的基因频率和基因型频率均处于Hardy-Weinberg平衡状态,群体遗传多态性分析表明,多浪羊、巴士拜羊和巴音布鲁克羊的群体多态信息含量(PIC)均处于0.25～0.50之间,为中度多态,而阿勒泰羊和德国肉用美利奴的群体多态信息含量(PIC)小于0.25,为低度多态。  相似文献   

拟南芥冷诱导型启动子CBF3驱动IPT基因在烟草中的表达     

郭新勇  程晨  张选  祝建波 《西北农业学报》2012,21(5):123-131

用PCR的方法获得拟南芥冷诱导型启动子CBF3和农杆菌Ti质粒上的IPT基因,构建由启动子CBF3驱动IPT植物表达载体,并经农杆菌介导将基因整合到烟草的基因组中,利用Kan筛选、PCR和RT-PCR检测,最终获得转基因的植株。通过对烟草的植物学性状和农艺学性状的分析发现,随着启动子CBF3驱动的IPT基因在烟草中的表达,使得植株性状发生很大的改变,如株型变为塔型,株高增高,节距增长,且有很多的分枝和侧芽,叶片明显增多,表现出短窄且平滑的性状,茎围、腰叶长和腰叶宽都减小许多,相应的最大叶面积、顶叶面积和叶质量也都下降,但叶的密度却有所增加。  相似文献