不结球白菜谷胱甘肽还原酶基因NhccGR1的克隆与表达分析     

李彦肖  彭海涛  管苇  许小海  李英  侯喜林 《南京农业大学学报》2012,35(3):7-12

利用cDNA-AFLP技术,从芜菁花叶病毒(TuMV)侵染的不结球白菜(Brassica campestris ssp.chinensis Makino)幼叶中分离到1条编码谷胱甘肽还原酶的基因片段,通过电子克隆得到其cDNA全长为1 503 bp,编码501个氨基酸,命名为Nhc-cGR1。对该基因进行生物信息学分析,并利用实时定量PCR研究其在TuMV侵染和水杨酸(SA)、茉莉酸(JA)、乙烯(ET)诱导下的表达情况。结果表明:该基因作为病原相关基因参与了TuMV病害响应,并通过增加自身表达量来激活细胞内的信号转导途径,诱导各种防卫反应相关基因的表达;同时,SA和JA抑制该基因的表达,外施ET能诱导其正向表达。  相似文献   

响应面法优化大肠杆菌CD-2产偶氮还原酶培养基的条件   总被引：1，自引：0，他引：1  

杜光映辉  崔岱宗  张宁  赵敏  李国芳  古晓旭 《东北林业大学学报》2012,40(5):117-121

在摇瓶条件下,对大肠杆菌CD-2发酵生产过程中的主要培养基组成对产偶氮还原酶的影响进行了研究。根据响应面法,以单因子试验结果为基础,利用Plackett-Burma设计对影响E.coli CD-2产偶氮还原酶的相关因子进行了评估,并筛选出具有显著效应的3个因子:pH值、MgCl2、Na2HPO4。用最陡爬坡试验逼近以上3个因子的最大响应区域后,采用design expert 7.0统计软件的Box-Behnken设计以及响应面分析法,确定E.coli CD-2优化后的最佳培养基组成:甘露醇2 g.L-1、氯化铵3 g.L-1、接菌量5%、pH值为6.5、KH2PO42 g.L-1、Na2HPO46 g.L-1、MgCl20.99 g.L-1,优化后的酶活达到2.429 U.mL-1,是初始酶活的2.85倍。从而增强了E.coli CD-2所产的偶氮还原酶实际应用于污水处理的能力。  相似文献   

人参出苗期4种氧化还原酶的活力变化     

邢楠楠  赵雨  刘宏  陈雨  张惠 《安徽农业科学》2012,(13):7715-7717

[目的]研究5年生人参中4种氧化还原酶在出苗期的活力变化。[方法]采用中性磷酸缓冲溶液提取粗酶液,并应用紫外分光光度法分别测定过氧化物酶(POD)、过氧化氢酶(CAT)、多酚氧化酶(PPO)和抗坏血酸过氧化物酶(APX)的活力。[结果]人参幼苗活性氧清除代谢水平高于根部。幼苗POD与PPO酶活力先下降后上升;根部POD酶活力变化呈缓慢上升趋势,PPO酶活力变化不明显;幼苗CAT酶活力在整个出苗期始终保持上升趋势;幼苗与根部APX活力以上下波动形式变化。[结论]人参出苗期的4种氧化还原酶活力变化不同,可作为人参出苗期幼苗形态建成不同阶段的生理指标。  相似文献   

貂、狐亚硝酸盐中毒防治     

周清毅 《畜牧兽医科技信息》2009,(3)

谷物和蔬菜类都含有一定量的硝酸盐,在肥沃的士壤或施化肥过量的土壤上生长的谷物,硝酸盐含量更高些.含硝酸盐的青绿色饲料若调制不当,在硝酸盐还原酶的作用下,可使硝酸盐转化为亚硝酸盐.(1)青饲料(如菜类)受害虫残伤后;在一定温度和湿度条件下,还原性细菌迅速生长繁殖,很快把硝酸盐还原为亚硝酸盐,食用这种青绿饲料易引起中毒.(2)小火焖煮饲料在25～37℃的条件下,持续24～48h后,饲料中的硝酸盐极易还原成亚硝酸盐.饲喂此种饲料中毒的机会较多.(3)日粮搭配不合理草食动物瘤胃内的细菌也能将硝酸盐还原成亚硝酸盐而引起中毒.  相似文献   

不同施肥水平对小麦生长期土壤氧化还原酶活性的影响   总被引：2，自引：0，他引：2  

刘磊  谷洁  高华  张社奇  夏雪  解媛媛 《水土保持通报》2010,30(6):12-16

在有机肥和氮肥配施条件下,设置不同有机肥和氮肥的施肥梯度,研究了小麦各生育期土壤氧化还原酶活性(包括过氧化氢酶、脱氢酶和多酚氧化酶活性)的动态变化趋势。结果表明,与单施有机肥或单施氮肥相比,有机肥和氮肥配施条件下,土壤过氧化氢酶和脱氢酶活性均有明显提高。在有机肥用量22500kg/hm2、氮肥用量120kg/hm2条件下,土壤过氧化氢酶和脱氢酶活性均达到最高,分别为1.1750ml/(g.20min)和15.7931ug/(g.d)。但是,随着肥料的施加,土壤多酚氧化酶活性降低,当有机肥用量和氮肥用量达到最大时,多酚氧化酶活性降至最低。  相似文献   

丙酸钠对肥育猪肝脏HMG-CoA还原酶活性和mRNA丰度的影响     

屠友金  胡彩虹  江霞  孙海香 《中国畜牧杂志》2004,40(7):27-29

将 96头体重约 4 5 .4kg的杜长加肥育猪分成 4组 ,分别饲喂添加 0 ,0 .5 % ,1.0 %和 1.5 %丙酸钠的饲粮 4 5d ,每组设三个重复 ,每个重复 8头。结果表明 :(1)添加 1.0 %和 1.5 %丙酸钠使血清中总胆固醇、低密度脂蛋白胆固醇显著降低 ,使高密度脂蛋白胆固醇 /低密度脂蛋白胆固醇的比率显著提高 ,添加 1.5 %丙酸钠使血清中极低密度脂蛋白胆固醇显著降低 ;(2 )添加 1.0 %和 1.5 %丙酸钠使肝脏中 β 羟基 β 甲基戊二酸单酰辅酶A(HMG CoA)还原酶活性和mRNA丰度显著降低。结果提示 :丙酸钠可以降低肝脏HMG CoA还原酶mRNA丰度和酶活性 ,有效地降低肝脏胆固醇的合成 ,从而改善肥育猪胆固醇代谢。  相似文献   

猪肝脏HMG-CoA还原酶mRNA表达产物的RT-PCR定量检测   总被引：1，自引：0，他引：1  

江霞  胡彩虹  许梓荣  郑祝英 《上海畜牧兽医通讯》2005,(4):20-21

众所周知,人体从食物中摄入过量的胆固醇,会使血液中胆固醇浓度升高,高胆固醇血症是动脉粥样硬化和冠心病的重要致病因素之一。猪为六畜之首,猪肉占我国肉类消费总量的85％以上,但猪肉中胆固醇含量较高（1g五花肉含胆固醇0．9～1．1mg）,因此很有必要开展低胆固醇含量猪肉的研究。  相似文献   

小麦品种“陕253”PDI基因的克隆、原核表达及蛋白纯化     

臧闻  董剑  高翔  陈其皎  王延鹏  李志业  史红飞 《麦类作物学报》2011,31(5):799-804

为进一步研究控制小麦蛋白二硫键形成的关键蛋白即蛋白质二硫键异构酶（PDI）,运用RT-PCR方法克隆出小麦品种＂陕253＂PDI基因的cDNA序列,基因登陆号为HQ911363。序列分析表明,HQ911363全长为1 539 bp,编码512个氨基酸,含有PDI典型的异构酶活性的催化位点-CGHC-和内质网驻留信号肽-KDEL-。构建该基因的原核表达载体,在宿主菌E.coliBL21（DE3）中经IPTG诱导表达融合蛋白,并对表达蛋白进行了纯化。SDS-PAGE及Western-blot检测证实融合蛋白诱导表达并纯化成功。  相似文献   

保幼激素拮抗物KK-42对凡纳滨对虾HMGR表达的抑制   总被引：1，自引：1，他引：0  

夏西超  王文锋  李昕  宁黔冀 《水产学报》2010,34(8):1198-1203

为研究保幼激素拮抗物KK-42促生长的分子机制,实验克隆出甲基法呢酯(MF)合成的关键酶——3-羟-3-甲基-戊二酰还原酶A(HMGR)部分mRNA序列,并研究该基因时空表达以及KK-42对其表达的影响。将体长3.5~5.0 cm凡纳滨对虾幼虾随机分为2组,分别用1.95×10^-4 mol/L的KK-42溶液或不含KK-42的溶液浸泡处理1 min,之后在相同条件下常规饲养。不同组织中HMGR mRNA水平定量分析采用realtime PCR,血淋巴中MF滴度测定采用正相高效液相色谱法。结果显示,HMGR mRNA水平在大颚器官(MO)最高,其次是眼柄,肌肉和肝胰腺水平最低。在实验观察期间,眼柄与MO两种组织中HMGR的表达模式明显不同,前者各时间点mRNA水平变化较小,无统计学差异(P>0.05);后者mRNA含量分别在第1、7天显著高于第0天;实验期间血淋巴MF滴度逐渐升高。KK-42处理可显著抑制HMGR表达,但眼柄和MO中HMGR转录的下调模式仍不相同,前者mRNA水平在各时间点之间没有明显差异(P>0.05);而在MO下调幅度出现明显波动,其中在第1和7天,mRNA含量分别下降了82.5%和90.7 %;血淋巴MF滴度逐渐下降。结果表明,KK-42可显著抑制凡纳滨对虾多种组织(尤其是MO和眼柄)HMGR转录,降低血淋巴MF滴度,这可能是其促生长的机制之一。  相似文献   

膜荚黄芪查尔酮还原酶基因的克隆与表达分析     

包蕊  刘俊频  袁元  于洋  全雪丽  吴松权 《北方园艺》2019,(6):141-146

从膜荚黄芪中克隆了CHR基因,GenBank登陆号为KY086286(AmCHR),AmCHR全长cDNA为1 173 bp,开放阅读框为957 bp,编码318个氨基酸,其分子量为35.58 kDa,等电点为6.26。生物信息学分析表明AmCHR蛋白与豆科植物CHR同源,无信号肽,定位于细胞质。实时荧光定量PCR和高效液相色谱分析结果显示AmCHR在根、茎、叶中的表达水平与毛蕊异黄酮葡萄糖苷的含量变化一致。该研究从膜荚黄芪中克隆了1个新的AmCHR基因,推测AmCHR的表达与膜荚黄芪毛蕊异黄酮葡萄糖苷的积累密切相关。  相似文献