基于II型毒素–抗毒素系统构建ε–聚赖氨酸合成酶的链霉菌稳定表达载体     

周奕阳  李鹏  谭之磊  邓子新  贾士儒  欧竑宇 《湖南农业大学学报(自然科学版)》2019,45(2)

鉴于ε–聚赖氨酸収酵过程对抗生素压力条件的依赖,尝试基于Ⅱ型毒素–抗毒素系统(relBE2sca)构建无选择压力下稳定表达ε–聚赖氨酸的淀粉酶产色链霉菌表达系统:将抗毒素基因relB2sca与ε–聚赖氨酸合成酶基因pls克隆至表达载体,幵导入淀粉酶产色链霉菌pls缺失突变株,将毒素基因relE2sca整合至淀粉酶产色链霉菌的染色体(突变株YY3),获得包含ε–聚赖氨酸稳定表达的突变株YY1。经过多次传代,相比对照组,在不含抗生素压力条件下,突变株YY1依然能够稳定地合成ε–聚赖氨酸。毒素蛋白RelE2sca的表达会导致变铅青链霉菌、阿维链霉菌和链霉菌FR–008等常用链霉菌异源表达宿主的死亡,提示基于Ⅱ型毒素–抗毒素系统(relBE2sca)可作为一种通用的遗传标记。  相似文献   

马疱疹病毒1型主要毒力基因分析及TK基因缺失载体的构建     

范斌  陈卓  刘建华  鲍子磊  胡月  贾钦瑞  王雪竹  冉多良 《中国畜牧兽医》2018,45(10):2681-2690

为了解新疆马疱疹病毒1型（EHV-1）主要毒力基因遗传进化情况并构建TK基因缺失株，本研究以EHV-1 XJ2015株DNA为模板，对其主要毒力基因TK、gI和gE全长进行克隆、测序及生物信息学分析，并扩增TK基因左右重组臂TKL和TKR，构建质粒pUC-TKLR，将扩增后的增强绿色荧光蛋白（EGFP，含有CMV+polyA）插入pUC-TKLR质粒，构建TK基因缺失打靶质粒。TK、gI和gE基因同源性分析结果显示，XJ2015株与国外EHV-1分离株TK、gI和gE基因同源性均较高，分别为99.8%~100.0%、99.6%~100.0%和99.9%~100.0%；与EHV-3分离株同源性均最低，分别为72.9%、59.4%和62.1%；遗传进化分析显示，3个基因均与国外EHV-1同属于一个遗传进化分支，与EHV-9和EHV-4进化关系较近，但与EHV-3进化关系较远，表明XJ2015毒株与国外EHV-1毒株TK、gI、gE基因核苷酸上差异不明显，没有明显的地域性特征，功能基因保守且进化缓慢，同源基因功能相同或相近；经PCR扩增、酶切、测序及转染鉴定，本试验成功构建了用于TK基因缺失的打靶质粒pUC-TKLR-EGFP。通过对EHV-1主要毒力基因的分析及TK基因缺失打靶载体的构建，为新疆地区马鼻肺炎流行病学调查分析、TK基因缺失株的构建提供理论依据。  相似文献   

荷斯坦牛初乳白利糖度值和初乳产量特征及影响因素分析     

《中国畜牧杂志》2019,(9)

为探究荷斯坦牛初乳白利糖度值和初乳产量特征及其影响因素,本研究收集了北京地区某牛场2016年6月—2018年6月共1 257头荷斯坦牛初乳白利糖度值和初乳产量数据及对应的奶牛生产性能测定数据,利用SAS 9.2软件的GLM过程分析胎次、产犊季节和产犊年份对初乳白利糖度值和初乳产量的影响。结果表明:北京地区荷斯坦牛初乳白利糖度值为24.25%,初乳产量为6.52 kg,该试验场初乳品质较好;不同胎次、产犊季节和产犊年份对初乳白利糖度值和初乳产量均有显著影响;初乳白利糖度值随胎次增加总体呈逐渐增加的趋势,5胎及以上的初乳白利糖度值最高;初乳产量随胎次增加呈先增加后减少的趋势,4胎时初乳产量最高。综上,荷斯坦牛初乳白利糖度值对分娩母牛的胎次和产犊年份、季节等生理和环境因素的变化较为敏感。  相似文献   

禽安卡拉病毒Hexon蛋白多克隆抗体的制备     

刘兰  卢渊录  梁雄燕  蔡宇威  顾玉芳 《畜牧与兽医》2018,(2):83-85

为进一步建立Ⅰ群血清4型禽腺病毒(FADV-4)的特异性检测方法,根据本实验室分离鉴定的安卡拉病毒的基因组序列,设计针对六邻体蛋白(Hexon)基因的特异性引物,经PCR扩增,连接至p ET-28a中,构建原核表达载体p ET-28a-Hexon。将其转化感受态BL21中,经异丙基硫代半乳糖苷(IPTG)诱导,SDS-PAGE分析,获得重组蛋白大小为49 ku。Western blot分析纯化后重组蛋白能与FAd V-4阳性血清发生特异性反应。将纯化后的重组蛋白免BALB/c小鼠,制备了六邻体蛋白多克隆抗体,采用间接ELISA方法测定效价表明制备的血清效价大于1∶64 000。  相似文献   

用“两山论”推进林业高质量发展     

尹国平 《广西林业》2021,(3):28-31

“绿水青山就是金山银山”,习近平总书记这句经典名言,被称为“两山论”。“两山论”是一个崭新的发展理念,也是一条崭新的发展路径。“两山论”着眼于处理好生态保护和经济发展的关系问题,发展经济不能以污染环境、破坏生态为代价,主张向绿色生态型、环境友好型经济转型,实现人与自然和谐共生。  相似文献   

白芨(Bletilla striata)黄烷酮3-羟化酶基因的克隆和表达分析     

宋祥忠  黄克江  王瑞珩 《分子植物育种》2019,17(14):4586-4591

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西荷杂交犊牛生长性能及耐热性的研究     

《畜牧与兽医》2017,(3):1-4

本试验旨在研究西门塔尔牛与荷斯坦牛的杂交后代犊牛的生长性能和耐热性。选择15头刚出生的西荷杂交牛作为试验组,15头同期出生荷斯坦牛为对照组,分别测定了0、3、6月龄的体重体尺指标,并在热应激状态下测定了血液生化指标和HSP70的含量。结果表明:3月龄时,试验组的体高显著高于对照组(P0.05),尤其在体重和胸围方面试验组优于对照组,差异极显著(P0.01)。6月龄时,试验组的胸围、体重均优于对照组,差异显著(P0.05)。在热应激期间,试验组的SOD和HSP70含量比对照组分别高出18.3%和26.7%,差异显著(P0.05);MDA、GSH-SP、T3、T4、COR等指标组间差异不显著(P0.05)。结论:西门塔尔牛与荷斯坦牛的杂交牛在犊牛期生长发育效果优于同龄荷斯坦犊牛,而且在热应激状态下表现出良好的耐热性。  相似文献   

牛诺如病毒和冠状病毒双重PCR检测方法的建立及初步应用     

王文佳  师志海  兰亚莉  徐照学 《动物医学进展》2019,40(10)

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牛妊娠相关糖蛋白基因boPAG4的原核表达及单克隆抗体的制备     

祁文婧  张帅  赵鑫  张红星  谢远红  金君华 《河北农业大学学报》2019,42(6)

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基于完全型SSR标记的西番莲(Passiflora edulis)遗传多样性分析     

吴艳艳  田青兰  刘洁云  黄伟华  黄永才  杨行海  夏秀忠  牟海飞 《分子植物育种》2019,17(24):8178-8183

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