生长抑素(SS)与硫氧还原蛋白(Thioredoxin)相融合生成的2种基因工程化融合蛋白SS-N/X和SS-N/S的表达特性   总被引：1，自引：0，他引：1  

刘永庆  陈溥言  杜念兴  赵国屏 《中国兽医学报》2003,23(2):172-176

对基因工程化生长抑素（somatostatin,SS)-硫氧还原蛋白（Thioredoxin)融合蛋白SS－N／X和SS－N／S的表达产量、水溶性、Triton X-100对SS融合蛋白水溶性的影响、包涵体的溶解和复性特点以及SS的抗原性与免疫原性等特性进行了研究。结果显示，在30℃的低温下用IPTG诱导表达，SS－N／X融合蛋白主要以可溶性形式存在，占75．8％，色涵体仅占24．2％；而SS－N／S融合蛋白则主要以包涵体的形式存在，占81．1％，可溶性蛋白仅占18．9％；32C载体（pEG-32C)蛋白则居二者之间，可溶性蛋白与包涵体大约等比例出现。SS－N／S在低温下诱导可超量表达SS融合蛋白，其表达量约占菌体总蛋白的40．94％。0．5％ Triton X-100对融合蛋白的不溶性有非常显著的影响，几乎可使所有的SS－N／X融合蛋白和大部分SS－N／S融合蛋白及32C硫氧还原蛋白变成水溶性的。32C硫氧还原蛋白包涵体在尿素中的溶解度明显高于SS－N／S包涵体，2mol/L尿素可使近一半的32C硫氧还原蛋白包涵体溶解，而SS－N／S包涵体只有27．5％溶解；但在5mol/L尿素时，两者均可基本全部变为可溶性的。在SS融合蛋白包涵体溶解时加入还原剂二硫苏糖醇，可明显降低SS的抗原性。SS融合蛋白（水溶性融合蛋白和复性后的包涵体）具有良好的SS抗原性和免疫原性。由SS融合蛋白与弗氏不完全佐剂制成试验用疫苗，免疫BALB／c小鼠、仔猪和羔羊等动物，可显著提高免疫动物的增重。  相似文献   

猪肺炎支原体黏附因子基因R1R2区的克隆及表达   总被引：4，自引：0，他引：4  

张映  贾广乐  邵国青  聂向庭 《中国兽医学报》2003,23(4):338-341

根据GenBank登录的猪肺炎支原体232株P97基因和J株黏附因子基因设计了1对引物，以我国猪肺炎支原体Z株(强毒株)基因组DNA为模板，通过PCR方法扩增了该株黏附因子基因的部分序列。经序列分析后，重新设计了1对带有EcoRI和HindⅢ酶切位点的引物，并经引物的定点突变，PCR扩增了Z株黏附因子的R1R2区。扩增产物经双酶切后克隆到表达载体pET-32(a) 中。该重组质粒经酶切鉴定后，将其具有正确阅读框架的重组质粒转化到大肠杆菌BL21(DE3)感受态细胞，37℃下经IPTG诱导表达，得到相对分子质量约29000的融合蛋白，表达量约为11％。  相似文献   

家畜繁殖生物技术研究现状及趋势     

张继慈 《西北农业学报》1992,1(2):75-79

牛胚胎移植技术已趋于成熟。我国新疆牧科院用一步细管法移植牛冻胚受胎率达41%;牛和羊鲜胚四分胚移植也产下1头犊牛和6只羔羊。家畜体外受精,因卵子体外成熟和受精卵体外培养尚不过关,目前仍停留在实验室阶段。胚胎性别鉴定,1990年Koopman发现单拷贝基因,该基因是Y染色体的性决定区,命名为SRY,可利用PCR技术制成雄性特异DNA探针盒,进行马、牛、羊、猪早期胚胎性别鉴定。北京农学院等单位用PCR扩增牛SRY序列进行奶牛胚胎性别鉴定准确率达100%。英、日、法等国已获得牛胚胎细胞核移植后代;我国也获得1只核移植兔。北农大和新疆牧科院合作以绵羊精子为载体导入牛生长激素基因rMTbGH DNA成功,外源基因整合率为3%。  相似文献   

畜牧科学研究动态及前瞻     

昝林森  邱怀 《中国牛业科学》1994,20(2):51-54

文章在综述国内外有关专题研究的基础上，系统地讨论了当今畜牧科学的六个领域即家畜遗传育种，繁殖生理学，反刍家畜营养，非反刍家蓄营养，草地学和肉品科学近年来的主要科技成就及研究动态，指出了诸领域新近研究的热点未来研究的既定目标，对国内畜牧科学研究具有一定的参考价值和指导意义。  相似文献   

促性腺激素释放激素基因及其受体基因的研究进展   总被引：3，自引：1，他引：2  

刘忠慧  储明星  陈国宏 《中国畜牧兽医》2006,33(3):35-39

作者简要介绍了促性腺激素释放激素基因及其受体基因的位置、结构、表达、调控机理,并初步探讨了这两个基因与繁殖性能的关系。  相似文献   

哺乳动物附植前胚胎的基因表达调控   总被引：4，自引：0，他引：4  

姚宁  曾申明 《中国畜牧杂志》2006,42(1):64-67

哺乳动物胚胎附植前期包括:合子的形成,胚胎基因组的激活和细胞分化的开始。在这个时期,发育由母源物质控制转为合子基因控制,在此过程,同时形成染色质介导的转录抑制时期,要解除抑制必须经过胚胎基因组的激活。通过对体内、外附植前胚胎的mRNA的表达特点以及它们与成功发育联系的研究,可以筛选出最佳的体外培养条件,设计最佳的核移植方案。  相似文献   

Effects on several cell lines by plasmid expressing bcl-xL short hairpin RNA     

LIU Fang  HE Cheng-wei  ZHANG Yue-fei  ZHOU Ke-yuan△ 《园艺学报》2006,22(6):1229-1231

  相似文献   

肉兔双列杂交遗传效应的分析   总被引：1，自引：0，他引：1  

李华  蒋必光 《中国养兔杂志》1995,(4):30-34

本试验采用了５品种完全双列杂交，用Ｈａｖｅｙ程序对德国花巨兔（Ｇ）、比利时兔（Ｂ）、新西兰白兔（Ｎ）、加利福尼亚兔（Ｃ）、丹麦白兔（Ｄ）的主要生产性能进行了遗传效应分析。首次采用加性——显性模型分析了优势杂交组合优势性状的基因效应值与杂种优势率的关系，对杂种优势机理作了一定探讨。结果表明：最佳杂交父本、母本分别为Ｇ（♂）或Ｎ（♂）、Ｎ（♀）；最优杂交组合为ＧＢ、ＮＧ。此外，ＧＮ、ＤＮ、ＧＣ、ＢＣ也不失为优秀组合  相似文献   

家蚕第2隐性赤蚁的遗传学研究——Ⅱ.ch-2基因的连锁分析   总被引：1，自引：1，他引：0  

秦俭 《蚕业科学》1987,(2)

Ch-2基因是继ch之后新发现的一种隐性赤蚁ch-2基因与pM(2)、Ze(3)、L(4)、Pe(5)、E~(EL)(6)、q(7)、st(8)、I(9)、w-2(10)、ms(12)、cf(13)、U(14)、Se(15)、cts(16)、B_m(17)、nb(19)、rb(21)、or(22)、sp(23)、Nd(25)、及Y_m等各标志基因都是独立遗传.Ch-2与mln杂交F_2代分离+ch-2+min:ch-2+min:ch-2mln:ch-2mln=523:284:231:0≈2:1:1:0;ch-2与elp杂交F_2代分离+ch-2+elf:ch-2+elp:+ch-2elp:ch-2elp=219:97:68:0≈2:1:1:0,充分说明ch-2与mln、elp是连锁遗传的,即ch-2基因位于第18连锁群.  相似文献   

苜蓿银纹夜蛾核多角体病毒在家蚕蛹体内的复制及重组病毒外源基因的表达     

张志芳  何家禄  周乃明  华刚  吴祥甫 《蚕业科学》1993,(4)

家蚕蛹在复眼着色期,经4℃冷藏24小时后,可被Ac NPV(苜蓿银纹夜蛾核多角体病毒)感染。在蛹体内复制出的多角体大小差异较大,且比在昆虫Sf—21细胞中繁殖的Ac NPV和在蚕蛹体内形成的Bm NPV多角体小。在蛹体内繁殖的Ac NPV的游离病毒可以回返感染Sf—21细胞。由蚕蛹内分离的Ac NPV基因组DNA的限制性内切酶图谱与野生型的Ac NPV相同。以上结果证明Ac NPV可以在蚕蛹体内复制。含HBsAg基因(人乙肝表面抗原)的重组Ac NPV亦可感染家蚕蛹,并能正确表达外源基因。此外,还发现化蛹后第2天的家蚕蛹被注射约5×10~5PFU的Ac NPV,可诱导“人工滞育蛹”现象的发生,在25℃经过30天后蛹仍存活,发育停滞在复眼着色前阶段。  相似文献