机械分割的小鼠桑椹胚和囊胚的发育能力     

王周吉  Alan Trounson 《东北农业大学学报》1992,(3)

利用机械方法二等份分割小鼠的桑椹胚、早期囊胚和晚期囊胚,并在体外培养分割的半胚到晚期囊胚。将这些囊胚移植到假孕受体鼠子宫内以评价他们附植后发育的能力。在体外培养中发现,囊胚期分割的胚胎比桑椹胚期分割的胚胎有较高的成活率。通过附植前胚胎细胞数量分析得知,囊胚期半胚的细胞数量大约是对照组的一半,但内细胞团细胞与整个胚胎细胞的数量比不变。虽然从半胚发育到囊胚期的胚胎附植率仅略低于对照组,但半胚形成胎儿的能力却显著低于全胚。组织学分析表明,附植后的这种低成活率现象是由于缺乏卵柱发育造成的,而此卵柱则与半胚中的内细胞团的细胞数量减少有关。移植到第3天假孕受体鼠中的半胚,附植后的发育情况明显地比移植到第4天受体中的好。  相似文献   

玻璃化法冷冻保存牛体外受精胚胎   总被引：1，自引：0，他引：1  

阳年生  卢克焕 《广西农业生物科学》1992,11(3):102-107

本研究探讨了玻璃化冷冻保存对牛体外受精胚胎冷冻后存活的影响。7日龄的胚胎在10％甘油＋20％丙二醇的玻璃化冷冻液中，室温下停温10min，其孵化率为86．6％，与对照的83．2％相比，无明显影响（P＞0．05）。然10％甘油＋20％乙二醇，25％甘油＋25％乙二醇及25％甘油＋25％丙二醇均明显降低胚胎的孵化率（P＜0．01）。7日龄胚胎经10％甘油及10％甘油＋20％乙二醇依次平衡5min后,再置于25％甘油＋25％乙二醇的冷冻液中，20s内投液氮玻璃化冷漠，冻后孵化率达80．8％，明显高于其它平衡方法。冷冻液为25％甘油＋25％乙二醇的胚胎冻后总孵化率为72．1％，明显高于25％甘油＋25％丙二醇的60．9％。这些结果表明：牛胚胎玻璃化冷冻保存的成功率在很大程度上取决于防冻剂的种类、浓度及平衡方法。  相似文献   

OPS法玻璃化冷冻牛卵母细胞和囊胚   总被引：13，自引：5，他引：13  

谭世俭  Henrik Callesen 《广西农业生物科学》2002,21(1):3-7

本文报道了利用拉细开口型细管 (Open Pulled Straw,OPS)方法进行玻璃化冷冻保存体外成熟(IVM)的牛卵母细胞及体外生产 (IVP)的牛囊胚的实验结果。实验 1的牛卵母细胞冷冻处理分 2组 ,组 1(G1 )是将卵母细胞在 IVM2 1 h时去除部分卵丘细胞后马上进行冷冻处理。组 2 (G2 )卵母细胞在 IVM6h时去除部分卵丘细胞 ,然后继续培养至 2 2 h冷冻 ;冷冻后的卵母细胞在液氮中保存 0 .5～ 2 h后解冻再继续 IVM1 h后与正常 IVM2 4h的对照组卵母细胞一起进行体外受精 (IVF)处理。实验 2则冷冻了来自IVP的 6、 7日龄的牛囊胚。结果显示 ,G1的卵母细胞 IVF后 8d的囊胚率 (2 2 .8% ,2 6/1 1 4)和孵化囊胚率 (1 4.9% ,1 7/1 1 4)都极显著地高于 G2 (分别为 2 .9% ,5 /1 71和 0 .5 % ,1 /1 71 ,P<0 .0 0 1 ) ;但两处理组的受精卵裂率差别不大 (分别为 48.2 %和 41 .5 % ,P>0 .3 )。冷冻第 6d和第 7d的体外囊胚 ,其冻后存活率和囊胚孵化率分别为 92 .7%、 89.2 %和 83 .6%、 66.7%。结果表明 ,利用 OPS法玻璃化冷冻经体外培养成熟的牛卵母细胞及体外生产的牛囊胚均能获得良好的效果  相似文献   

电脉冲激活对体外成熟猪卵母细胞卵裂率和囊胚率的影响   总被引：6，自引：0，他引：6  

田见晖  刘国世  曾申明  朱士恩  蔡元  刘焕营  张忠诚  吴常信 《农业生物技术学报》2004,12(4):401-407

探索了电脉冲结合细胞松驰素B(CB)、放线菌酮(CHX)以及6-二甲基嘌呤(DMAP)等化学物质,对猪卵母细胞激活后发育的影响.在电脉冲激活时,0.6 kV/cm和1.3 kY/cm,80μs,1次电激活后,(1)用2 mmol/LDMAP处理6 h的卵裂率分别为(60.39±6.71)%和(60.35±8.95)%,差异不显著(P＞0.05),囊胚率分别为(9.51±5.93)%和(14.53±3.38)%,差异显著(P＜0.05);(2)用7.5μg/mL CB+10μg/mL CHX处理6 h的孤雌胚,卵裂率[(1.82±10.76)%vs(58.50±8.33%)]和囊胚率(8.91±4.37)%vs(14.53±3.38)%]均存在显著差异(P＜0.05).卵母细胞经1.3 kV/cm、80μs和单次电脉冲激活后,分别用7.5μg/mL CB、10μg/mL CHX、2 mmol/L DMAP、7.5μg/mL CB+10μg/mLCHX和7.5μg/mLCB+2 mmol/LDMAP处理2～8 h,结果表明CB处理4 h,CHX、CB+CHX和CB+DMAP处理6 h,DMAP处理8 h的卵裂率和囊胚率高于其它时间处理组.在电脉冲/CB、CHX、DMAP、CB+CHX和CB+DMAP 5种激活方法中,CB+CHX和CB+PMAP的卵裂率和囊胚率分别为(78.46±8.46)%、(33.13±7.84)%和(75.84±10.61)%、(39.12±7.15)%,囊胚率显著高于其它各组(P＜0.05).  相似文献   

一种简单的分离猪囊胚内细胞团的方法   总被引：4，自引：0，他引：4  

李明  李永海  张东  侯毅  孙青原  王维华 《农业生物技术学报》2004,12(3):349-350

本研究尝试了酶消化法分离猪囊胚内细胞团(ICM)的方法，并初步测定了分离到的ICM形成原代类胚胎干(embryonic stem，ES)细胞集落的能力。  相似文献   

山羊卵母细胞的显微受精及胚胎培养   总被引：2，自引：0，他引：2  

赵晓娥  鲁进  刘凤军  王勇胜  武浩  李裕强  张涌 《农业生物技术学报》2005,13(4):507-511

采用胞质内精子注射（ICSI）构建山羊显微受精胚，在两种培养液（CR1aa和SOFaa）与颗粒细胞共培养条件下，分别添加不同浓度的牛卵泡液（BFF）和胎牛血清（FBS），研究其对山羊卵母细胞显微受精胚体外发育的影响。结果表明：①在CR1aa培养液与颗粒细胞共培养条件下，添加10％BFF的ICSI胚的囊胚发育率最高（22．2％），显著高于添加5％（13．1％）和15％（2．7％）组。②在SOFaa培养液与颗粒细胞共培养条件下，添加10％BFF的ICSI胚的囊胚发育率（25．1％）显著高于添加5％（12．9％）和15％（3．0％）组。③在两种培养液中，分别添加10％BFF和10％FBS，ICSI胚的囊胚率分别为22．6％和26．9，5．8％和6．1％。表明：CR1aa和SOFaa两种培养液都适宜山羊的1CSI胚体外培养；在早期胚胎培养中，添加10％BFF可显著提高ICSI胚的囊胚发育率：添加10％BFF比添加10％FBS对提高早期胚胎培养质量更为有效。  相似文献   

盐度对石磺胚胎发育的影响     

沈和定  陈汉春  陈贤龙  冉福  施志仪  熊柳平  王飞 《上海海洋大学学报》2006,(3):297-302

28℃水温下,实验室内比较观察了盐度为0、3、69、、152、0、30、40八组水体中石磺(Onchidiumsp.)受精卵的胚胎发育状况,并对囊胚期的胚胎进行了低盐度(0、3、6、9)培育试验。结果表明:石磺受精卵在不同盐度水体中的胚胎发育状况有很大的差异,盐度0组中的胚胎畸形率高达97%±2%,盐度3组中的胚胎畸形率达75%±2%,盐度30组中停止发育的胚胎(即单卵黄球胚胎)比例为60%±4%,盐度40组中停止发育胚胎的比例达98%±2%,盐度6、91、5、20组的胚胎能正常发育,孵化率均在90%以上;石磺卵群孵化的适宜盐度范围为6~20。囊胚期的胚胎适应低盐度的能力稍强,盐度0组中的囊胚期胚胎分裂球解体,不能正常发育;盐度3、6、9组中的囊胚期胚胎能正常发育。盐度为23.4和27.4的自然海水环境中,石磺胚胎也能正常发育和孵化。  相似文献   

解冻后的精子贮存不同温度和不同时间对牛体外受精的影响     

陈鸿冰  卢克焕 《广西农业生物科学》1993,(1)

探讨了冷冻精液解冻后,精子不同贮存温度和时间对牛体外受特的影响。试验1表明,精子放置在25℃的环境下,其分裂率和囊胚率较放置在4℃和39℃的高;试验2,精子在25℃的环境下放置48h 后,其分裂率较放置8h 和24h 的显著降低,但其囊胚率无显著差异。因此,精子在25℃的环境温度下放置48h,仍可用来作体外受精。  相似文献   

鸡胚胎体外操作技术的研究现状和进展（续）     

李碧春  钱菊汾 《中国家禽》2001,23(2):33-34

5嵌合体鸡的生产　　嵌合体制作最早主要用于发育生物学、细胞遗传学等学科的理论研究。目前，禽类嵌合体的制作中作供体细胞用的囊胚层细胞(BC)和原生殖细胞(PGCs)可以代替受精卵和早期胚胎用于体外遗传操作，已成为禽类转基因研究的一个热点。同时，BC和PGCs还可以在体外进行培养和冷冻保存。基本原理是经过遗传操作的BC细胞或PGCs细胞作供体，嵌合到受体胚胎中。如果是嵌合在生殖细胞，则该嵌合体性成熟后可产生一定比例经过遗传操作的配子。　　有关鸡嵌合体方面的报道及鸡嵌合体制作方法、嵌合体的嵌合程度的判断以及怎样提高嵌…  相似文献   

胚胎干细胞的体外培养及应用   总被引：1，自引：0，他引：1  

斛智莲 《黑龙江畜牧兽医》2001,(11):31-32

来自着床前的囊胚和早期胚胎的胚胎干细胞(ES细胞)是一类具有发育多能性和全能性的细胞。它在生命科学的各个领域产生非同凡响的影响。文中就ES细胞的体外培养，诱导分化及其在畜牧业、生命科学的基础学科研究和医学领域的应用简要综述。  相似文献