鲈鱼白细胞介素-8 cDNA序列的克隆与原核表达          下载免费PDF全文

陈吉刚  杜海韬  熊娟  毛芝娟  杨季芳 《上海海洋大学学报》2010,(4):447-451

采用RT-PCR方法扩增和克隆了鲈鱼白细胞介素-8(LjIL-8)的编码阅读框。该编码阅读框由300个核苷酸组成,编码由99个氨基酸组成前体蛋白。LjIL-8氨基酸序列与哺乳动物和鱼类IL-8类似物的氨基酸同源性分别为23%~48%和25%~92%。氨基酸序列分析表明,N端存在一长23个氨基酸的信号肽,含有形成2个链内二硫键的4个半胱氨酸。分子进化分析表明,LjIL-8与欧洲鲈鱼的亲缘关系最近。将LjIL-8编码序列克隆到原核表达载体pET-28a (+),转化E.coli BL21(DE3)后用IPTG进行诱导表达,SDS-PAGE检测结果表明,预期分子量大小的小分子蛋白在大肠杆菌中成功表达,Western-blotting检测结果显示,目的蛋白能与抗6×His单克隆抗体发生特异性反应。  相似文献   

饥饿及恢复投饵过程中花鲈肌肉组成及非特异免疫水平的变化   总被引：2，自引：0，他引：2       下载免费PDF全文

楼宝  史会来  毛国民  骆季安  郑代明 《水产学报》2008,32(6):929-938

探讨了饥饿及恢复投饵过程中花鲈（Lateolabrax japonicus）（196±38g）肌肉组成分及鱼体非特异免疫水平的变化。实验设S0组（对照组，持续正常投喂），S5组（饥饿5d后恢复正常投喂），S10组（饥饿10d后恢复正常投喂），S15组（饥饿15d后恢复正常投喂）。S0组每隔5d取样，S5，S10和S15组分别在结束饥饿及恢复投饵后每隔5d取样测定。结果显示：饥饿程度对花鲈肌肉组成有显著影响。与对照组相比，S10组饥饿结束时肌肉的总脂含量显著降低；S15组饥饿结束时肌肉的总脂含量和粗蛋白含量都显著降，同时显著增加了肌肉的水分含量。表明饥饿过程中花鲈先动用肌肉脂肪，后动用肌肉蛋白。在恢复投饵过程中，S10和S15组总脂含量表现出先降后升的规律，而S15组蛋白表现为逐步回升的趋势。表明花鲈在饥饿后恢复投饵的过程中，先恢复肌肉蛋白含量，后恢复肌肉脂肪含量。饥饿15d时花鲈血清蛋白浓度显著降低。与对照组相比，S5组血清、脾脏和头肾溶菌酶活性均无显著变化；S10组头肾溶菌酶活性在恢复投饵10d时补偿性升高。S15组在饥饿结束时显著降低了花鲈头肾溶菌酶活性，但在恢复投饵5d时恢复到对照组水平。花鲈白细胞的吞噬活性也受饥饿程度及恢复投饵的影响。饥饿会降低花鲈血液白细胞的吞噬活性。在恢复投饵过程中,饥饿（5d）后恢复投饵会引起白细胞吞噬百分率和吞噬指数的补偿性升高。表明饥饿及恢复投饵也影响花鲈的非特异免疫水平。  相似文献   

Growth-dependent survival mechanisms during the early life of a temperate seabass (Lateolabrax japonicus): field test of the ‘growth–mortality’ hypothesis     

MD. SHAHIDUL ISLAM  MASAHIRO UENO  YOH YAMASHITA 《Fisheries Oceanography》2010,19(3):230-242

Three concepts based on size, time and growth rate are contained in the functional mechanisms of the ‘growth–mortality’ hypothesis, and are known as the ‘bigger is better’, ‘stage duration’ and ‘growth-selective predation’ hypotheses, respectively. Although it is sufficiently documented in fishes that faster growing and bigger larvae selectively survive, synergistic operation of the three components of the ‘growth–mortality’ hypothesis within a species have received little attention. In this study, we have tested the components of the ‘growth–mortality’ hypothesis based on the growth characteristics of original population (OP) and survivors (SV) of Japanese seabass (JSB) Lateolabrax japonicus. Larval and juvenile JSB were repeatedly sampled from the Tango Sea in 2007 and 2008. Otoliths from larvae and juveniles were analyzed to produce back-calculated daily records of size-at-age and growth rate, and were compared between OP and SV. Selective survival for fast-growing and bigger larvae was evident, and our results strongly support the ‘bigger is better’ hypothesis as well as the ‘growth-selective predation’ hypothesis. Growth rates of the individuals that metamorphosed into juveniles had significantly faster growth rates than non-metamorphosing larvae older than 48 days, the minimum age for metamorphosis, suggesting a clear relationship between growth rates and the timing of metamorphosis. On average, SV completed the larval stage ∼13 days earlier than those of OP, supporting the ‘stage duration’ hypothesis. Thus, SV of JSB exhibited traits consistent with all aspects of the ‘growth–mortality’ hypothesis: faster growth, bigger size-at-age, and shorter larval stage duration (LSD), i.e., larvae with faster growth, bigger size-at-age and a shorter LSD selectively survived the larval period. Although maternal influence on growth and survival was evident, factors that regulate growth–mortality mechanisms remain to be explored for JSB.  相似文献   

刺参CT/AG微卫星标记的筛选     

张俊鹏  孙典巧  王日昕  徐田军 《浙江水产学院学报》2012,(2):97-102

利用5’锚定引物PCT筛选刺参的CT/AG微卫星分子标记,测序的43个克隆子中,42条序列含有微卫星DNA序列,阳性克隆比率达到97.7%。去除重复序列后,共检测到56个微卫星位点,分布于26条序列中,其中25条序列检测到2个或2个以上微卫星位点。对所有筛选到的微卫星位点进行分类统计后表明,核心序列为（CT/AG）的有51个（91.1%）,5个位点为其他类型的重复。结果表明：刺参CT/AG微卫星标记在刺参基因组中含量较丰富,5’锚定引物法在筛选特定标记的同时,还筛选了其他类型的微卫星标记,具有较强的筛选效率。  相似文献   

RseB影响溶藻弧菌感染花鲈的能力          下载免费PDF全文

鲍宝龙  周家宇 《上海海洋大学学报》2024,33(1)

为了研究Rse基因缺失对溶藻弧菌感染花鲈能力的影响，评估了花鲈感染后的LD50、定殖能力和免疫响应，结果显示，溶藻弧菌野生株LD50为2.013×105CFU/ml，RseB缺失溶藻弧菌LD50为5.526×105CFU/ml，RseB缺失溶藻弧菌毒力下降2.75倍；溶藻弧菌主要在花鲈的鳃部、肠道、皮肤定殖，RseB缺失溶藻弧菌定殖肠空泡化程度更低，鳃组织结构的损坏程度更低；分别对野生株与RseB缺失溶藻弧菌感染的花鲈头肾组织进行转录组测序，发现与免疫相关的差异表达基因一共有236个，其中包括了122个显著上调的免疫基因和114个显著下调的免疫基因，这些基因大部分显著富集在Th1和Th2细胞分化、B细胞受体信号通路、T细胞受体信号通路等特异性免疫通路上，部分基因显著富集在与细胞凋亡相关的通路以及与炎症相关的NF-kappa B信号通路中。综上结果表明RseB缺失溶藻弧菌能引起宿主细胞的免疫反应且毒力有所降低。  相似文献   

百脉根离体再生体系的优化   总被引：1，自引：0，他引：1  

宋莉  赵德刚 《分子植物育种》2015,(4)

本研究以百脉根叶片、叶柄、茎段、花柄和根组织为外植体,比较了它们在不同激素配比培养基中的愈伤组织、不定芽及不定根的分化情况,优化并建立百脉根组织培养再生体系。研究结果显示:除根外,其它组织均可通过组织培养获得再生植株;外植体类型是影响愈伤组织、不定芽及不定根诱导的主要因素,叶片外植体的诱导效果最好。优化的百脉根组织培养再生体系为:使用叶片外植体,愈伤组织诱导培养基为MS+3.0 mg/L 6BA+0.1 mg/L NAA、芽分化培养基为MS+0.3 mg/L KT、生根培养基为1/2 MS+0.4 mg/L IBA。通过该体系60~75 d可获得百脉根再生植株,约为无性繁殖周期的1/3~1/2。  相似文献   

盐度与碱度对花鲈幼鱼的毒性研究   总被引：6，自引：1，他引：6  

郑伟刚  张兆琪  张美昭  董双林  张青田 《中国生态农业学报》2005,13(3):116-118

试验研究盐度与碱度对花鲈(Lateolabraxjaponicus)幼鱼的急性毒性结果表明,24h、48h、72h、96h碱度对花鲈幼鱼的半致死浓度(LC50)分别为101.05mmol/L、63.27mmol/L、56.85mmol/L和46.18mmol/L;盐度和碱度联合毒性试验结果显示碱度对花鲈幼鱼24h半致死浓度与盐度显著相关,二者间关系为ALK=125.05-2.18S(n=7,r=0.9756),表明盐度和碱度之间可能存在一定的交互作用。  相似文献   

不同盐度条件下饥饿及恢复摄食鲈稚鱼脂肪酸的组成   总被引：1，自引：0，他引：1  

王艳  胡先成  韩强 《水产科学》2008,27(7)

采用气相色谱法测定和分析了15.00、7.50及淡水3个盐度条件下鲈稚鱼在饥饿时及其恢复摄食后的脂肪酸变化。结果显示,在3个盐度条件下,饥饿的鲈稚鱼均首先消耗饱和脂肪酸,随后才会消耗不饱和脂肪酸;恢复摄食后的鲈稚鱼,其不饱和脂肪酸也优先得到补充。在3个盐度条件下,以淡水组饥饿稚鱼的多不饱和脂肪酸的消耗量最大,但在恢复摄食后,其EPA、DHA的含量又为最高,这可能与不同盐度条件下鲈稚鱼的生物转化能力不同有关。  相似文献   

三种脂质体介导的花鲈胚胎干细胞转化效率的比较     

叶寒青 《水产学报》2006,30(6):721-726

通过3种脂质体(genejammer, genejuice和metafectene)介导绿色荧光蛋白基因转化花鲈胚胎干细胞，探讨不同脂质体介导的花鲈胚胎干细胞（LJES1）的转化效率，以及影响外源基因转化效率的因素，如细胞接种时间、初始接种密度、DNA和脂质体用量以及它们之间的比例等。实验发现，genejammer转化LJES1细胞效率最高，适合于该细胞系的转化。对于同一种脂质体，DNA与脂质体用量的比例对于绿色荧光蛋白基因转化LJES1最为重要，DNA与genejammer的比例为1∶6时，转化效率最高，为27.3%；DNA与genejuice的比例为1∶4时，转化效率最高，为12.1%；而DNA与metafectene的比例为1∶3时，转化效率达到最高，为5.3%。随着DNA、脂质体量的增加，转化效率有所提高，但达到一定的用量后，转化效率反而下降。  相似文献   

花鲈消化道粘液细胞的类型及分布   总被引：1，自引：1，他引：1  

谢湘筠  林淑慧  林树根 《福建农业学报》2007,22(3):271-275

采用阿利新蓝与过碘酸雪夫氏染色方法(AB-PAS)(pH 2.6)和不同pH(1.0、2.5、3.1)的阿利新蓝染色法观察花鲈消化道(舌、食道、胃、肠)粘液细胞的类型与分布。根据AB-PAS染色结果将花鲈粘液细胞分成Ⅰ~Ⅳ4种类型:Ⅰ型为红色,AB阴性,PAS阳性,含中性粘多糖;Ⅱ型为蓝色,AB阳性,PAS阴性,含酸性粘多糖;Ⅲ型为紫红色,AB与PAS均为阳性,主要含有PAS阳性的中性粘多糖,同时含有少量AB阳性的酸性粘多糖;Ⅳ型为蓝紫色,AB与PAS均为阳性,主要含有AB阳性的酸性粘多糖,同时含有少量PAS阳性的中性粘多糖。不同pH的阿利新蓝染色结果为pH 2.5和pH 3.1溶液显示酸性粘液蓝色,pH 1.0溶液仅显示弱的和强的硫酸化酸性粘液蓝色。花鲈舌粘液细胞较少,以Ⅱ型为主;食道含有大量粘液细胞,以Ⅲ型和Ⅳ型为主;胃中只含大量Ⅰ型粘液细胞;肠中也有大量粘液细胞,以Ⅲ型和Ⅳ型为主。通过对各部位粘液细胞的分类和比较,可以看出粘液细胞的分布和类型与其所在部位执行的功能有密切的关系。  相似文献