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51.
为了研究猪囊尾蚴乳酸脱氢酶(LDH)的表达,试验选择四川省雅江县呷拉乡猪带绦虫病患者,给其口服槟榔-南瓜子驱虫,收集、制备虫卵悬液(8万个/mL),再给3头20日龄三元杂交乳猪猪灌胃虫卵悬液,每头1 mL,40 d后收集、制备猪囊尾蚴蛋白,进行双向电泳(2-DE)分析,将凝胶蛋白斑点转移至聚偏氟乙烯膜(PVDF膜),用自制的大鼠抗猪带绦虫LDH血清作为一抗、健康大鼠血清作为阴性对照进行蛋白质印迹(Western-blotting)分析。结果表明:双向电泳凝胶共检测到(207±9)个蛋白质斑点,相对分子质量(Mr)为14 400～94 000,等电点(pI)为3.0～10.0;试验组特异性抗原抗体阳性杂交斑点为1个,阴性对照未见阳性杂交斑点;将Western-blotting检测的抗原抗体阳性杂交斑点与原双向电泳凝胶斑点进行比对,找到对应蛋白斑点,经ImageMaster 2D Platinum 5.0软件分析后初步确定该蛋白斑点的pI/Mr为7.03/35 368,与猪带绦虫LDH的pI/Mr理论推导值接近,说明猪囊尾蚴表达LDH。 相似文献
52.
53.
54.
55.
56.
梁俊芳 《农产品加工．学刊》2009,(2)
为了解牛乳中乳铁蛋白(LF)随着季节、饲养环境而变化的规律,利用毛细管电泳法,分别对从牧场、小区、奶户采集的牛乳样中的LF进行检测,取样周期为1年。结果得出,牧场牛乳中的LF含量高于小区牛乳的,奶户牛乳中的LF含量最低。1月份牧场牛乳的LF含量最高,为0.16mg/mL,而奶户牛乳中的LF含量最低,为0.08mg/mL;9月份牧场、小区和奶户牛乳中的LF含量最低,分别为0.03,0.05和0.06mg/mL。结果表明,随着管理水平的提高和气候的变冷,牛乳中LF含量逐渐升高。 相似文献
57.
58.
运用Sephacryl S-200凝胶层析和HiTrap rProtein ASepharose亲和层析2种方法对牙鲆(Paralichthys olivaceus)血清免疫球蛋白进行分离纯化,结果表明,牙鲆免疫球蛋白分布于33%~50%的硫酸铵饱和溶液中,其中45%的分离效果最好。凝胶层析和亲和层析样品均出现2个蛋白峰,用还原SDS-PAGE检测确定牙鲆免疫球蛋白存在于第2个蛋白峰中。牙鲆免疫球蛋白重链分子量约为75.4 kD,轻链分子量约为29.9 kD和28.2 kD,推测牙鲆血清免疫球蛋白的分子量为836 kD。制备了兔抗牙鲆免疫球蛋白多克隆抗体,免疫双扩散法检测多克隆抗体效价为1∶32,免疫斑点法检测多克隆抗体效价至少为1∶1 600。运用免疫印迹法(Western-bloting)检测了兔抗牙鲆免疫球蛋白多克隆抗体的特异性,实验证明该抗体与牙鲆全血清中免疫球蛋白重链、轻链反应均成阳性。 相似文献
59.
Niu Chen Li Yun 《中国林学(英文版)》2006,8(1):32-34
Conventional methods of DNA recovery from agarose gel generally require expensive equipment, extended elution times, or considerable handling of the sample after elution. We developed a simple protocol for a quick and effective recovery of DNA from agarose gels with good yield and quality. Using a Sephadex resin filled spin column, DNA fragments of 500 bp to 6 kb in an agarose gel slice were easily recovered by a 2 min centrifugation. The recovery efficiencies were over 40%-50% and the eluted DNA can be used directly for downstream application, such as polymerase chain reactions (PCR) and restriction enzyme digestion. This method could also be used to recover large DNA fragment (48 kb) without degradation. The use of Sephadex helps to remove small molecular impurities from agarose and it also reduces the chance of clogging the column filter caused by direct contact with agarose. 相似文献
60.