柔嫩艾美球虫（Eimeria tenella）体外细胞培养   总被引：3，自引：0，他引：3  

宋翠萍  沈永林 《中国兽医学报》1998,18(2):151-155

试验比较了玻璃珠层析法，ＤＥＡＥ纤维素层析法，Ｇ３漏斗过滤法３种提纯柔嫩艾美球虫（Ｅｉｍｅｒｉａｔｅｎｅｌｌａ）子孢子的方法，柱高８ｃｍ，直径２００μｍ的玻璃株柱用ｐＨ８．０的Ｒｉｎｇｅｒ’ｓ缓冲液作洗脱提纯子孢子，回收率为６４．１％，子孢子洗脱高峰期集中，且易于无菌操作，柱高５ｃｍ的ＤＥＡＥ纤维素柱用ｐＨ８．０的甘氨酸缓冲液作洗脱液，提纯子孢子回收率为６３．２％，但严格无菌操作困难，Ｇ３漏斗法易  相似文献   

卵形鲳鲹 JAK3 蛋白的原核表达与纯化     

杨萌  高爽爽  谢业扬  段家文  陆专灵  韦友传 《广东农业科学》2020,47(1):137-142

【目的】纯化获取卵形鲳鲹(Trachinotus ovatus)JAK3(TroJAK3)重组蛋白,为了解TroJAK3蛋白功能、相互作用及抗体制备奠定基础。【方法】应用分子生物学技术构建重组质粒pET-32a-TroJAK3,转化大肠杆菌BL21感受态细胞,经IPTG诱导表达,SDS-PAGE和Western blot检测TroJAK3重组蛋白表达情况。【结果】PCR扩增片段长度为3 333 bp,经双酶切鉴定、测序确认序列和开放阅读框正确,结果显示成功构建重组质粒pET-32a-TroJAK3。经终浓度为1 mmol/L IPTG 37℃诱导4 h后进行SDS-PAGE检测,结果表明TroJAK3重组蛋白以包涵体形式大量表达,分子量约为140 ku。经Ni-IDA树脂柱纯化,获得纯化的重组蛋白。Western blot检测结果显示有140 ku的条带,表明TroJAK3重组蛋白能被抗His抗体识别。【结论】成功构建了重组质粒pET-32a-TroJAK3,纯化得到高纯度的TroJAK3融合蛋白。  相似文献   

水力旋流器在多泥沙河流中应用的研究     

苏守坤 《沈阳农业大学学报》1998,29(3):256-258

利用水力旋流器，对水力机械的润滑、轴封用水进行净化，降低泥沙含量，使之达到技术供水标准。本文研究和分析了水力旋流器的结构、各部构件尺寸与净化泥沙性能的关系；指明了水经过旋流器的压力降的确定，使之既满足泥沙沉降的要求，又要保证供水系统的所需的压力值。  相似文献   

凡纳滨对虾精氨酸激酶的分离纯化及性质研究   总被引：1，自引：0，他引：1       下载免费PDF全文

姚翠鸾  王志勇  张瑞英  韩学哲  张子剑  孔鹏  冀培丰  黄珊珊 《水产学报》2008,32(5):690-696

经过CM-纤维素批量层析、Separdex G-100柱层析、DEAE_纤维素柱层析等步骤,从凡纳滨对虾肌肉组织分离得到精氨酸激酶,经SDS-PAGE检测达到电泳纯,分子量约为40kDa.对该酶的性质进行分析结果表明,精氨酸激酶的最适作用温度为55℃,当温度高于65℃时,酶活力显著下降;pH 8时酶活力较高,低浓度的精氨酸对酶活力有促进作用,高浓度时表现抑制作用,而底物类似物精胺和氨基胍则对酶促反应表现出完全的抑制.NaCl,KCl对酶的活力具有促进作用,低浓度(10 mmol·L-1)MgCl2对酶活力表现出激活作用,而CuCl2与MnCl2则表现出完全抑制酶活力,CaCl2与ZnCl2在低浓度时对酶活力无明显影响,但是随着浓度升高,对酶具有抑制作用.  相似文献   

茶多糖的提取纯化及组成研究综述   总被引：2，自引：0，他引：2  

夏新奎 《信阳农业高等专科学校学报》2004,14(2):45-47

综述了茶多糖的提取纯化方法、纯度及测定方法、化学组成、结构分析方法。  相似文献   

Purification and properties of β-galactosidase from Tilapia intestine: Digestive enzyme of Tilapia-X     

Akiko  YAMADA TANIGUCHI  Katsumi  TAKANO 《Fisheries Science》2004,70(4):688-694

ABSTRACT:   β-galactosidase of the intestine of Tilapia nilotica was purified by ammonium sulfate precipitation, followed by PAPTG-Sepharose 4B affinity chromatography, ethylenediamineetetraacetic acid ion-exchange chromatography, polyexchanger PBE 94 chromatofocusing, and Sephadex G-100 gel filtration. β-galactosidase was found to be a single band when examined by poly-acrylamide gel electrophoresis. The purifications of β-galactosidase were 27-fold from the crude extract. β-galactosidase showed optimum activity at pH 5.0 at 40°C, and was specifically found to be able to hydrolyze p -nitrophenyl β-galactopyranoside. It degrades galactan and agarose, and produces galactose. β-galactosidase was strongly inhibited by Hg²⁺ and PCMB. β-galactosidase is considered to be secreted by the upper and middle parts of the intestine and most of the activity was detected in the intestinal juice.  相似文献   

1株黄曲霉颉颃菌的鉴定及其抑菌活性成分分析     

李天溪  党萌  龙淼 《中国畜牧兽医》2022,49(5):1828-1839

【目的】 筛选黄曲霉颉颃菌,探究其最佳培养条件及有效抗菌成分,为实际生产中应用生物防治方法抑制黄曲霉污染提供新的理论依据。【方法】 通过平板对峙法及分子生物学鉴定方法对待测菌株进行筛选鉴定。以抑菌率作为衡量标准,判断所得黄曲霉颉颃菌的最佳培养温度、培养时间、接种量、转速、pH及装液量。通过硫酸铵沉淀法从颉颃菌无菌发酵上清液中提取蛋白,观测粗提物对黄曲霉菌丝生长的影响。通过离子交换色谱和凝胶过滤色谱进一步纯化粗提蛋白,并进行质谱测序及序列对比分析,筛选鉴定颉颃菌产生的有效抑菌成分。【结果】 筛选到1株解淀粉芽孢杆菌B10(菌种保藏号CCTCCNO:M2018353)。最佳培养条件为温度40 ℃,培养时间36 h,接种量3%,转速120 r/min,pH 6.0,装液量30 mL,最大抑菌率可达46.56%。其粗提蛋白能有效抑制黄曲霉生长,破坏菌丝正常形态,并从中筛选出几丁质结合蛋白、壳聚糖酶、葡聚糖酶等8种可能的有效抑菌成分。【结论】 本试验分离鉴定出1株抑制黄曲霉正常生长发育的解淀粉芽孢杆菌B10,其产生的多种蛋白成分对黄曲霉有显著抑菌活性。  相似文献   

杜仲叶酸性多糖提取分离及含量测定   总被引：4，自引：0，他引：4  

董娟娥  梁宗锁  靳爱仙  余震宇  成密红 《林业科学》2006,42(10):59-64

研究杜仲叶酸性多糖的提取分离工艺及其含量测定的简便方法.结果表明,以提取过药用有效成分后的杜仲叶为原料提取酸性多糖的较佳工艺条件是:1.0%的碱水在100 ℃下提取2次,每次2 h;提取液经大孔吸附树脂处理,多次醇沉等步骤分离的酸性多糖含量可达到41.46%.采用DNS法测定杜仲叶酸性多糖含量时水解时间控制在15～20 min,显色反应为10 min,检测波长为492 nm;在试验条件下,葡萄糖浓度在0.20～0.60 mg·mL-1范围内显色灵敏、稳定,线性关系良好;用该法测定杜仲叶渣酸性多糖含量时加样回收率为98.30%,RSD为1.76%;显色溶液在2 h内吸光度值比较稳定,能够完全满足测定工作要求,可以作为实验室测定多糖含量的简便、快捷、有效的方法.  相似文献   

三羟鹅膏毒肽的反相高效液相色谱分离纯化     

曹福祥  张志光  梁宋平 《中南林业科技大学学报(自然科学版)》2003,23(2):43-45

用反相高效液相色谱法,以0.02mol醋酸铵-乙腈为流动相和梯度洗脱模式,从灰花纹鹅膏菌中分离纯化出三羟鹅膏毒肽(amanin),产品纯度达96%以上,三羟鹅膏毒肽的分子量为903.3.  相似文献   

香菇多糖提取纯化研究   总被引：8，自引：0，他引：8  

卢成英  李国章  黄早成  郭晓辉  曹庸 《中国林副特产》2006,(4):5-7

用0.2mol/L三氯乙酸、0.2mol/L氢氧化钠、1.0mol/L乙酸、蒸馏水为提取溶剂,结合超声波处理等方法从香菇子实体中提取香菇多糖,提取液经甲醇除杂、沉淀处理得粗多糖。粗多糖用CTAB络合沉淀,沉淀物乙酸溶解后取上清再用甲醇沉淀,沉淀物冻干得纯化多糖。分析检测结果显示干香菇三氯乙酸提取的纯化多糖的含量高达93.1%、提取得率达0.324%。薄层分析表明,纯化香菇多糖由葡萄糖、甘露糖、半乳糖、木糖组成。纯化多糖用Sephadex G-100凝胶层析,洗脱液经苯酚-硫酸法检测为单一吸收峰,红外光谱显示其具有多糖类的特征吸收峰。  相似文献