赤点石斑鱼神经坏死病毒MCP基因原核表达条件优化(英文)     

苏友禄  冯娟  孙秀秀  郭志勋  闫云锋  黄剑南 《农业科学与技术》2008,9(6):59-63

[Objective] To optimize the prokaryotic expression of MCP gene of red-spotted grouper nervous necrosis virus. [Method] The MCP gene was amplified from red-spotted grouper nervous necrosis viral genome by RT-PCR. The recombinant expression vector pRSET A-MCP was constructed and transformed into BL21(DE3)plysS to express proteins with induction in different media, at different pH, or at different temperatures. [Result] The expression level of recombinant bacteria reached a peak with induction under the following condition: SOB or LB medium, pH 7.0, 37 ℃ while the fusion protein was about 44.5 kD in molecular weight. [Conclusion] This study provided a basis for the development of RGNNV-MCP vaccine.  相似文献   

硒源及硒水平对斜带石斑鱼幼鱼生长性能、免疫酶活性和全鱼及脊椎骨硒含量的影响     

梁达智  马豪勇  杨奇慧  谭北平  董晓慧  迟淑艳  刘泓宇  章双  张海涛 《动物营养学报》2019,31(6):2777-2787

本试验在不同硒源及硒水平下,研究其对斜带石斑鱼(Epinephelus coioide)幼鱼的生长性能、免疫酶活性和全鱼及脊椎骨硒含量的影响,确定斜带石斑鱼幼鱼对饲料中硒的最适需要量以及相对生物学利用率。选取810尾初重为(8.99±0.03)g的斜带石斑鱼幼鱼,随机分为9组,每组3个重复。试验分别以亚硒酸钠(Se-S)和蛋氨酸硒(Se-Met)为硒源,在基础饲料中分别添加0(对照)、0.3、0.6、0.9和1.2mg/kg的硒。基础饲料硒水平为0.48mg/kg,Se-S添加组饲料硒水平分别为0.82、1.15、1.32和1.79mg/kg;Se-Met添加组饲料硒水平分别为0.81、1.18、1.51和1.94mg/kg。养殖周期为10周。结果表明:1)饲料中不同硒水平对斜带石斑鱼幼鱼增重率(WGR)和特定生长率(SGR)均有显著影响(P<0.05),对斜带石斑鱼幼鱼的成活率(SR)和饲料系数(FCR)无显著影响(P>0.05)。以Se-S为硒源,当饲料硒水平为1.15mg/kg时,WGR和SGR最高;以Se-Met为硒源,当饲料硒水平为1.18mg/kg时,WGR和SGR最高。2)斜带石斑鱼幼鱼血清碱性磷酸酶(AKP)及肝脏总超氧化物歧化酶(T-SOD)、谷胱甘肽过氧化物酶(GSH-Px)、谷胱甘肽还原酶(GR)活性和丙二醛(MDA)含量均受到饲料硒水平的显著影响(P<0.05)。3)鱼体和脊椎骨硒含量均随着饲料中硒水平的增加而呈线性升高,且脊椎骨硒含量低于鱼体。综上所述,分别以Se-S和Se-Met为硒源,SGR为评价指标,斜带石斑鱼幼鱼对饲料中硒的最适需要量分别为0.98和1.01mg/kg。在本试验条件下,斜带石斑鱼幼鱼Se-Met的生物利用率比Se-S高,相当于Se-S的112.5%。  相似文献   

斜带石斑鱼甘露糖受体基因的克隆表达及其功能     

张梦兰  秦真东  卢志杰  赵丽娟  潘淦  林蠡 《水产学报》2021,45(8):1279-1295

为了研究斜带石斑鱼甘露糖受体(Epinephelus coioides mannose receptor, Ec MR)在抗赤点石斑鱼神经坏死病毒(red-spotted grouper nervous necrosis virus,RGNNV)感染中的免疫功能,实验成功克隆与表达了EcMR。结果显示,EcMR cDNA全长4 793 bp,共编码1 446个氨基酸。Ec MR的蛋白结构域包括1个信号肽(signal peptide)、1个富含蓖麻类β型三叶草结构域(RICIN)、1个Ⅱ型纤维连接蛋白结构域(FNⅡ)、8个串联的C-型凝集素样结构域(CLECTs)以及1个跨膜结构域(transmembrane region)。实时定量PCR(qRTPCR)和细胞免疫荧光(IF)分析结果显示,Ec MR在斜带石斑鱼的8个组织中均有表达,其mRNA的相对表达量顺序为鳃头肾脑脾脏肝脏外周血心脏肌肉。在研究Ec MR是否参与RGNNV入侵过程中时发现,RGNNV可以在GF-1细胞系中快速增殖,同时显著激活Ec MR的表达。为进一步探究RGNNV对GF-1细胞系的影响,本实验通过双染色法检测了RGNNV感染GF-1细胞系后的细胞凋亡情况,研究表明,RGNNV感染可以促进GF-1细胞系的凋亡,并且细胞凋亡率随着RGNNV感染时间延长而增加。同时,qRT-PCR和酶活性检测结果显示,RGNNV的感染可以显著促进凋亡相关基因的转录水平以及Caspase-3、Caspase-8、Caspase-9的酶活性水平。综上所述,本研究成功克隆了EcMR,并揭示了其在RGNNV入侵过程中一定的相关性。本研究结果将为石斑鱼病毒性疾病的防控提供参考。  相似文献   

Anaesthetic efficacy and physiological responses to clove oil-anaesthetized kelp grouper Epinephelus bruneus     

Min Ouk Park  Woo June Hur  Soo-Yeon Im  Dong-Won Seol  Jinhwan Lee  & In-Seok Park 《Aquaculture Research》2008,39(8):877-884

The efficacy of clove oil as an anaesthetic and at producing a physiological response (plasma cortisol and glucose) was evaluated in the kelp grouper, Epinephelus bruneus . To acquire complete anaesthesia in less than 3 min and recovery in <10 min, three doses of clove oil were tested at 18, 22 and 26 °C. Although higher anaesthetic doses resulted in shorter induction times and longer recovery times, and a lower temperature resulted in longer anaesthesia induction and slower recovery, we found the optimal dose and administering temperature of clove oil to be 250–300 mg L⁻¹ at water temperature of 18 °C, 150–200 mg L⁻¹ at water temperature of 22 °C and 50–100 mg L⁻¹ at water temperature of 26 °C respectively. Following the administration of 150 mg L⁻¹ of clove oil at 22 °C, the plasma cortisol level was highest (4.24 ± 1.571 μg dL⁻¹) after 12 h and the plasma glucose was highest (92.7 ± 9.61 mg dL⁻¹) after 2 h. These results should be useful to the aquaculture industry, where anaesthesia is necessary for a range of activities.  相似文献   

呼伦湖蒙古油繁殖生物学的研究   总被引：1，自引：0，他引：1  

李树国  张全诚  高庆全  成永旭 《淡水渔业》2008,38(5)

对蒙古油(Hemiculter bleekeri warpachowskyi)的繁殖季节、繁殖习性、繁殖力、性比等繁殖生物学指标进行了研究。结果表明:蒙古油属敞水性产卵类型,粘性卵,为一次产卵类型。蒙古油初次性成熟年龄为1龄,繁殖季节为6月中旬至7月下旬,以7月中旬为产卵盛期。蒙古油个体绝对生殖力F为2021~15470粒,个体体长相对生殖力FL为230~1137粒/cm,个体体重相对生殖力FW为273~700粒/g;个体体长相对生殖力、个体体重相对生殖力分别和体长、体重成二次方程和三次方程关系。繁殖前期雌雄性比1∶0.83,繁殖期雌雄性比为1∶1.11。  相似文献   

Immunostimulating influence of herbal biomedicines on nonspecific immunity in Grouper Epinephelus tauvina juvenile against Vibrio harveyi infection   总被引：1，自引：0，他引：1  

S. M. J. Punitha  M. M. Babu  V. Sivaram  V. S. Shankar  S. A. Dhas  T. C. Mahesh  G. Immanuel  T. Citarasu 《Aquaculture International》2008,16(6):511-523

Herbals such as Cynodon dactylon, Piper longum, Phyllanthus niruri, Tridax procumbens, and Zingiber officinalis were extracted with acetone, benzene, butanol, and petroleum ether and screened against the pathogen Vibrio harveyi isolated from the infected Grouper Epinephalus tauvina. Among the different solvent extractions screening to V. harveyi, petroleum ether extracts were suppressed significantly (P < 0.05). Equal proportions of the all-plant extracts were mixed with the artificial feeds at concentrations of 100, 200, 400, and 800 mg kg⁻¹ of diet and fed to grouper juveniles of 20 ± 2 g average weight for a period of 60 days. Every 20 days, fish juveniles were challenged with V. harveyi and the immune response was studied. The herbal diets significantly (P < 0.05) increased the survival, growth, and immune responses compared to the control group. The herbal diets were significantly improved (P < 0.01) in immune parameters such as phagocytic activity and albumin–globulin (A–G) ratio. Among the different concentrations of the herbals in the diet, the 400 mg kg⁻¹ diet was the most effective in the experiment.  相似文献   

病原性河流弧菌对青石斑鱼体表黏液黏附特性研究     

王晓露  邹文政  鄢庆枇 《水产学报》2008,32(3):441-448

采用3H-TdR同位素示踪法研究了河流弧菌对不同处理后的青石斑鱼表皮黏液的黏附作用。结果显示：青石斑鱼表皮黏液经40、60和80 ℃热处理10 min后河流弧菌的黏附率出现显著性升高，而100 ℃处理10 min则能极显著降低河流弧菌的黏附作用；蛋白酶K和胰蛋白酶处理黏液对河流弧菌的黏附作用没有显著影响，高碘酸处理则能极显著提高河流弧菌的黏附率；8种碳水化合物中的葡萄糖、甘露糖、甘露醇、麦芽糖能极显著促进河流弧菌的黏附作用，乳糖、果糖及蔗糖能显著性促进河流弧菌的黏附作用；半乳糖则没有显著性影响；高浓度的细胞表面提取物能显著抑制河流弧菌的黏附作用，但较低浓度的细胞表面提取物反而有一定的促进作用；青石斑鱼表皮黏液经Sephadex G-100分离得到3个洗脱峰，河流弧菌对第1个洗脱峰的黏附作用最强。本文研究结果表明，病原性河流弧菌对青石斑鱼表皮黏液有较强的黏附作用；青石斑鱼表皮黏液中存在特异性黏附受体；黏液中的主要黏附受体是热稳定性较高、耐蛋白酶K和胰蛋白酶的大分子物质。  相似文献   

不同蛋白质源部分替代鱼粉对褐点石斑鱼幼鱼生长性能、体组成以及血清生化指标的影响   总被引：3，自引：0，他引：3  

王赛  陈刚  张健东  纪多亮  吴灶和  周晖 《动物营养学报》2012,(1):160-167

本试验旨在研究不同蛋白质源部分替代鱼粉对褐点石斑鱼幼鱼生长性能、体组成以及血清生化指标的影响。配制5组等氮等能饲料,对照组饲料(D1)含68%的鱼粉,试验组饲料(D2～D5)是在对照组饲料的基础上分别用豆粕替代10%的鱼粉、豆粕替代20%的鱼粉、啤酒酵母替代10%的鱼粉、玉米蛋白粉替代10%的鱼粉。选取体重在15 g左右的褐点石斑鱼幼鱼180尾,随机分为5组,每组3个重复,每个重复12尾。试验期为8周。结果表明:在生长性能方面,与对照组相比,D2、D3组的增重率、摄食率、特定生长率、粗蛋白质表观消化率差异不显著(P>0.05),而D4、D5组的上述指标均显著降低(P<0.05)。与D2、D3组相比,D4组的特定生长率显著降低(P<0.05),肝体指数显著升高(P<0.05);D5组的摄食率、特定生长率、蛋白质效率和粗蛋白质表观消化率显著降低(P<0.05),饲料系数、肝体指数显著升高(P<0.05)。在体组成方面,D5组全鱼和肌肉中粗蛋白质含量显著低于对照组和D2、D3组(P<0.05);D4组肌肉中粗脂肪含量显著低于对照组和D2组(P<0.05)。在血清生化指标方面,D3组血清总蛋白、球蛋白、葡萄糖含量显著低于对照组(P<0.05),而白球比显著高于对照组(P<0.05);对照组、D4组血清甘油三酯含量显著高于D3、D5组(P<0.05);各组间血清谷丙转氨酶和谷草转氨酶活性没有显著差异(P>0.05)。由此得出,作为鱼粉的替代品,豆粕比啤酒酵母和玉米蛋白粉能更好地满足褐点石斑鱼幼鱼的营养需求;从主要生长指标不受影响的角度考虑,褐点石斑鱼幼鱼饲料中可以用豆粕替代20%的鱼粉。  相似文献   

凡纳滨对虾混养点带石斑鱼的研究     

严峰  邱勇  陈焕智  骆剑 《安徽农业科学》2012,(36):17630-17631

[目的]提高凡纳滨对虾的产量.[方法]利用生物防病原理,在凡纳滨对虾养殖中混养点带石斑鱼,研究其对凡纳滨对虾存活率和产量的影响.[结果]当凡纳滨对虾中混养点带石斑鱼密度为3000 尾/hm2左右时,凡纳滨对虾存活率和产量均达到最高,比单一养殖凡纳滨对虾存活率提高11.49％,平均产量提高3149.O kg/hm2.[结论]在凡纳滨对虾养殖中混养点带石斑鱼,能起到减少病害发生和降低养殖风险的作用.  相似文献   

河流弧菌对石斑鱼体表黏液的黏附作用     

赵敏慧  邹文政  鄢庆枇  陈强  庄峙厦  王小如 《中国水产科学》2008,15(2):347-351

采用^3H-TdR同位素示踪法研究了河流弧菌（Vibrio fluvialis）TS-1对青石斑鱼（Epinephelus awoara）表皮黏液的黏附作用。研究结果显示，经TSB培养的河流弧菌对青石斑鱼表皮黏液的黏附作用极显著高于经TSA培养的河流弧菌（P〈0．01）；河流弧菌经TSB培养后能很好地黏附于青石斑鱼表皮黏液，其黏附量随菌浓度升高而增大并符合饱和黏附动力学特征；不同生长阶段河流弧菌的黏附能力不同，在培养初期阶段细菌的黏附量先是随着培养时间的延长而增大，并在培养24h后黏附量达到最大，而后随培养时间的延长其黏附量急剧下降。本实验研究结果表明，河流弧菌对青石斑鱼表皮黏液有较强的黏附作用，其黏附作用受细菌培养条件、营养状况等自身因素的显著影响。本研究结果有助于了解河流弧菌的流行病学和致病机理。[中国水产科学，2008，15（2）：347—351]  相似文献