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151.
新鲜、玻璃化冷冻牛卵母细胞体外受精囊胚全基因组甲基化模式初探 总被引:2,自引:1,他引:1
旨在初步分析新鲜及玻璃化冷冻牛卵母细胞体外受精囊胚全基因组甲基化模式。本研究采用单细胞全基因组甲基化测序技术(scWGMS)检测新鲜、玻璃化冷冻牛卵母细胞体外受精囊胚全基因组甲基化水平和差异甲基化区域(DMR),探讨两者之间DNA甲基化水平上的差异。结果表明,新鲜卵母细胞体外受精囊胚的整体甲基化水平显著高于玻璃化冷冻卵母细胞体外受精囊胚的整体甲基化水平(P<0.05)。采用基因本体分析(GO)和相关信号通路(KEGG)对143个DMRs分析,发现生物学过程主要显著富集在新陈代谢、生长发育、细胞定位、细胞刺激反应等,通路主要富集在生长发育、核酸结合及组蛋白乙酰化上,并筛选出几个与之相关的候选基因(FARP2、PI4KA、FAM3D、NCOR2、ZNF827等)。本研究初步发现,玻璃化冷冻牛卵母细胞体外受精囊胚的全基因组甲基化水平显著降低,且DMR区域主要集中在ATP结合、生长发育及组蛋白乙酰化,为提高玻璃化冷冻卵母细胞体外受精囊胚质量提供信息参考。 相似文献
152.
153.
154.
通过冷冻体外培养成熟的猪MⅡ卵母细胞,分析了不同冷冻方案对卵母细胞形态、纺锤体微管和染色体形态结构影响,探讨冷冻前后猪卵母细胞超微结构的变化,以及玻璃化冷冻对卵母细胞后续发育能力的影响。 相似文献
155.
以"丰香"品种为试材,MS为基本培养基,研究草莓玻璃化的克服措施,结果表明,在6-BA试验浓度范围内(1~3 mg·L-1),玻璃化率随6-BA浓度的增加而增加;40 g·L-1蔗糖,降低MS基本培养基中铵离子浓度,加入活性炭,采用透气膜封口在一定程度上均能使玻璃苗恢复正常. 相似文献
156.
157.
小鼠扩张囊胚低渗液处理试验 总被引:1,自引:0,他引:1
为研究解冻后的胚胎膨胀对其发育率的影响,本试验用20~50%的低渗PBS溶液(即0.20×、0.25×、0.30×及0.50×),分别将小鼠扩张囊胚在低渗液中处理30分钟后培养,结果新鲜胚在0.50×和0.30×中处理后的发育率分别为100%和91%,0.20×处理组的发育率降低到53%。解冻后的胚胎直接用低渗液处理,0.50×组只有85%继续发育,低于0.25×组完全不能发育。而解冻后经培养恢复到扩张囊胚后再做低渗处理,0.30×组仍有96%继续发育。 相似文献
158.
旨在探讨玻璃化冷冻-解冻对牦牛未成熟卵母细胞发育能力及卵丘-卵母细胞复合体(COCs)转录组的影响,为完善牦牛COCs冷冻保存技术提供理论依据。本研究将未经成熟培养的牦牛COCs进行玻璃化冷冻-解冻后分为2组,A组:COCs体外成熟(IVM)后用普通牛精子进行体外受精(IVF),获得的受精卵在G-1胚胎培养液中培养72 h后转入G-2培养液培养96 h;B组:IVF后,受精卵在G-1培养液培养120 h后转入G-2培养液培养48 h;以未进行冷冻处理的新鲜COCs作为对照组(C组):IVF后,受精卵在G-1培养液培养72 h后转入G-2培养液培养96 h。对牦牛新鲜COCs(n=3)和玻璃化冷冻-解冻的COCs(n=3)进行扩增、建库和转录组测序(RNA-seq)分析。结果发现,B组的卵裂率、囊胚率显著高于A组(P<0.05),但A组和B组的卵裂率、囊胚率均显著低于C组(P<0.05)。以|log2(fold change)|≥ 2,Q<0.05为阈值,牦牛冻融COCs相对于新鲜COCs共筛选出851个差异表达基因(DEGs),其中上调846个,下调5个。GO分析表明,DEGs主要富集于生物过程、细胞组分和分子功能3大类;KEGG注释结果表明,DEGs富集到258条通路,其中16条通路显著富集(P<0.05)。研究表明,IVF后在G-1培养液中培养120 h可以提高牦牛玻璃化冷冻卵母细胞的后续发育能力;玻璃化冷冻影响牦牛COCs转录组,从而降低卵母细胞的发育潜力。该发现为完善牦牛COCs玻璃化冷冻技术提供了一定的理论基础。 相似文献
159.
外源精胺对黑果枸杞不同性质愈伤组织诱导再生器官及玻璃化的影响 总被引:1,自引:0,他引:1
以黑果枸杞不同性质的愈伤组织为试材,将不同浓度的精胺(Spm)添加于MS培养基中,研究外源Spm对黑果枸杞不同性质愈伤组织诱导再生器官及玻璃化的影响,以期为黑果枸杞植株再生技术、遗传转化等提供参考依据.结果 表明:添加适宜浓度的Spm均能显著提高愈伤组织再生率、降低玻璃化率.4种不同性质愈伤组织的再生率、玻璃化率影响效果依次为芽愈伤组织(BEC)>叶愈伤组织(LEC)>茎愈伤组织(SEC)>花药愈伤组织(AEC).青海诺木洪(QH-N)和宁夏中宁(NX-Z)的BEC添加Spm最佳浓度均为30 mg·L-1,再生率分别达到60.62%和63.89%,均无玻璃化苗发生;LEC添加Spm最佳浓度均为20 mg·L-1,再生率分别达到49.48%和52.48%,均无玻璃化苗发生;SEC添加Spm最佳浓度分别为10 mg·L-1和15 mg·L-1,再生率分别为33.60%和42.11%,玻璃化率分别降至1.14%和0%;AEC最佳浓度均为15 mg· L-1,再生率分别为19.89%和34.86%,玻璃化率分别降至12.19%和8.97%.外源精胺能有效促进愈伤组织再生率,并不同程度减轻或抑制玻璃化苗的发生. 相似文献
160.
胚胎玻璃化冷冻的实验研究 总被引:1,自引:0,他引:1
用小鼠胚胎分别在甘油、丙二醇、乙二醇不同浓度比例的10组玻璃化1液中平衡,每组均分室温和低温平衡,共20个组合。研究表明,提高甘油浓度、降低丙二醇及乙二醇浓度,可明显提高玻璃化冷冻后的胚胎体外培养发育率。低温平衡优于室温平衡。15%甘油 5%丙二醇 5%乙二醇的PBS液,是较为理想的第1冷冻液组合。室温平衡的培养发育率为37.5%(18/48),低温平衡的培养发育率为71.4%(30/42),差异极显著(P<0.01);采用2步低温平衡,优选上述第1冷冻液,玻璃化冷冻200枚小鼠胚胎,解冻后培养至膨胀发育率为82.5%(165/200)。 相似文献