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31.
大麻ISSR引物的筛选与细胞学制片技术的优化 总被引:1,自引:0,他引:1
在稳定的ISSR-PCR扩增条件下,使用50个大麻ISSR引物对代表性的大麻材料进行PCR扩增,筛选出14个适合大麻的ISSR引物;同时,为优化大麻染色体的制片质量,对大麻染色体制片过程中的变温预处理、低温提高中期分裂相的方法及解离等具体技术与方法进行了试验,优化后的大麻染色体制片条件为:芽长达1 cm后(21℃),23℃条件下促芽生长24 h,再低温(0℃)处理24 h,37℃解离20 min(20 g/L纤维素酶和20 g/L果胶酶)。适合大麻ISSR-PCR反应的引物筛选与染色体制片技术的优化,将为大麻遗传多样性的多层次化分析提供试验基础。 相似文献
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对PCR反应体系而言,引物浓度过高或过低对反应体系都存在严重的影响,只有合理的浓度区间才能对整个反应高效有序地进行发挥重要的作用.降低PCR引物间的量子效应有利于提高引物间PCR反应的独立性和确定性,故粒子自由程至少是相位关联长度的10倍,并由此可以得到引物反应浓度的上限;粒子非弹性散射的最大自由程是粒子运动的极限自由程,依此可以得到引物反应浓度的下限,从而确定了引物的有效浓度区间;引物浓度-扩增效率曲线一般呈单峰分布,利用黄金分割法可以精准、迅速地确定引物最佳浓度。基于上述计算方法,长20、25、30 nt的引物有效浓度区间分别为0.027~5.280、0.019~7.310、0.015~9.461 umol·L-1。引物有效浓度区间及最佳浓度对PCR反应体系的反应效率与速率、PCR产物质量等具有决定性的作用,而应用理论方法确定它们将对理论指导实验具有重要的意义。 相似文献
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牛冠状病毒(BCoV)引起犊牛腹泻,对养牛业造成极大危害。本研究采用交叉引物扩增(CPA)方法和核酸检测装置相结合,建立了BCoV的可视化快速检测方法。结果表明,CPA体系Mg2+最佳物质浓度为2.0 mmol/L,甜菜碱最佳物质浓度为0.4 mmol/L,d NTPs最佳物质浓度为0.6 mmol/L,Bst DNA聚合酶最佳浓度为1.5 U/μL,60℃为最佳反应温度,60 min为最佳反应时间。采用CPA BCoV-N反应体系同时检测沙门菌、大肠埃希菌、弯曲杆菌、牛冠状病毒、牛病毒性腹泻病毒、牛轮状病毒等犊牛腹泻相关病原,层析试纸条检测显示只有牛冠状病毒呈现检测线,未出现交叉反应。结果显示,CPA BCoV-N具有较高的特异性,CPA检测BCoV不需要昂贵的PCR仪器,简单的水浴或培养箱即可完成DNA扩增,封闭式核酸检测装置避免了气溶胶污染,对结果的判断更加直观客观,是一种简便、快速、灵敏的BCoV检测方法。 相似文献
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3月30日上午,农业部农业机械化管理司在北京召开了全国农机购置补贴政策实施工作会议。会议通报了农机购置补贴工作进展情况,公布了全国通用类机具补贴产品选型结果,并对下一步补贴实施和监督工作进行了部署。各省、自治区、直辖市、计划单列市及新疆生产建设兵团农机管理局局长,中选农机生产企业的负责人,财政部农业司、农业部财务司的有关领导出席了会议。 相似文献
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为了改变目前无液压悬挂装置的12马力小型拖拉机配套农具一机一架的状况,三年前我所开始研制通用悬挂架,并于1990年通过省级鉴定,现已批量生产,使用状况良好。该悬挂架一架可挂接多种农具,不仅节省了一机一架多用的钢材,降低了农具成本,而且易于“小拖”配套农具的推广。 相似文献
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李治飞 《柑桔与亚热带果树信息》2013,(5):I0001-I0001
不知从何时起,关于农产品滞销、农业效益下降、粮食安全风险、食品安全问题、生态环境破坏、农民增收困难、国内消费不足、城镇化水平落后等一系列涉农问题的解决方略,总是会直接或间接指向“农业规模经营”、当下,农业规模经营不仅在言辞意义上,而且在认知意义上也被当成“利器”,成为人们认识、阐释和改造“三农”相关世界的通用工具。因其“通用”带有的强迫性及其影响的深远性,故很有必要正本清源,避免误解和误用。 相似文献