排序方式： 共有53条查询结果，搜索用时 15 毫秒
31.
脾源鸭γ-干扰素基因的RT-PCR扩增、序列分析及表达 总被引：1，自引：0，他引：1
从丝裂原刺激的鸭脾淋巴细胞中提取基因组RNA，采用RT—PCR扩增鸭干扰素γ基因并进行了序列分析。序列分析结果表明，鸭干扰素1基因序列全长477bp，开放阅读框架内401个核苷酸，共编码132个氨基酸。将鸭γ-IFN基因定向克隆到原核表达载体pBV220中，重组质粒经酶切鉴定后，转化到宿主DH5a中，温度诱导表达，SDS—PAGE分析，表达产物与标记抗鸡干扰素抗体出JLDot—ELISA阳性反应。 相似文献
32.
银耳是我国特色的食用菌品种,其二型态转换与实际生产密切相关并制约着育种工作的进展,而丝裂原活化蛋白激酶（Mitogenactivatedproteinkinase,MAPK）途径在真菌二型态转换中具有重要调控作用。根据转录组测序数据克隆了银耳二型态编码MAPK的关键差异基因,包括TfFus3基因、TfSlt2基因和Kss1基因。分析表明,TfFus3、TfSlt2、Kss1基因的基因组DNA序列全长分别为1 721 bp、1 865 bp、1 903 bp,ORF序列全长分别为1 191 bp、1 281 bp、1 149 bp,分别含有10、12、16个内含子,编码396、426、382个氨基酸,相对分子质量在43.61 kDa～48.15 kDa间,理论等电点在5.82～6.89。序列同源性分析表明,TfFus3、TfSlt2、Kss1基因所编码的氨基酸序列分别与Kwoniella dejecticola、K.imperatae、Tremalla mesenterica中同源蛋白的相似性最高。结构域分析表明,TfFus3、TfSlt2、Kss1蛋白都具有典型的蛋白激酶保守结构域且同... 相似文献
33.
金黄色葡萄球菌肠毒素B(staphylococcal enterotoxins B,SEB)作为一种超抗原,一方面通过激活细胞内蛋白激酶C和髓样分化因子88活化核因子-κB,分泌炎性细胞因子,诱导机体炎症,另一方面活化丝裂原活化蛋白激酶（mitogen activated protein kinases,MAPKs）,由p38 MAPK、c-Jun氨基末端激酶和细胞外信号调节激酶途径诱导活化T细胞核因子和活化蛋白-1的表达,调控细胞的增殖、分化以及凋亡等免疫反应。因此,本文就SEB对动物免疫的影响及其作用机制进行综述。 相似文献
34.
胰岛素样生长因子1(IGF-1)主要通过与胰岛素样生长因子受体偶联或作用于胞内磷脂酰肌醇激酶（PI3K）等细胞内激酶,激活PI3K/苏氨酸蛋白激酶（AKT）和丝裂原活化蛋白激酶（MAPK）/细胞外调节蛋白激酶（ERK1/2）等信号通路,引发胰岛素抵抗,减少甘油三酯合成,正向调控糖脂代谢;此过程还需上调过氧化物酶增殖物激活受体γ表达,促进糖胺聚糖分泌,抑制叉头转录因子磷酸化,增加脂肪沉积,反向调控糖脂代谢。本文就IGF-1对动物糖脂代谢的调控机理及营养调控研究进展进行综述,旨在为调控动物糖脂代谢提供参考。 相似文献
35.
为探讨鼠李糖乳杆菌GR-1(Lactobacillus rhamnosus GR-1)防治奶牛子宫内膜炎的具体通路机制。本研究利用L. rhamnosus GR-1和大肠杆菌（Escherichia coli）处理原代培养的奶牛子宫内膜上皮细胞（Bovine endometrial epithelial cells,BEECs）,设对照组、E. coli攻毒组、L. rhamnosus GR-1单独处理组、L. rhamnosus GR-1预处理再加入E. coli组,然后利用细胞凋亡试剂盒检测细胞凋亡情况;采用Western blot技术检测p38、JNK、ERK蛋白磷酸化水平;利用MAPK特异性信号通路抑制剂抑制目的信号转导;通过Realtime qPCR技术检测肿瘤坏死因子-α(TNF-α)、白细胞介素-1β(IL-1β)、白细胞介素-6(IL-6)和白细胞介素-8(IL-8)mRNA的表达水平。结果显示,与E. coli攻毒组相比,L. rhamnosus GR-1预处理组的奶牛子宫内膜上皮细胞的凋亡数量显著降低（P<0.05）,且p-p38、p-JNK蛋白表达水平极显著... 相似文献
36.
番茄斑萎病毒(Tomato Spotted Wilt Orthotospovirus,TSWV)是番茄生长过程中发生严重的病毒病之一,严重威胁世界各地番茄的安全生产。为了研究植物诱导抗性在番茄抗TSWV中的防御作用,本研究以矮番茄为研究对象,使用苯并噻二唑(BTH)前处理番茄植株,研究BTH诱导的TSWV抗性,并分析BTH处理番茄植株后的发病严重度、病毒含量、植株抗氧化能力、质膜稳定性、细胞的解离情况,以及SlMAPK1、SlMAPK2和SlMAPK3的表达量。结果表明,0.1 mmol·L-1BTH前处理番茄植株能够诱导丝裂原活化蛋白激酶级联信号通路关键基因SlMAPK1、SlMAPK2和SlMAPK3的表达,提高细胞抗氧化酶活性及质膜稳定性,并减轻病毒对细胞的破坏,从而增强番茄植株对TSWV耐性,抑制TSWV在番茄植株中的复制,BTH前处理植株发病的严重度显著低于对照。本研究为诱导植物抗病毒研究奠定理论基础。 相似文献
37.
38.
通过检测家蚕未受精卵细胞中参与丝裂原活化蛋白激酶(MAPK)信号通路的几个关键基因的转录水平,分析热激诱导家蚕未受精卵发生孤雌生殖发育的分子机制。首先基于家蚕未受精卵RNA-seq数据分析表明,在家蚕孤雌生殖系和有性生殖系间,无论是经过热激诱导处理(46℃水浴18 min)或未热激处理的未受精卵,MAPK途径都存在差异表达的基因。实时荧光定量PCR(qRT-PCR)检测分析MAPK途径的mos、mek、erk和p38mapk基因在热激诱导前家蚕孤雌生殖系及有性生殖系未受精卵之间的转录水平差异:位于MAPK通路中上游的2个基因mos和mek,无论中系品系还是日系品系中,均表现为在孤雌生殖系表达极显著下调(P0.01);而位于MAPK通路下游的基因erk和p38mapk,其转录水平在中系品系的孤雌生殖系与有性生殖系间无显著性差异,但在日系品系中则表现为在孤雌生殖系中极显著下调(P0.01)。qRT-PCR检测分析家蚕孤雌生殖系未受精卵的4个基因在热激诱导孤雌生殖发育过程中的转录水平变化也表现出差异性:热激处理后mos和mek的转录水平极显著下调(P0.01),并维持在低水平;p38mapk则在热激处理前后保持稳定;而热激处理后erk基因的转录先显著升高(P0.05),而后逐步下降,并维持在热激处理前的水平。研究结果提示,MAPK途径可能参与了热激诱导家蚕孤雌生殖发育过程。 相似文献
39.
为进一步揭示朊病的治病机理,根据GenBank中的小鼠p38MAPK的核苷酸序列设计特异性引物,经RT-PCR技术从N2a细胞中扩增和克隆了该蛋白的309 bp核苷酸片段。测序鉴定后,将重组质粒10倍系列稀释后作为标准模板,通过实时荧光定量PCR方法,建立了p38MAPK标准曲线及其直线回归方程。所构建的标准曲线的相关系数r2=0.999,说明成功构建小鼠N2a细胞p38MAPK基因的标准质粒和标准曲线,为研究朊病的发病机理奠定了分子生物学基础。 相似文献
40.
采用脂多糖(LPS)诱导小鼠巨噬细胞RAW264. 7建立炎症模型,评价紫檀茋的抗炎作用。在LPS刺激的RAW264. 7细胞中,添加紫檀茋进行干预,采用实时荧光定量聚合酶链式反应(q PCR)方法检测细胞中炎症因子单核细胞趋化蛋白1 (MCP-1),白细胞介素6 (IL-6),白细胞介素1β(IL-1β),肿瘤坏死因子α(TNF-α)和诱导型一氧化氮合酶(iNOS)的mRNA表达量,Griess法检测培养基中一氧化氮(NO)的释放量,采用Western blotting方法进一步检测细胞中细胞外调节蛋白激酶(ERK),c-Jun氨基末端激酶(JNK),p38丝裂原活化蛋白激酶(p38 MAPK)和核转录因子κB-p65 (NF-κB p65)的蛋白磷酸化水平。结果发现:紫檀茋能够显著抑制炎症因子基因的表达和炎症介质NO的释放;紫檀茋+LPS组中ERK,p38和p65的蛋白磷酸化水平显著下降。紫檀茋能显著抑制炎症因子MCP-1,IL-6,IL-1β,TNF-α和iNOS的mRNA表达和NO的释放,其机制可能与阻断丝裂原活化蛋白激酶(MAPK)和NF-κB信号通路相关。 相似文献