分析基因差异表达的几种方法     

罗永华  丁兆忠 《中国兽医杂志》2010,46(4)

随着人类和很多动物的基因组测序完成,以基因组功能研究为主要目标的后基因组时代的来临,基因功能信息的获取将成为基因研究的重点.基因差异表达分析是获取基因功能信息的重要方法.  相似文献   

牦牛功能基因的研究进展     

肖玉萍  魏云霞  张百炼  吴晓睿  师音  周磊  李维红 《黑龙江畜牧兽医》2012,(3):37-40

牦牛是分布于海拔3 000 m以上,以我国青藏为中心的高山、亚高山地区的牛种之一,是唯一能够充分利用青藏高原草地资源进行动物性生产的优势牛种和特有的遗传资源。牦牛对高海拔地区严寒、缺氧、缺草等恶劣条件具有极强的适应能力,可提供奶、  相似文献   

含LacZ重组逆转录病毒的制备及其在NIH3T3细胞的表达   总被引：2，自引：0，他引：2  

王凤阳  孟庆文  扈荣良  池海英  张茂林  于康震  殷震 《中国预防兽医学报》2001,23(5):329-331

构建了含有3．7kbLacZ的重组逆转录病毒载体,转染包装细胞系PA317后,经G418筛选,得到了G418的抗性的产毒细胞系,用收获的含有重组逆转录病毒粒子的浓缩病毒上清,感染NIH3T3细胞。经X-gal染色检测,发现表达了LacZ的NIH3T3细胞呈蓝色。  相似文献   

生长抑素基因疫苗质粒pEGS/2SS的构建及表达   总被引：7，自引：0，他引：7  

曹少先  杨利国  张文伟  茆达干  何晓红 《中国兽医学报》2005,25(5):499-502

将pcS／2SS中的乙肝表面抗原（HBsAg）S基因及插入S基因中的生长抑素（somatostatin，ss）基因亚克隆到pUC19中，构建成pUSS／S质粒；PCR扩增pcS／SS中SS基因，调整阅读框，融合到pUSS／S质柱S基因后，构建成pUS／2SSG质粒；最后将S／2SSG融合基因克隆到pEGFPN1中EGFP基因的5’端，构建S／2SS-EGFP融合表达质粒pEGS／2SS。酶切、测序鉴定后脂质体包裹法将pEGS／2SS转染HeLa细胞，荧光显微镜下检测荧光，ELISA检测表达产物的SS免疫反应原性。酶切和测序鉴定表明，重组质粒pEGS／2SS构建成功。pEGS／2SS转染24h后的HeLa细胞检测到绿色荧光，72h检测到强烈荧光，表明融合基因在HeLa细胞获得高表达；ELISA证实融合蛋白具有SS的抗原抗体反应原性。质粒pEGS／2SS的成功构建及表达为生长抑素基因免疫的机理及安全性研究奠定了基础。  相似文献   

新城疫病毒F48E9感染CEF细胞特异性表达基因的筛选鉴定     

杨新艳  刘培欣  曹殿军  闫丽辉  孙建宏  单文鲁 《中国预防兽医学报》2005,27(4):260-263

分别以NDV F48E9和La Sota株感染鸡胚成纤维细胞,于感染后8 h提取NDV感染CEF细胞总RNA,通过mRNA差异显示技术筛选病毒感染诱导表达的特异性基因.主要方法是先以锚定引物经反转录后,然后以9～10 bp随机引物为上游引物,以锚定引物Oligod(T)18为下游引物,进行PCR扩增,PCR产物采用8%的尿素变性PAGE胶电泳进行分离鉴定.对于特征性差异带进行第二次PCR扩增,克隆后测定其核苷酸序列.结果我们发现数个差异条带,选取差异带在500 bp以内的条带,经测序后显示经NDV F48E9感染后,有一条差异条带特异性表达的基因所编码的蛋白与Receptor(TNFRSF)-interacting serine-threonine kinase 2有47 %同源,是一个新基因,其蛋白功能不明确,有可能和细胞的凋亡有关.  相似文献   

腹水综合征肉鸡肺脏缺氧诱导因子-1α基因克隆及表达研究   总被引：2，自引：0，他引：2  

曾秋凤  陈代文  张克英  余冰 《畜牧兽医学报》2006,37(6):609-613

从21日龄患腹水综合征（AS）鸡肺脏中提取RNA,根据健康鸡胚心室肌细胞缺氧诱导因子-1α（HIF-1α）基因序列（登录号为NM204297）设计引物,采用RT-PCR技术进行cDNA扩增,扩增产物经琼脂糖凝胶电泳分离、纯化、回收后与载体pMD18-T连接,转化大肠杆菌DH5α,筛选阳性克隆,测序.结果表明,已成功克隆的阳性重组子经测序鉴定其片段大小与预期大小完全一致,为1 576 bp.序列同源性分析比较表明,该cDNA及其推导的氨基酸序列与鸡胚HIF-1α cDNA和氨基酸序列同源性分别为99%和98%.采用RT-PCR技术检测4只21日龄正常肉鸡和4只21日龄AS患鸡肺脏HIF-1α mRNA,结果表明,AS患鸡肺脏HIF-1α mRNA表达丰度极显著高于正常肉鸡（P《0.01）.本试验证明,HIF-1α与肉鸡肺动脉高压导致的腹水综合征相关.  相似文献   

基因表达与营养相互关系的研究进展     

方桂友  邱华玲  董志岩 《福建畜牧兽医》2006,28(6):3-5

本文综述了基因表达与营养相互作用关系,具体探讨了碳水化合物、蛋白质和氨基酸、脂类、维生素、金属元素等营养素对基因表达的调控作用以及基因的多态性对营养素吸收、代谢和利用的影响,并分析了其在动物生产上的应用。  相似文献   

维生素A和维生素D对动物基因表达的影响     

李思明  周定刚  温安祥  欧阳玲花 《中国饲料》2006,(9):10-12

本文在介绍维生素A和维生素D营养生理功能的基础上,综述了维生素A和维生素D对相关基因表达的调控及其主要机制。  相似文献   

荧光定量PCR技术及其在动物营养中的应用     

张广民  文杰 《中国饲料》2006,(10):36-38

实时荧光定量PCR技术是一种通过检测PCR荧光信号的变化进行核酸定量的技术。目前,该技术已经应用于病原微生物、基因表达、基因组变异和多态性检测等许多方面。本文综述了定量PCR技术的基本原理及其在动物营养中的应用。  相似文献   

共轭亚油酸对动物免疫功能的调节   总被引：2，自引：0，他引：2  

荆丽珍  王宝维  张旭晖  王亚超  岳斌 《中国饲料》2006,(14):14-16

共轭亚油酸具有广泛的生物学功能,它对增加机体免疫球蛋白含量,促进免疫细胞增殖、细胞因子产生、吞噬细胞的功能,基因表达都具有调节作用。本文就共轭亚油酸的免疫调节作用进行了阐述。  相似文献