草鱼呼肠孤病毒VP6蛋白在毕赤酵母中表达的初步研究   总被引：1，自引：0，他引：1  

苏岚  曾令兵  周勇  张辉  高正勇  张金凤 《淡水渔业》2012,42(6):38-42

根据GeneBank中草鱼呼肠孤病毒(grass carp reovirus,GCRV)104株VP6蛋白的全基因序列(HM234682)设计一对特异引物,以提取的GCRV-104核酸为模板,采用RT-PCR技术扩增VP6蛋白编码基因,并将其克隆到含强启动子AOXⅠ的毕赤酵母(Pichia pastoris)表达载体pPICZB上。重组酵母质粒pPICZB-VP6经SacⅠ线性化,电击转化到毕赤酵母KM71菌株中,Zeocin抗性平板上筛选高拷贝转化子。阳性转化子在30℃,0.5%(V/V)的甲醇添加量的条件下,连续诱导3 d,表达产物经SDS-PAGE和Western-Blotting检测,结果表明成功实现了GCRV-104 VP6蛋白在毕赤酵母中的胞内表达,重组VP6蛋白相对分子质量约46 000,与天然VP6蛋白相对分子质量接近,并且可与鼠抗草鱼GCRV-104 VP6蛋白的多克隆抗体特异性结合。  相似文献   

草鱼出血病的电镜观察   总被引：3，自引：0，他引：3  

郑德崇  黄琪琰  赵立勤  周孝康 《水产学报》1991,15(4):317-321

草鱼出血病是由呼肠孤病毒感染所致的急性传染病，由于病鱼小血管受损引起全身性出血，并造成内脏器官和体壁肌肉组织局灶性病变。电镜观察表明病变细胞内各种细胞器的数量较正常细胞显著减少，形态结构也遭损坏。质膜的三层结构模糊不清，及至解体消失。与机体代谢密切相关的粗面内质网、滑面内质网、线粒体和高尔基复合体的数量减少及结构受损，使蛋白质、糖类和脂质合成及分解等一系列细胞代谢活动不能正常进行，加速了病鱼死亡。  相似文献   

荆防败毒颗粒抑制新城疫Lasota株病毒的研究     

郭时金  王艳萍  沈志强  董林  张颖 《畜禽业》2010,(2):36-37

为探讨荆防败毒颗粒对NDV活性影响,采用鸡胚法研究了荆防败毒颗粒在鸡胚上对新城疫病毒的作用,即先接种病毒再接种药、先接种药再接种病毒2种方式,并设试验对照组。分别收取尿囊液测定血凝效价(HA)。结果表明,荆防败毒颗粒在2种方式中对NDV影响较强。为ND的临床防治提供理论依据。  相似文献   

安徽省克氏原螯虾白斑综合征病毒缺失区序列分析     

陈红莲  王永杰  程云生  宋光同 《水产科技情报》2018,45(4):206-210

为了解安徽省克氏原螯虾(Procambarus clarkii)白斑综合征病毒(white spot syndrome virus,WSSV)缺失区ORF23/24和ORF14/15的遗传差异及其与世界各地WSSV的遗传进化关系,2016年4月—8月,在安徽省6个市采集了9个养殖克氏原螯虾样本进行WSSV套式PCR检测,扩增病毒缺失区ORF23/24和ORF14/15,将获得的序列进行比较分析。结果显示,9个样本均在第1轮PCR扩增中获得阳性结果,其ORF23/24区与中国台湾株(TW)比对,缺失5 892 bp或9 310 bp,其ORF14/15区与WSSV祖先株(TH-96-Ⅱ)比对,缺失5138 bp或5948 bp。其中8个样本中WSSV与2008至2010年在江苏的克氏原螯虾中检测到的一些毒株的ORF23/24和ORF14/15区缺失情况相同,且这些病毒ORF14/15区均缺失5 138 bp,与TW株缺失情况相同。  相似文献   

禽流感病毒的分子生物学研究进展     

张平  边旭  刘桂林 《畜禽业》2008,(6):32-34

禽流行性感冒(avian influenza,AI,简称禽流感)是由A型禽流感病毒引起的禽类烈性传染病。作为被世界动物卫生组织(OIE)定为A类的传染病,AI不仅给世界养禽业造成了巨大的经济损失,而且对人类健康和生命安全构成了严重威胁。因此,AI已经成为人们关注的焦点。从病原基因组及其编码的蛋白质、致病力、变异性以及对AIV的分子诊断等角度就AIV的分子生物学研究作一综述,为防制AI提供理论基础,加深人们对AI的认识。  相似文献   

养殖对虾常见病害及应对措施     

文国樑  杨铿  李卓佳  陈永青 《海洋与渔业》2008,(10):28-29

由白斑综合症病毒（WSSV）感染引起的,发病前期虾须、尾扇发红,身体消瘦,摄食尚可,体表无其他异常。病虾漫游于水面,不久便下沉死亡,这时用显微镜检测病虾头胸甲中央部位,发现有雪花形、放射状白色斑纹。到了发病后期,大多数病虾残胃或空胄,头胸甲向外张开（鳃丝肿帐所致）且极易剥离,肝胰脏肿胀,外观模糊,手捻易碎,有红色组织液流出,甲壳与附肢上出现明显的白色斑纹,游泳缓慢无力,不久便死亡。  相似文献   

中山渔业科技入户推广技术（二）     

中山市海洋与渔业局 《海洋与渔业》2009,(7):20-21

溶氧量的高低对鱼的影响 溶解水中的氧气叫溶氧。水中溶氧的含量叫溶氧量,通常用“毫克／升”表示。鱼类是靠鳃吸收水中的溶氧而维持正常的生命活动,因此溶氧多少直接影响养鱼效果.鱼类对溶氧的需要量随鱼的种类、不同发育阶段、年龄大小而不同。在大多数养殖鱼类的主要生长期内,要求池水保持5～8毫克／升的溶氧,不能低于3毫克／升。  相似文献   

白斑综合征病毒环介导等温扩增快速检测方法的建立   总被引：1，自引：0，他引：1  

何琳  徐海圣  王美珍  戎华南 《水产学报》2010,34(4):598-603

根据对虾白斑综合征病毒(WSSV)囊膜蛋白VP28基因保守序列,利用Primer Explorerv 4.0软件设计了4条引物,建立了白斑综合征病毒环介导等温扩增快速检测方法,对反应温度和反应时间等参数进行了优化,同时将建立的LAMP检测方法与巢式PCR进行了比较分析。结果表明,LAMP最适反应在64℃恒温条件60min内完成,凝胶电泳呈现梯型条带;反应体系中添加SYBR Green I荧光染料后,绿色的阳性结果明显区别于橙色阴性结果。LAMP方法的最低检出限为100拷贝/μL,灵敏度较巢式PCR高100倍,而且LAMP方法在1h内即可完成检测,操作简单,无需复杂仪器,肉眼可直接观察检测结果。用建立的LAMP方法对临床发病南美白对虾样品进行了检测,结果表明,LAMP方法适合对虾白斑综合征病毒的现场快速检测。  相似文献   

抗草鱼出血病病毒药物的实验研究     

朱心玲  李爱华 《鱼病简讯》1989,(2):83-85

  相似文献   

鲤春病毒血症病毒糖蛋白基因在毕赤酵母中的分泌表达     

王树云  李江宇  高志强  谷强  蒲静  任彤  张伟  张旻  江育林  武勇  张利峰 《淡水渔业》2015,(4)

根据Gen Bank中鲤春病毒血症病毒(SVCV)糖蛋白全基因序列设计特异性引物,以SVCV欧洲株病毒核酸为模板,通过RT-PCR方法获得欧洲株SVCV-G基因,克隆至p PICZαA,构建p PICZαASVCV1540表达质粒。以限制性内切酶Sac I线性化p PICZαASVCV1540后通过化学法转化毕赤酵母感受态细胞X33和GS115,添加1%甲醇进行诱导表达,SDS-PAGE电泳分析表达产物显示其分子质量为70 ku。Western Blot分析显示该蛋白可以被SVCV山羊多抗识别,表明目的蛋白具有反应原性。  相似文献