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61.
二温式多重PCR同时检测鸡的6种呼吸道病病原方法的建立   总被引:8,自引:1,他引:7  
设计了6对分别针对鸡传染性支气管炎病毒(IBV),禽流感病毒(AVI)、鸡毒素霉形体(MG)、鸡传染性喉气管炎病毒(ILTV)、新城疫病毒(NDV)和滑液霉形体(MS)的特异性引物,根据反转录滞酶链反应(RT-PCR)和多重PCR原则,优化建立了一次PCR反应同时检测6种禽呼吸道病原的二温式多重PCR。该方法可同时扩增出6条区段大小与设计相符符的特异性片段,即IBV 1720bp,AIV 1050bp,ILTV647bp,NDV310bp,MS207bp,对人工感染鸡临床样品检测结果证明,该方法可用于临床诊断。  相似文献   
62.
捻转血矛线虫(H.contortus)ZJ株H11蛋白基因的克隆及序列分析   总被引:2,自引:0,他引:2  
参照已发表的捻转血矛线虫H11蛋白基因序列设计引物,以H.contortuss ZJ株的总RNA为模板,进行RT—PCR扩增,成功扩增出H11基因。将PCR产物与pUCm—T载体连接后,转化DH5α感受态细胞,筛选阳性克隆并测序。序列分析表明,其核苷酸序列与国外报道的H11基因的同源性为99.5%。编码氨基酸序列具有氨基肽酶的保守序列,推测可使虫体不能获得所必需的氨基酸而导致死亡。  相似文献   
63.
RT-PCR方法快速诊断猪传染性胃肠炎   总被引:7,自引:0,他引:7  
根据猪传染性胃肠炎病毒(TGEV)标准毒株(Purdue-115)的ORF6(N基因)的基因序列,设计俣成了一对引物Li01/Li02用反转录聚俣酶链反应(RT-PCR)技术对发病猪的粪便进行检测。结果得到与预期大小相一致的约1174bp(N基因)的PCR产物,与从参照毒株TGEV TH-98扩增出的片段大小相一致。进一步用限制性内切酶进行分析,发现从发病猪火花名扩增出的N基因与参照毒株TH-98株具有相同的限制性内切酶图谱,从而证实本病例致病病毒为TGEV。  相似文献   
64.
PCR扩增TK基因检测鸡传染性喉气管炎病毒的研究   总被引:3,自引:0,他引:3  
根据已发表序列设计一对包含鸡传染性喉气管炎病毒(ILTV)TK基因全长核苷酸的1259bp引物,对2株ILTV强毒和1株ILTV疫苗毒进行PCR扩增,均能扩增出预期大小的目的片段,酶切分析证实了目的片段的特异性,而其它禽病原体的扩增均为阴性。PCR检测ILTV DNA的最小检测量为75pg。此方法检测人工接种鸡的气管棉拭样品,均能检测到ILTV,因此可用于临诊样品鸡传染性喉气管炎病的检测和诊断。  相似文献   
65.
PCR技术检测猪伪狂犬病毒及其潜伏感染部位的研究   总被引:22,自引:1,他引:21  
本研究合成了伪狂犬毒糖蛋白gp50基因引笺,该引物能够扩增糖蛋白gp50基因中434-651之间的217bpDNA片段,该片段含 SalI酶切位点,应用引物对几种不同的伪狂犬病毒株多聚酶链式反应扩增结果全为阳性。  相似文献   
66.
一、试验材料(一)毒(菌)种1.兔瘟肝传代毒:某生药厂肝传代毒L1/5以及对人 O 型红细胞凝集价在1:1280以上的自然野毒(肝悬液),于-25℃低温冰箱保存。2.巴氏杆菌菌种:中国兽医药品监察所提供的 C51—6菌种以及自然病例分离的巴氏杆菌。(二)异硫氰荧光素标记的绵羊抗兔球蛋白荧光抗体卫生部上海生物制品研究所产品(特异性染色单位1:16),临用前用0.01M PBS 做1:16倍的稀释。  相似文献   
67.
为了能在野外调查中和野生动物执法检查、打击虎产品走私工作中对发现的可疑虎残余物或虎产品等样品进行快速,准确的鉴定,东北林业大学野生动物资源学院近日建立了可以对虎线粒体DNA进行特异性扩增的PCR方法。 虎线粒体DNA细胞色素B(Ctyb)段由1140个碱基组成,通过用Wdnasis软件比较10只苏门达腊虎、15只东北虎、7只孟加拉虎、3只印支虎及5只华南虎Ctyb的碱荃序列,寻找到它在Ctyb段的保守区域,再与猞猁、雪豹、狮、豹猫、金钱豹、云豹、猎豹及家猫等多种猫科动物和梅花鹿,黑麂、赤鹿、獐、…  相似文献   
68.
本文通过光合作用参数的测定,详细的研究了中系8541和8240两种不同产量水平的水稻品种的光合特性.论述了在含等量叶绿素的条件下,中系8541和中系8240之间在对光谱的吸收、叶片的光合作用量子转化效率,叶绿体的PSⅡ(光系统Ⅱ)潜在活性(Fv/F_0)和原初光能转化效率(Fv/Fm等的主要区别.实验结果说明,上述各光合作用参数中系8541都优于中系8240.不仅如此.在Mg~(2+)作用下,Fv/Fo和Fv/Fm比值的提高以及Mg~(2+)对两个光系统激发能分配的调节能力中系8541也强于中系8240.  相似文献   
69.
荧光PCR法定量检测动物源性饲料中的牛、羊成分   总被引:1,自引:0,他引:1  
疯牛稿是由于健康牛食入含有致病性朊粗的人工蛋白质饲料(肉骨粉)所致,而目前尚未见能有效、快速地检测饲料中牛、羊成分的技术报道。本文在前期研究的基础上.运用荧光定量PCR法.针对牛、羊、鸡、猪几种不同动物的特异性基因序列设计了牛、羊两种动物的特异性探针,通过对整个PCR过程的实对荧光监测,来鉴定饲料中的牛、羊成分,并对其定量范围做了简单的计论。本方法能有效解决普通PCR的样品污染问题,具有特异性强、是敏度高、重复性好等特点。  相似文献   
70.
荧光抗体染色法检测猪瘟的研究   总被引:3,自引:0,他引:3  
利用荧光抗体技术检测病猪内脏器官可能存在的猪瘟病毒,对猪瘟的早期诊断具有十分重要意义,猪瘟的常规诊断需要4~5天,而该项技术可在半天之内作出判断,既快速又客观、准确,在规模化猪场临床上可得到很多广泛应用。  相似文献   
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