Cell-free extract from porcine induced pluripotent stem cells can affect porcine somatic cell nuclear reprogramming     

Jin-Gu NO  Mi-Kyung CHOI  Dae-Jin KWON  Jae Gyu YOO  Byoung-Chul YANG  Jin-Ki PARK  Dong-Hoon KIM 《The Journal of reproduction and development》2015,61(2):90-98

Pretreatment of somatic cells with undifferentiated cell extracts, such as embryonic stem cells and mammalian oocytes, is an attractive alternative method for reprogramming control. The properties of induced pluripotent stem cells (iPSCs) are similar to those of embryonic stem cells; however, no studies have reported somatic cell nuclear reprogramming using iPSC extracts. Therefore, this study aimed to evaluate the effects of porcine iPSC extracts treatment on porcine ear fibroblasts and early development of porcine cloned embryos produced from porcine ear skin fibroblasts pretreated with the porcine iPSC extracts. The Chariot^TM reagent system was used to deliver the iPSC extracts into cultured porcine ear skin fibroblasts. The iPSC extracts-treated cells (iPSC-treated cells) were cultured for 3 days and used for analyzing histone modification and somatic cell nuclear transfer. Compared to the results for nontreated cells, the trimethylation status of histone H3 lysine residue 9 (H3K9) in the iPSC-treated cells significantly decreased. The expression of Jmjd2b, the H3K9 trimethylation-specific demethylase gene, significantly increased in the iPSC-treated cells; conversely, the expression of the proapoptotic genes, Bax and p53, significantly decreased. When the iPSC-treated cells were transferred into enucleated porcine oocytes, no differences were observed in blastocyst development and total cell number in blastocysts compared with the results for control cells. However, H3K9 trimethylation of pronuclear-stage-cloned embryos significantly decreased in the iPSC-treated cells. Additionally, Bax and p53 gene expression in the blastocysts was significantly lower in iPSC-treated cells than in control cells. To our knowledge, this study is the first to show that an extracts of porcine iPSCs can affect histone modification and gene expression in porcine ear skin fibroblasts and cloned embryos.  相似文献   

茉莉酸甲酯和磷酸氢二钾诱导柱花草对炭疽病的抗性     

伍康荣  刘凤民  张伟丽  陈梓健  许戴奇  黎志辉  罗喜梅  林国森 《草业科学》2015,(7):1124-1129

探究茉莉酸甲酯(Methyl Jasmonate,MeJA)和磷酸氢二钾(K2HPO4)诱导柱花草对炭疽病的抵抗作用。结果表明,二者浓度分别为0.001~0.1mg·mL-1和10~50mmol·L-1时,病情指数均显著降低(P0.05),最佳诱导浓度分别是0.001mg·mL-1和30mmol·L-1,诱导效果分别是64.84%和54.40%。0.001mg·mL-1MeJA处理组的过氧化物酶(POD)及多酚氧化酶(PPO)活性在48h达到最大值,显著高于对照组。30mmol·L-1 K2HPO4处理组的POD与PPO活性分别在48和24h达到最大值,显著高于对照组。两种诱抗剂处理的POD和PPO活性在接种早期增加了柱花草对炭疽菌的侵染的抵御能力,进而提高植株的抗病性。30mmol·L-1 K2HPO4处理组的过氧化氢酶(CAT)活性在48~72h内上升,显著高于对照组,而0.001mg·mL-1 MeJA处理组的CAT活性除72h显著低于对照组,其他时间点与对照组相差不大。说明在诱导柱花草抗病性方面,两种诱导抗性剂处理的诱抗效果与POD、PPO和CAT的酶活性的诱导的时间及程度有关。  相似文献   

Comparative analysis of MAPK and PI3K/AKT pathway activation and inhibition in human and canine melanoma          下载免费PDF全文

J. S. Fowles  C. L. Denton  D. L. Gustafson 《Veterinary and comparative oncology》2015,13(3):288-304

The lack of advanced animal models of human cancers is considered a barrier to developing effective therapeutics. Canine and human melanomas are histologically disparate but show similar disease progression and response to therapies. The purpose of these studies was to compare human and canine melanoma tumours and cell lines regarding MAPK and PI3K/AKT signalling dysregulation, and response to select molecularly targeted agents. Pathway activation was investigated via microarray and mutational analysis. Growth inhibition and cell cycle effects were assessed for pathway inhibitors AZD6244 (MAPK) and rapamycin (PI3K/AKT) in human and canine melanoma cells. Human and canine melanoma share similar differential gene expression patterns within the MAPK and PI3K/AKT pathways. Constitutive pathway activation and similar sensitivity to AZD6244 and rapamycin was observed in human and canine cells. These results show that human and canine melanoma share activation and sensitivity to inhibition of cancer‐related signalling pathways despite differences in activating mutations.  相似文献   

肺炎克雷伯氏菌强毒株的分离鉴定及16-23SrRNAITS序列分析   总被引：1，自引：1，他引：0  

李富祥  李华春  赵德宏  王娟  姚俊  廖德芳  熊和丽  宋建领  胡骑 《中国畜牧兽医》2015,42(2):352-357

为确诊疑似仔猪肺炎克雷伯氏菌(K.pneumonia)感染,并研究其病原的致病性、耐药性、16-23SrRNA ITS系统进化特征,本研究从云南因肺炎、腹泻而大量死亡的仔猪中分离到1株革兰氏阴性短粗杆菌,命名为KP14013,对其进行生化鉴定、16SrRNA鉴定,研究其对小白鼠和仔猪的致病性,并对其16-23SrRNA ITS基因进行测序和遗传进化分析。结果显示,KP14013分离株生化特征与肺炎克雷伯氏菌相符,其16SrRNA与GenBank中23株肺炎克雷伯氏菌代表株之间的同源性均为99%,将KP14013鉴定为肺炎克雷伯氏菌。KP14013对小白鼠半数致死量(LD50)为3×101.8 CFU,腹腔注射3×108 CFU可使仔猪100%致死。16-23SrRNA ITS系统进化关系结果表明,KP14013与GenBank中收录的15株肺炎克雷伯氏菌形成进化树的一个分支,属于同一个亚群,它们之间的核苷酸同源性为98.4%~99.2%。本研究证实了肺炎克雷伯氏菌是该起仔猪腹泻大量死亡的病原;KP14013分离株为毒力极强菌株,具有多重耐药性,其16-23SrRNA ITS与GenBank中收录的肺炎克雷伯氏菌代表株之间核苷酸存在差异,可用于肺炎克雷伯氏菌菌株间的鉴别。  相似文献   

扭角羚肺炎克雷伯氏菌的分离鉴定   总被引：1，自引：0，他引：1  

郝中香  廖红  刘丹  郭玲  杨绍林  文彩芳  张曼丽  罗露  郗立新  杨艳  谌利民  颜其贵 《中国畜牧兽医》2015,42(1):203-208

本试验旨在报告四川省野生扭角羚自然生存过程中致病性细菌的检测及生物学特征。试验对发病死亡扭角羚病变组织进行细菌学检查及分离,对分别从肝脏、脾脏和肺脏分离得到的4株优势菌进行形态特征、生化特性和16SrDNA分子鉴定,判定为肺炎克雷伯氏菌。这4株菌对供试小白鼠均有致病性。测其LD50,分别为2.9×107、2.9×107、4.5×107和1.1×108 CFU/只。4株分离菌对供试的先锋霉素等敏感,对阿米卡星等中度敏感,对红霉素等耐药。推测这4株肺炎克雷伯氏菌是导致扭角羚死亡的主要病原菌。  相似文献   

北方麦区小麦产量与籽粒氮磷钾含量对监控施钾和土壤速效钾的响应     

马悦  田怡  牟文燕  张学美  张露露  于杰  李永华  王浩琳  何刚  石美  王朝辉  邱炜红 《中国农业科学》2022,55(16):3155-3169

【目的】分析我国北方麦区监控施钾下小麦产量与养分吸收分配变化与土壤速效钾的关系,为节约钾资源,实现小麦丰产优质可持续发展提供理论依据。【方法】于2018—2020年在我国北方麦区43个地点进行田间试验,研究不同土壤速效钾水平下监控施钾对小麦产量、产量构成、籽粒氮磷钾含量及养分吸收分配的影响。【结果】北方麦区农户小麦施钾不足和过量问题同时存在。小麦产量随土壤速效钾含量升高显著增加,在土壤速效钾含量150—180 mg·kg^-1时,小麦产量达到最高,为6 340 kg·hm^-2。土壤速效钾过高并不能持续提高小麦产量,当土壤速效钾含量>180 mg·kg^-1时,小麦产量显著降低,平均为5 409 kg·hm^-2。与农户施肥相比,在土壤速效钾含量<90、90—120、120—150和>180 mg·kg^-1时采用监控施肥技术增加了钾肥用量,在速效钾含量150—180 mg·kg^-1时减少了钾肥用量,各土壤速效钾水平下采用监控施肥技术施用钾肥均提高了小麦产量,且在速效钾含量<90和>180 mg·kg^-1时显著增产。土壤有效磷含量>30 mg·kg^-1时,土壤速效钾含量120—150或>180 mg·kg^-1时,不施钾肥小麦产量有降低的趋势。土壤速效钾含量升高显著提高了小麦籽粒氮含量,农户施肥和监控施肥处理的籽粒氮磷钾含量无显著变化,速效钾含量>180 mg·kg^-1时不施钾肥的小麦籽粒磷钾含量显著降低。速效钾含量>150 mg·kg^-1时,监控施肥的钾肥偏生产力与钾肥吸收效率较农户施肥显著提高。【结论】在北方麦区,土壤速效钾含量150—180 mg·kg^-1时,合理施肥可使小麦产量达较高水平,但当土壤有效磷较高,超过30 mg·kg^-1时,不施钾肥小麦有减产风险。应根据土壤速效磷钾和小麦产量水平监控施肥,合理确定钾肥用量,实现北方麦区小麦丰产高效生产。  相似文献   

高盐对缢蛏生长存活、Na⁺/K⁺-ATPase活性及能量代谢相关指标的影响   总被引：1，自引：1，他引：0  

丁红兵  李浩宇  陈义华  陈丽芝  刘琦  牛东红 《上海海洋大学学报》2022,31(4):831-838

以缢蛏（Sinonovacula constricta）为研究对象,设置养殖周期为60 d的对照组（20）和高盐组（30）比较实验,分别在0、10、30和60 d进行取样,检测高盐对缢蛏生长存活、鳃组织Na+/K+-ATPase（NKA）活性及肝胰腺和血清能量代谢相关指标的影响。结果表明,高盐组缢蛏在30~60 d的养殖时间段内存活率为45.1%±2.9%,壳长、壳宽、壳高和体质量特定生长率分别为0.15%/d、0.17%/d、0.13%/d和0.61%/d,均显著低于对照组。各时间点高盐组NKA活性均显著低于对照组。10和60 d时对照组缢蛏肝胰腺己糖激酶（HK）活性显著高于高盐组,血清中葡萄糖（GLU）含量、乳酸（LA）含量和乳酸脱氢酶（LDH）活性也显著高于高盐组,高盐组缢蛏无氧代谢水平低于对照组。30 d时高盐组血清中GLU含量、LA含量和LDH活性显著高于对照组,高盐组缢蛏无氧代谢水平高于对照组。0、10和30 d时高盐组肝胰腺琥珀酸脱氢酶（SDH）活性显著高于对照组,高盐胁迫下缢蛏需氧代谢水平上升。研究表明：长期高盐养殖下,缢蛏仍能保持一定的存活率和生长速度;高盐影响了缢蛏的渗透调节和能量代谢,渗透调节增加了其能量消耗。本研究为进一步培育缢蛏耐高盐新品系提供了参考资料。  相似文献   

盐胁迫对苗期湖南稷子K +、Na +含量与分布的影响     

陆安桥  张峰举  王学琴  许兴 《浙江农业学报》2021,33(3):396

以湖南稷子(Echinochloa frumentacea)为材料,设置不同浓度(0、25、50、75、100、125、150、200 mmol·L ^-1)的NaCl和Na₂SO₄作为胁迫处理,探讨盐胁迫对湖南稷子苗期K ⁺、Na ⁺吸收与分布特性的影响。结果表明,随着NaCl和Na₂SO₄浓度的增加,湖南稷子叶片、茎鞘和根系中Na ⁺含量均增加,K ⁺含量均降低,K ⁺/Na ⁺均下降。其中,Na ⁺含量与分布表现为根系>茎鞘>叶片,叶片和茎鞘Na ⁺含量显著低于根系,K ⁺/Na ⁺明显高于根系;K ⁺含量与分布总体表现为低盐浓度时茎鞘>根系>叶片,中、高盐浓度时茎鞘>叶片>根系。盐胁迫下根系向茎鞘的运输选择性系数(ST1_K,Na)与茎鞘向叶片的运输选择性系数(ST2_K,Na)在盐浓度>25 mmol·L ^-1时均显著高于对照,且ST1_K,Na值大于ST2_K,Na值。当盐浓度≥125 mmol·L ^-1时,Na₂SO₄胁迫下地上部K ⁺/Na ⁺趋于稳定,茎鞘和根系中的K ⁺含量和ST1_K,Na值高于相同浓度的NaCl胁迫,叶片和茎鞘中的Na ⁺含量低于相同浓度的NaCl胁迫。ST2_K,Na值在Na₂SO₄胁迫下呈上升趋势,在NaCl胁迫下先升高后降低。因此,湖南稷子幼苗根系对K ⁺具有较高的选择性吸收能力;高盐浓度下,湖南稷子对Na₂SO₄具有更强的耐性。  相似文献   

产蛋循环过程中TRPV6、CaBP-D_（28K）和PMCA 1b在蛋壳腺的动态表达     

翟晓虎  ;贺卫华  ;侯加法  ;杨俊花 《兽医大学学报》2014,(9):1534-1539

将40羽220日龄ISA蛋鸡分为5组,于产蛋后0、2、4.5、8、16h断头处死,采集蛋壳腺组织,运用Real-time PCR和Western-blot方法检测产蛋循环过程中瞬时性受体单位香草精受体6（Transient receptor potential vanilloid receptor 6,TRPV6）、钙结合蛋白（calbindin D28K,CaBP-D28K）、质膜钙离子ATP酶1b（plasma membrane Ca2＋-ATPase 1b,PMCA 1b）mRNA和蛋白浓度的动态变化。结果显示,卵子未进入蛋壳腺前（产蛋后0~4.5h）,蛋壳腺内TRPV6、CaBP-D28K和PMCA 1bmRNA表达水平较低,随后表达量逐渐升高,在蛋壳钙化过程中达到最大值（产蛋后16h）,与0h相比,TRPV6和CaBP-D28KmRNA表达差异均极显著（P〈0.01）;另外,产蛋循环过程中,TRPV6、CaBP-D28K和PMCA 1b蛋白浓度变化与mRNA变化一致,产蛋后16h到达最大值,其中CaBP-D28K蛋白浓度与0h相比,差异显著（P〈0.05）。结果表明,产蛋循环可调控蛋壳腺内TRPV6、CaBP-D28K和PMCA 1b的表达,并提示钙离子跨细胞转运途径在钙离子进入蛋壳腺形成蛋壳过程中发挥重要作用。  相似文献   

烤烟K326种子可培养内生细菌的分离与鉴定   总被引：1，自引：0，他引：1  

颜瑾  舒翠华  田昌  王运生  肖启明  陈武  巢进 《湖南农业科学》2014,(18)

采用NA、KB、R2A和TSA 4种培养基分离烟草品种K326种子中的可培养内生细菌,并选择其中的50株外观形态特征有显著差异的菌株进行了16S r DNA测序与分析。结果表明,烟草K326种子中携带有大量可培养内生细菌,培养获得菌落总数约为8.1×105cfu/g;主要分为假单胞菌属、寡养单胞菌属、芽孢杆菌属、贪铜菌属和杆菌属等5个属,其中优势内生菌为嗜麦芽寡养单胞菌、假单胞菌和芽孢杆菌,分别占菌种总数的34%、32%和26%。  相似文献