TMV蚕豆株系CP基因及3′端非编码区序列分析与表达     

刘勇  周雪平  李德葆  刘志敏 《湖南农业大学学报(自然科学版)》1997,(1)

根据烟草花叶病毒Ｕ１株系ＴＭＶ－Ｕ１序列，人工合成引物，通过ＰＣＲ扩增并克隆了烟草花叶病毒蚕豆株系（ＴＭＶ－Ｂ）的外壳蛋白（ＣＰ）基因和３′端非编码区．ＤＮＡ全序列测定结果表明，外壳蛋白基因全长４５９个碱基，编码１５１个氨基酸，３′端非编码区全长２２４个碱基．与ＴＭＶ－Ｕ１株系相比，ＴＭＶ－Ｂ仅在ＣＰ基因上有一个碱基缺失，并导致ＣＰ基因提前终止，使其编码的氨基酸少７个．将ＣＰ基因及３′端非编码区插入ｐＧＥＭＥＸ－１的Ｔ７基因１０中，转入Ｅ．ｃｏｌｉ后诱导表达，聚丙烯酰胺凝胶电泳分析呈现一特异的蛋白带．Ｗｅｓｔｅｒｎ免疫检测证明，该特异带与ＴＭＶ抗血清呈阳性反应．将ＣＰ基因正向插入植物表达载体ＰＢⅠ１２１中，置于花椰菜花叶病毒３５Ｓ启动子控制之下，获得了植物表达载体ｐＺＬ５  相似文献   

牙鲆Follistatin cDNA的克隆与序列分析     

刘庆华  谭训刚  徐永立  张培军  徐破 《浙江大学学报(农业与生命科学版)》2007,33(6):621-625

为研究海水鱼中Follistatin基因的序列特征,从受精后67 h的牙鲆受精卵中克隆获得牙鲆Follistatin基因cDNA序列,并对其进行序列分析.结果表明,在牙鲆中并没有发现Follistatin基因的可变式剪切现象;牙鲆Follistatin基因cDNA序列全长963 bp.序列分析结果显示:牙鲆与Takifugu rubripes的亲缘关系最近.Follistatin蛋白中高度保守的半胱氨酸和甘氨酸残基的生物学功能可能是维持蛋白空间结构的稳定.  相似文献   

不同启动子调控下的t—PAcDNA乳腺定位表达     

李银聚  赖良学  赵君  扈荣良  殷震 《河南科技大学学报(农学版)》2001,21(2):79-81

乳清酸蛋白 (WAP)和 β -酪蛋白 (β -Casein)是哺乳动物乳汁中的主要蛋白质 ,其基因 5′侧翼区常作为乳腺定位表达的调控序列。表达载体pSVL -WAP -tPA和pSVL - βb -tPA分别含 1.1kb的大鼠WAP启动子和 0 .6kb的牛β Casein启动子序列及t-PAcDNA。采用基因直接注射方法将 2种表达载体分别注入家兔乳腺中。溶圈试验结果显示 ,两种表达载体均能在兔乳腺细胞中得到表达 ,且以分娩后第 4天的乳汁中表达水平最高 ,分别为 45 0ng·mL-1和390ng·mL-1。为进一步研究t-PA基因乳腺定位表达调控和建立t-PA乳腺生物反应器奠定了基础。  相似文献   

狐貉源犬瘟热病毒核蛋白基因的克隆及序列比较分析     

刘澜澜  华育平  曾祥伟  张莉 《东北林业大学学报》2007,35(9):61-63

参照已发表的犬瘟热病毒(CDV)核蛋白基因(N)序列设计合成了1对引物,用RT-PCR方法对从发病狐、貉中分离的MS01、SC01、ZD01三株CDV的N基因进行扩增,并分别将其PCR产物进行克隆和测序。测序结果表明:3病毒分离株N基因阅读框架全长均为1572bp,编码523个氨基酸。利用DNAstar的MegAlign生物软件,将3病毒分离株与Genbank数据库中现有的CDV毒株的N基因序列及推导出的氨基酸序列进行了同源性比较和系统进化树分析,结果发现:3病毒分离株与强毒参考株A75/17等野毒株高度同源,核苷酸同源为96.2%～99.1%,氨基酸同源为96.0%～99.8%,而与疫苗株Onderstepoor相对较远,核苷酸同源为93.6%～94.0%。N基因的系统进化关系分析显示:3病毒分离株均归为强毒株,并且与中国新疆的TN株、中国台湾的Kaohsiung株基因型最近,表现出一定的地理位置相关性。  相似文献   

低温胁迫下mefluidide对玉米的保护作用     

焦健  李朝周 《甘肃农业大学学报》1995,30(1):89-92

在０～１０℃低温胁迫下，ｍｅｆｌｕｉｄｉｄｅ对玉米具有保护作用。２０μｇ／ｇｍｅｆｌｕｉｄｉｄｅ叶面喷洒玉米黄化幼苗与未处理对照材料分别在３±１℃、５±１℃、１０±１℃、２５±１℃环境中生长３天后，ｍｅｆｌｕｉｄｉｄｅ处理组线粒体Ｎａ￣＋－Ｋ￣＋ＡＴＰ酶活力均高于对照组，细胞膜电解质渗出率均低于对照组。据此初步认为ｍｅｆｌｕｉｄｉｄｅ对玉米的保护作用可能与ｍｅｆｌｕｉｄｉｄｅ保护了细胞的主动运输体系，维持细胞膜的正常生理功能有关。  相似文献   

线粒体基因在我国蝗虫分子系统学中的研究进展     

马兰 《陕西农业科学》2007,(4):91-92137

主要综述了线粒体基因16S rDNA、12S rRNA、cytb、CO I、CO II、ND 5在我国蝗虫分子系统学中的应用情况。指出:应用线粒体基因进行分子系统学研究,可以解决蝗虫各分类阶元之间的进化关系,确立一些有争议物种的分类地位,探讨相关物种的系统地理等;今后线粒体多个基因序列联合分析、线粒体基因和核基因序列联合分析、整个基因组全序列分析以及分子数据与形态学的密切结合将成为分子系统学未来发展的主要研究手段,这将为我国蝗虫分类研究提供更多分子上的证据。  相似文献   

上海地区猪戊型肝炎病毒部分序列的克隆与分析     

宁海强  李震  于瑞嵩  张佩华  牛钟相 《西南农业学报》2007,20(5):1105-1108

对上海地区几个猪场的戊型肝炎感染情况进行了调查,共采集粪便样品36份,通过RT-nPCR的方法应用通用引物对病毒基因组的ORF2部分片断进行扩增,36份样品中有5份RT-nPCR阳性,HEV RNA阳性率为13.9%,去除相同的序列,得到2株HEV的ORF2部分序列。序列分析表明,这两段序列与基因I、II、III、IV的遗传距离分别为0.183、0.207、0.230、0.102和0.177、0.226、0.240、0.108。系统进化分析显示,这两株病毒都属于基因Ⅳ型。  相似文献   

试论棉花花芽分化发育的序列性   总被引：1，自引：0，他引：1  

张建华  高璆  陈火英 《上海交通大学学报(农业科学版)》1991,(3)

对4个不同类型品种及不同生态条件下棉花花芽分化发育序列性研究表明:在3500～4000株/亩密度条件下,一级果枝上近主茎的5～6个花芽具较强的生长优势;同位花芽分化期间隔在0.70～0.94之间,邻位花芽分化期间隔在2.03～2.16之间。各果枝近主茎第一花芽具最强生长优势。现蕾后,棉株基部第一、二果枝花芽生长分化变慢;开花后,花芽增长量出现负值。现蕾节以上各分化果枝的花芽分化数有较稳定的序列性,自下而上其分布规律为4,4,3,3,2,2,1,1。  相似文献   

减蛋综合征病毒PVⅢ蛋白基因的克隆与序列分析     

张春杰  吴志明  李银聚 《西北农林科技大学学报(自然科学版)》2004,32(7):25-28

根据减蛋综合征病毒PV 蛋白基因序列设计了1对特异性引物,应用降落PCR法对PV 蛋白基因进行了扩增。将扩增产物克隆至pMD18-T载体中,经酶切和PCR鉴定,初步证明了目的片段的正确性。进一步核苷酸序列测定表明,所扩增的基因片段长度为0.756kb,共编码250个氨基酸。  相似文献   

华南地区新城疫病毒WS_(99)株HN基因片断的克隆和序列分析     

贺东生  秦智锋  刘福安 《华南农业大学学报》2001,22(4)

用RT -PCR一步法扩增了华南地区野毒NDVWS99株的HN基因 890bp片断 ,并对其进行克隆、核苷酸测序及同源性分析 结果表明 :WS99株的HN基因与其他 2 9株NDV的核苷酸同源性在 88.0 %～ 99.8%之间 ,氨基酸同源性在 90 %～ 97%之间 鸡源NDVWS99株与鹅源副粘病毒GPMV株有极高的同源性 ,高达 99.8% 该毒株与TEX/ 48和B1/ 47一样 ,在HN基因 130 1bp处由G突变为A ,对应氨基酸由V突变为I,但其半胱氨酸位点和个数没有改变 ,且所克隆的目的片段中含有HN基因上 5个凝血抗原位点其中的 4个  相似文献