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91.
植物微卫星引物开发方法 总被引：1，自引：0，他引：1
综述了开发植物微卫星引物的几种方法:搜寻核酸数据库和寻找已存在的微卫星引物;不同物种间共用;建立基因组文库;利用分子标记技术发展SSR引物。此外,还比较了几种方法的优缺点。 相似文献
92.
梨权RAPD分析条件的优化 总被引：2，自引：0，他引：2
以黄花梨为试材，建立了梨树RAPD分析的优化反应条件，即25μL反应体系中含有Tris-HCl(pH9.0)10mmol/L,KCl50mmol/L,MgCl2.0mmol/L,dNTP200μmmol/L，模板DNA10ng,引物400μmol/L，TaqDNA200μmol/L，模板DNA10ng，引物400μmol/L，TaqDNA聚合酶1.5U。适宜的扩增程序为94℃120s，1个循环；94℃60s、37℃75s、72℃120s，45个循环；72℃10min,1个循环。 相似文献
93.
动物乳腺特异表达载体的构建及其表达特性研究 总被引：6，自引：0，他引：6
为了研制动物乳腺生物反应器,用中国奶山羊β-乳球蛋白基因的5′、3′-侧翼区和β-酪蛋白基因的第1内含子构建动物乳腺特异表达载体p205C3.细胞表达试验结果显示,p205C3载体能够指导lacZ基因在SV40 T基因转化的山羊乳腺上皮细胞中表达,不能指导该基因在COS-1细胞和山羊成纤维细胞中表达.将人激肽释放酶(hKLK1) cDNA克隆入p205C3载体,用获得的重组载体p205C3KLK1注射哺乳期小鼠,然后取其心、肝、脾、肺、肾、脑、肌肉、胰腺和乳汁,酶活性测定结果显示,乳汁中的酶活性高达255.65 U·mL-1,其他组织中的酶活性与正常小鼠无差异.结果表明p205C3载体不仅能有效地指导外源基因在山羊乳腺细胞和小鼠乳腺中表达,而且表达具有较好的组织特异性,可以用于动物乳腺生物反应器的研制. 相似文献
94.
以WI1983G(全雌,G)和WI1983H(两性,H)近等基因系为材料,对EIN3序列进行分析,发现它们分别在153 bp和501 bp处出现两个单核苷酸多态性(SNPs).根据两个SNPs获得了1个可在黄瓜雌性植株上特异扩增的标记.初步推测,EIN3因为两个SNPs导致基因表达发生变化,使植株表现出对乙烯不同的敏感性,可能是最终不同性别表达方式的主要原因之一. 相似文献
95.
96.
【目的】Rf3是玉米CMS-S型不育系两个以上恢复基因中的标准基因，对其进行分子生物学研究意义很大。【方法】利用自主创建的Rf3近等基因系不育群体（Ps）和可育恢复系群体（Pf）为试材，采用改进的双向（二维）聚丙烯酰胺凝胶电泳（2D-PAGE）技术，对苗期、成株期叶片细胞总蛋白进行分析。【结果】分离到在Pf遗传背景下分子量为25.2 kD，等电点为5.0的特异蛋白质RRPⅡ，优化了2D-PAGE技术。【结论】该特异蛋白质点的出现与消失可能与玉米CMS-S的育性恢复有一定关系，对其纯化分离将为Rf3基因的克隆奠定基础和进一步了解玉米质核互作不育表达模式的分子机制。结合本研究，文章还讨论了采用2D-PAGE技术在玉米分子生物学研究中的优化以及基因组学与蛋白组学研究的衔接。 相似文献
97.
98.
在胰岛素定点突变体合成中，对不对称PCR反应中突变位点的引物和末端引物的比例以及退火温度进行优化。结果表明：PCR反应5′末端引物与突变引物的配比为50：1～100：1；第2轮PCR反应退火温度在65～70℃较为理想。 相似文献
99.
100.
由甜菜尾孢菌Cercospora beticola引起的甜菜褐斑病(Cercospora leaf spot, CLS)是甜菜生产中危害较重的叶部真菌病害,导致甜菜产量和含糖量下降。由于CLS早期症状不易识别,传统病斑形态目测诊断法易错过最佳防治时期,因此分子检测方法对于CLS的准确监测十分重要。迄今为止,国外已报道的分子检测法主要有基于甜菜尾孢菌 rRNA-genes的actin gene编码区和ITS区结合限制性酶切的分子检测法、基于 rRNA-genes的ITS区结合测序的检测方法和基于大量尾孢属真菌RAPD多态性分析而设计的特异引物Cebe2检测法。目前,我国对甜菜尾孢菌的分子检测工作尚未见报道,为此,本试验对甜菜尾孢菌上述3种主要分子检测方法进行了比较,并进一步验证了特异引物Cebe2的可靠性,初步确立了我国甜菜尾孢菌的快速分子检测技术体系,为我国CLS的早期准确检测和有效控制提供技术支持。 相似文献