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31.
聚合酶链反应(PCR)又称无细胞克隆技术,是一种根据生物体内DNA复制的某些特点而设计的在体外对特定DNA序列进行快速扩增的新技术。近几年来,随着PCR技术的迅速发展及世界各国对畜禽传染病的日益重视,PCR技术在兽医实验室诊断中的应用已屡见不鲜。本文仅概述其在畜禽细菌性疾病诊断和研究中的应用。1沙门氏菌Nguyen根据肠炎沙门氏菌C7具有特异性的序列(2.1kbHingIII片断)设计出1对引物,从23种沙门氏菌中扩增出2.0kb的产物,其它19种肠道细菌对照没有扩增产物。李景鹏等根据H1基因序列设计1对引物扩增H1基… 相似文献
32.
33.
用RT—PCR技术检测蓝乱病病毒的研究 总被引:1,自引:0,他引:1
蓝舌病病毒非结构蛋白NS1基因在各型中具有高同源性,可作为群特异检测的依据。采用NS1基因中210bp的区段作为PCR扩增模板,经逆转录酶合成第一股cDNA后,再进行PCR扩增。结果对BTV可扩增出特异片段,而鹿流行性出血病病毒和茨城病病毒则不出现扩增。 相似文献
34.
35.
PCR方法鉴别肉骨粉中的动物成份种类 总被引:9,自引:0,他引:9
为防范疯牛病传入我国,有必要鉴别肉骨粉中动物成份的种类。针对牛、羊、猪和鸡四种动物的特异性核苷酸序列,分别选用和设计了四对特异性引物,用试剂盒提取四种动物的肉骨粉或者处理过的肉组织中的DNA,然后进行PCR扩增,所扩增的目的片断大小分别为271bp、199bp、196bp、148bp,运用PCR技术建立了鉴定这四种动物源性成分的方法。结果分别扩增出四种动物的特异性条带,证明该PCR方法具有很高的特异性和敏感性,而且成本低廉,简便易行,因此可以作为鉴别肉骨粉种类的常规方法。 相似文献
36.
二温式多重PCR同时检测鸡的6种呼吸道病病原方法的建立 总被引:8,自引:1,他引:7
设计了6对分别针对鸡传染性支气管炎病毒(IBV),禽流感病毒(AVI)、鸡毒素霉形体(MG)、鸡传染性喉气管炎病毒(ILTV)、新城疫病毒(NDV)和滑液霉形体(MS)的特异性引物,根据反转录滞酶链反应(RT-PCR)和多重PCR原则,优化建立了一次PCR反应同时检测6种禽呼吸道病原的二温式多重PCR。该方法可同时扩增出6条区段大小与设计相符符的特异性片段,即IBV 1720bp,AIV 1050bp,ILTV647bp,NDV310bp,MS207bp,对人工感染鸡临床样品检测结果证明,该方法可用于临床诊断。 相似文献
37.
38.
RT-PCR方法快速诊断猪传染性胃肠炎 总被引:7,自引:0,他引:7
根据猪传染性胃肠炎病毒(TGEV)标准毒株(Purdue-115)的ORF6(N基因)的基因序列,设计俣成了一对引物Li01/Li02用反转录聚俣酶链反应(RT-PCR)技术对发病猪的粪便进行检测。结果得到与预期大小相一致的约1174bp(N基因)的PCR产物,与从参照毒株TGEV TH-98扩增出的片段大小相一致。进一步用限制性内切酶进行分析,发现从发病猪火花名扩增出的N基因与参照毒株TH-98株具有相同的限制性内切酶图谱,从而证实本病例致病病毒为TGEV。 相似文献
39.
40.
PCR技术检测猪伪狂犬病毒及其潜伏感染部位的研究 总被引:22,自引:1,他引:21
本研究合成了伪狂犬毒糖蛋白gp50基因引笺,该引物能够扩增糖蛋白gp50基因中434-651之间的217bpDNA片段,该片段含 SalI酶切位点,应用引物对几种不同的伪狂犬病毒株多聚酶链式反应扩增结果全为阳性。 相似文献