猪乙型脑炎病毒SCYA201201株感染小鼠后突破血脑屏障能力研究     

柴春霞  王侨  赖雅兰  徐伊璇  文心田  曹三杰  黄小波  文翼平  赵勤  伍锐 《浙江农业学报》2018,30(6):926

将猪乙型脑炎病毒SCYA201201株(F122代次,弱毒株)脑内接种小鼠,评估该病毒株对小鼠的致病性。通过腹腔接种小鼠,分别在接种后6、12、18、24 h观察小鼠脑部病理变化,同时利用荧光定量PCR方法检测其血液、脑组织E基因拷贝数,探究该毒株突破小鼠血脑屏障的能力,从而评估SCYA201201株(F122代次)作为弱毒活疫苗的潜力。结果显示,SCYA201201株(F122代次)高度弱化,对乳鼠的脑内半数致死量(LD₅₀)仅为4×10⁵ PFU·40 μL^-1。该毒株腹腔接种24 h内,小鼠脑部未出现病理变化,且荧光定量PCR检测为阴性,表明该毒株不能突破小鼠的血脑屏障,具有很高的安全性。  相似文献   

荧光标记技术在增殖放流中的应用现状   总被引：2，自引：0，他引：2  

耿倩  张淑荣  段妍  刘岩  孙典荣 《水产科学》2016,(3):308-312

正标志技术是用来区分不同个体或种群的常用方法。自Petersen等[1]利用标志方法估算封闭水体中鱼类的利用率及种群大小后,标志技术在渔业和水产养殖研究中得到广泛的发展和应用,标记技术也不断更新。荧光标记技术是渔业和水产养殖研究中常用标志技术手段之一,其通过特定技术方法在标志对象上形成荧光标记进而通过肉眼或借  相似文献   

猪细环病毒1型感染与猪繁殖与呼吸综合征的相关性分析     

陈天慧  单晶晶  王立娇  王俊  于红欣  周双海 《北京农学院学报》2016,31(3):63-66

[目的]分析猪细环病毒1型(TTSuVl)感染与猪繁殖与呼吸综合征(PPRS)的发生是否存在相关性.[方法]采集40头临床疑似PRRS病猪血清和40头同群健康猪血清,确认PRRS病猪与猪繁殖与呼吸综合征病毒(PPRSV)亚临床感染猪,用荧光定量PCR方法检测TTSuV1和PRRSV载量,进行差异比较和相关性分析.[结果]常规PCR结合荧光定量PCR检测确认有31头PRRS病猪和27头PPRSV亚临床感染猪,前者PRRSV载量极显著(P＜0.01)高于后者;虽然PRRS病猪的TTSuV1载量高于PRRSV亚临床感染猪,但其差异不显著.PRRSV感染猪的血清中的TTSuV1载量与PRRSV载量之间无显著(P＞0.05)相关性.[结论]TTSuV1感染与PRRS发生之间可能没有相关性.  相似文献   

猪细环病毒2型荧光定量PCR检测方法的优化     

王园  杨倩  滕飞  于红欣  周双海 《北京农学院学报》2016,31(2):69-72

[目的]优化1种猪细环病毒2型(TTSuV2)的荧光定量PCR检测方法.[方法]对原有引物进行调整设计,以原有重组质粒为模板来重新进行检测TTSuV2 DNA的SYBR Green Ⅰ real-time PCR扩增.[结果]新的TTSuV2 SYBR Green Ⅰ荧光定量PCR的扩增效率为99.3％,标准曲线的决定系数为0.998,可准确检测的最低核酸模板浓度为50 copies/μL.与原方法相比较,新方法在熔解曲线、特异性、重复性方面都非常接近,但在扩增曲线方面得到明显改善,其可准确定量检测的灵敏度提高了至少10倍以上,临床检测数据也更加准确可靠.[结论]建立了一种新的准确灵敏度更高的定量检测TTSuV2的荧光定量PCR方法.  相似文献   

可见植入荧光标记和微金属线码标记标志拉萨裂腹鱼的研究   总被引：1，自引：0，他引：1  

朱挺兵  颜文斌  杨德国 《安徽农业科学》2016,(13):4-5

[目的]研究不同标记方法对拉萨裂腹鱼的标记效果,为其增殖放流与效果评估提供技术支撑。[方法]分别采用可见植入荧光标记(VIE)、微金属线码标记(CWT)和空白对照处理对拉萨裂腹鱼幼鱼(5~7 cm)进行为期40 d的标志试验,研究不同标记方法对拉萨裂腹鱼的标记效果。[结果] VIE组试验鱼的存活率明显高于CWT组和对照组。 VIE组和CWT组试验鱼的标志保持率分别为100%和98%。 VIE和CWT标记对试验鱼生长均没有显著影响。[结论] VIE标记是拉萨裂腹鱼幼鱼较适宜的短期标志方式。  相似文献   

New insights into radiata pine seedling root infection by Fusarium circinatum          下载免费PDF全文

N. Martín‐Rodrigues  J. Sanchez‐Zabala  I. Salcedo  J. Majada  C. González‐Murua  M. K. Duñabeitia 《Plant pathology》2015,64(6):1336-1348

Pine root infection by Fusarium circinatum has been reported in the literature, but the underlying pathogenic interaction is poorly understood. A green fluorescent protein (GFP)‐tagged F. circinatum isolate, together with confocal microscopy, was used in order to monitor the events associated with root infection of Pinus radiata seedlings. It was found that in order to reach and successfully infect pine roots, F. circinatum employed features that are similar to those previously described for other root‐infecting pathogens, such as mycelial strands, single runner hyphae and simple hyphopodia as well as other features that are reminiscent of those that are known to be involved in biotrophic invasion, such as bulbous invasive hyphae and filamentous invasive hyphae. Abundant sporulation was observed at the root surface as well as inside tracheids both in roots and in the root collar region. The fungus can spread from the roots to the aerial parts of the plant, and once there, colonization appears to be similar to the process that occurs when the pathogen is inoculated in the stem. Wilting symptoms and plant demise may be the result of a reduction in water uptake by roots and of the blockage of the vascular system by fungal hyphae and resin.  相似文献   

菜薹种质遗传多样性的荧光MFLP标记分析     

郭培国  许兰桂  夏岩石  黄红弟  张华  郑岩松  李荣华 《园艺学报》2015,42(2):350-360

采用M13通用接头连接锚定引物,建立了适合于菜薹的荧光微卫星锚定片段长度多态性（MFLP）技术;在此基础上,从360对选择性扩增引物组合中筛选出9对适宜的引物组合,对收集的32份菜薹种质进行等位基因多态性分析;结果显示这些引物组合的扩增产物在32份菜薹种质中的等位基因多态性在10 ~ 31之间,平均为17.7个;多态性信息量在0.61 ~ 0.98之间,平均0.81。利用获得等位基因多态性进行的遗传相似性分析表明,32份菜薹种质间的相似系数在0.277 ~ 0.836之间,平均0.624;基于多态性数据,运用除权配对法（UPGMA）进行聚类分析,将这些菜薹种质材料分为2个组群和4个亚群。这些结果显示荧光MFLP标记技术能有效地发现供试菜薹种质材料的DNA多态性,表明该技术在菜薹遗传特性分析的研究和应用领域具有可行性。  相似文献   

盐酸克伦特罗荧光定量检测试剂盒质量的评价     

葛怀礼  王莲  李金卿  郑百芹  李爱军  张建民  董李学 《中国畜牧兽医》2014,41(10):285-289

本研究使用盐酸克伦特罗荧光定量检测试剂盒,基于免疫荧光层析原理,实现对猪尿中所含克伦特罗的定量检测,并对试纸条的灵敏度、准确度与精密度、特异性、稳定性等进行了初步的性能评价。结果表明,以四参数法对定量曲线进行拟合,线性系数为R²=0.99972;检测限达到0.1 μg/L;对3个不同浓度的添加回收试验,测得其回收率为80%~120%;批内变异系数分别为12.2%、11.1%、15.2%;与4种β-肾上腺素受体激动剂和8种常用的抗生素交叉反应率均低于0.01%;同时验证了本试剂盒在1年的保存期限有效。整个检测过程只需15 min。  相似文献   

Epiphytic colonization of Ustilaginoidea virens on biotic and abiotic surfaces implies the widespread presence of primary inoculum for rice false smut disease     

J. Fan  X.‐Y. Guo  F. Huang  Y. Li  Y.‐F. Liu  L. Li  Y.‐J. Xu  J.‐Q. Zhao  H. Xiong  J.‐J. Yu  W. Wang 《Plant pathology》2014,63(4):937-945

Ustilaginoidea virens (Uv), the causative agent of rice false smut disease, infects developing rice spikelets at the booting stage, and transforms individual grains of the panicle into smut balls. Epidemics of the disease occur when the rice booting and heading stages coincide with rainy days. Using a green fluorescent protein (GFP)‐labelled Uv isolate that can form false smut balls on rice panicles, it was found that under high humidity and free water conditions the Uv isolate could colonize leaves of plants belonging to various families including the Poaceae (Oryza sativa, Echinochloa crusgalli, Digitaria sanguinalis and Leptochloa chinensis), the Brassicaceae (Arabidopsis thaliana) and the Solanaceae (Nicotiana benthamiana) without symptoms. Over several days, some conidia could germinate on the leaves of these plants and in water on the surface of Parafilm and cellophane, form hyphae and differentiate conidiophores to generate a large number of secondary conidia, while other conidia were able to directly produce secondary conidia. Conversely, in the absence of water some conidia could either bud to form new conidia or were converted into chlamydospores. These data indicate that Uv is one of a few fungal pathogens reported to have epiphytic characteristics. The rapid generation of a large number of spores on biotic and abiotic surfaces greatly increases the inoculum that can infect rice spikelets, resulting in the occurrence of rice false smut disease epidemics. These findings are important in the development of disease control strategies.  相似文献   

大丽轮枝菌侵染抗感棉种的组织学过程观察     

肖红利  孔志强  包郁明  赵凤轩  柳少燕  李蕾  陈捷胤  戴小枫 《植物病理学报》2014,44(3):287-294

 棉花黄萎病是一种极难防治的土传性真菌病害,研究病原菌侵染棉花的组织学过程对致病机理解析和抗病资源利用具有重要意义。本研究利用绿色荧光蛋白标记的大丽轮枝菌系统研究了其对抗病棉种海岛棉7124和三裂棉、感病棉种军棉1号和戴维逊棉的侵染过程。结果表明,大丽轮枝菌对抗/感棉种的初始侵染没有明显差异,接菌5 h后,分生孢子均能吸附在感病和抗病棉种的根表面。但侵染过程存在显著差异,侵染感病棉种中病原菌3~5 d到达皮层,5~7 d达到维管束,随后迅速扩展繁殖,侵染14 d后即完成系统侵染,并开始产生黄萎病症状;而病原菌侵染抗病棉种,5~7 d才侵入皮层,7~10 d到达维管束,14 d后仍无法扩展,病原菌的定殖与发展受到限制,无法形成系统侵染,较少形成黄萎病症状。本研究通过绿色荧光蛋白标记大丽轮枝菌对抗/感棉种的侵染过程研究,为大丽轮枝菌致病机理研究和抗性资源利用提供了强有力的理论依据。  相似文献