染色体研究的新方法与新进展     

龙华 付元帅陈戟  赵刚刘江东  陈建武余其兴 《长江大学学报》2006,3(1):179-184,208

从染色体显微分离与显微克隆、染色体连锁图谱、染色体原位杂交、染色体涂染、染色体的基固定位以及染色体的片段转移等几个方面，分别综述了染色体研究的斯方法和新进展，并展示了分子细胞遗传学的发展前景。  相似文献   

莴苣花叶病毒北京分离物基因组3′末端序列分析     

尚巧霞  向海英  韩成贵  李大伟  于嘉林 《中国农学通报》2007,23(7):88-88

笔者通过RT-PCR方法对LMV北京分离物（LMV-BJ）基因组3＇端1620nt的核苷酸片段进行了克隆和序列分析（GenBank登录号为EF423619）。所获片段含有NIb基因3＇端的574nt,编码NIb C-端190个氨基酸;完整的CP基因,全长为834nt,编码一个由277个氨基酸组成的分子量约为30kDa的结构蛋白;3＇非编码区含有209nt。通过序列分析软件将LMV-BJ与已经报道的法国分离物O（X97704）、法国分离物E（X97705）,美国分离物（X65652）,巴西分离物（AJ278854）和余杭分离物（AJ306288）基因组3＇末端和CP基因的核苷酸序列与氨基酸序列分别进行了比较。  相似文献   

捻转血矛线虫雌、雄成虫galectin基因的克隆、鉴定及序列分析   总被引：4，自引：0，他引：4  

李春华  李祥瑞  魏晓锋  徐立新 《农业生物技术学报》2005,13(1):86-91

根据GenBank中发表的捻转血矛线虫(Haemonchus contortus)雌、雄混合虫体的半乳糖结合凝集素(galectin)基因序列设计1对引物，分别以山羊捻转血矛线虫雌、雄成虫的总RNA为模板，采用RT-PCR技术，均扩增出约880bp的产物。将其分别克隆入pMD18-T载体，经双酶切鉴定、PCR鉴定及DNA序列测定，表明扩增片段为捻转血矛线虫galectin cDNA。经核苷酸序列、氨基酸序列和抗原性比较分析发现，雌、雄成虫的galectin基因存在一定差异，在开放阅读框内二者有3个核苷酸的差异，2个氨基酸的差异。与已发表的其它galectin相比，雌、雄成虫的galectin与Hco-ga1-3b的同源性最高。二级结构及蛋白质特性预测分析发现，雌、雄成虫的galectin均具有α螺旋、β折叠和β转角，雌虫的galectin蛋白比雄虫的分别多出一个α螺旋和β折叠区。二者的亲水性存在一定差异，但抗原性几乎无差异，且抗原表位比较集中。如同其它galectin一样，在雌、雄成虫的galectin蛋白的N末端不存在信号肽序列。  相似文献   

利用AFLP指纹技术鉴定桑树品种     

丁农  钟伯雄  张金卫  吴卫成  赵丽华  周丽 《农业生物技术学报》2005,13(1):119-120

传统的桑树品种鉴定是以形态学标记为依据，大多数性状易受环境条件的影响，而且，形态学性状常常局限于某一生命时期，给品种鉴定造成了一定的限制。AFLP分析的基本原理是选择性扩增基因组DNA酶切片段。由于不同基因组DNA的酶切位点存在差异，因而产生了扩增片段长度的多态性(Vos et al．，1995)。它既有RFLP的可靠性，又有RAPD的方便性，  相似文献   

小菜蛾类钙粘蛋白cDNA片段的克隆和序列分析     

杨峰山  张友军  张文吉  吴青君  徐宝云  邱德文 《农业生物技术学报》2005,13(3):396-397

鳞翅目昆虫中肠刷状缘膜囊泡（brush border membrane vesicles，BBMV）有两类能与Cryl毒素结合的受体蛋白，一类是氨基肽酶N（APN），另一类是类钙粘蛋白（cadherin-like protein）。Gahan等（2001）报道了烟芽夜蛾中肠类钙粘蛋白基因失活导致了烟芽夜蛾（Heliothis viresce）对Bt毒素CrylA产生了高抗性，引起了各国科研人员的关注。近年来，先后有多种昆虫类钙粘蛋白基因被克隆和测序（Gahan et al．，2001：Morin et al．，2003）。  相似文献   

36个水稻骨干系的基因组分析及其遗传育种学意义——Ⅱ.利用不同方法对稻种分类的研究     

王松文 《天津农学院学报》1997,(3)

本文选取３６个栽培稻、普遍野生稻骨干系进行了ＲＦＬＰ聚类，并对分子标记法、程氏指数法和杂交亲和力法进行了比较分类。研究结果表明，三种分类方法对水稻材料的分类是基本一致的．采用不同方法对水稻材料进行整理分类有利于对水稻材料的深刻理解与认识，通过ＲＦＬＰ聚类树状图、籼粳性倾向图及基因型的综合分析，明确了中国普通野生稻可分偏粳型与原始普野型，国外普通野生稻包括编籼型与原始普野型。而且中国原始普野型相对倾粳，国外原始普野型相对倾籼，中国普通野生稻与国外普通野生稻是遗传分化显著不同的两种类型。  相似文献   

鸡痘病毒基因组DNA复制非必需片段的鉴定   总被引：1，自引：0，他引：1  

彭大新  王志亮  张如宽  文其乙  刘秀梵 《扬州大学学报(农业与生命科学版)》1995,(4)

将中国鸡痘病毒鹌鹑化弱毒株（２８２Ｅ４）蚀斑纯化，在ＳＰＦ鸡胚成纤维细胞上增殖后，经超声波裂解，蔗糖梯度离心得到纯化病毒，以蛋白酶Ｋ消化，酚：氯仿、氯仿和水饱和乙醚抽捉，乙醇沉淀，得到ＦＰＶ基因组ＤＮＡ，后用ＥｃｏＲｌ消化，随机克隆到ｐＵＣ１８质粒中。限制性内切酶片段电泳分析结果表明，克隆到１０个不同大小的片段，根据酶切图谱分析，选取克隆或亚克隆后的单一酶切位点，插入标记基因（Ｐ１１一ＩａｃＤ筛选出３个复制非必需片段。为进一步构建表达外源片段重组质粒载体创造了良好的条件。  相似文献   

香蕉果实expansin cDNA克隆及序列分析   总被引：6，自引：0，他引：6  

陆旺金 《华南农业大学学报》2003,24(3):40-42

提取成熟香蕉果肉的RNA并分离mRNA，以mRNA反转录合成cDNA，以该cDNA为模板，设计expansin的简并引物，进行RT-PCR(退火温度为50℃)，得到的扩增产物纯化后与pGEM-T-Easy载体连接，转化大肠杆菌，任意挑选2个阳性克隆，进行序列分析，结果得到2个序列相同的expansin的cDNA基因片段，命名为MA-Exp3(以示与已登录的香蕉MA-Expl和MA-Exp2的区别)，MA-Exp3中存在expansin基因的保守区域，即8个半胱氨酸残基和3个色氨酸残基，它编码177个氨基酸，与MA-Exp1的核苷酸同源性为74．2％，氨基酸同源性为86．4％。  相似文献   

应用半套式RT-PCR技术诊断番鸭呼肠孤病毒病   总被引：1，自引：0，他引：1       下载免费PDF全文

林锋强  胡奇林  陈少莺  欧阳岁东  陈仕龙  朱小丽  程晓霞 《华南农业大学学报》2007,28(2):107-109

参考GenBank中番鸭呼肠孤病毒(muscovy duck reovirus,MDRV)S1基因序列设计并合成3条引物C1、HP11和HP12,组成半套式RT-PCR,扩增片段为300 bp.应用该半套式RT-PCR对MDRV、禽呼肠孤病毒(ARV)、番鸭细小病毒(MPV)、鹅细小病毒(GPV)、鸡胚成纤维细胞(CEF)和番鸭胚成纤维细胞(MDEF)培养物进行扩增.结果仅能从MDRV中扩增出300 bp特异片段,而不能从ARV、MPV、GPV、CEF和MDEF细胞培养物中扩增出特异片段;该方法检测灵敏度为1 fg核酸,重复性好.对人工感染和临床疑似病例用病毒分离和半套式RT-PCR进行检测,2种方法符合率为100%.因此,该半套式RT-PCR可以用于番鸭呼肠孤病毒病的临床快速检测.  相似文献   

重庆地区柑桔衰退病毒组群分析   总被引：4，自引：1，他引：4  

周彦  王雪峰  唐科志  周常勇 《西南大学学报(自然科学版)》2004,26(4):420-422,451

柑桔衰退病毒(CTV)存在着许多生物学特性不同的株系。通过铲除感染强毒株植株或利用弱毒株交叉保护的方式来防治柑桔衰退病都需要对CTV株系进行准确、可靠的鉴定。根据对CTV衣壳蛋白基因(CPGs)的限制性片段长度多态性(RFLP)和单链构象多态性(SSCP)分析,发现在重庆地区CTV主要以CP/HinfⅠRFLP第1,3和6组群为主,并且在田间以多株系混合感染为主?  相似文献