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为研究一种简单快速分离蒙古马睾丸支持细胞并保证其活性的基本方法,本试验采集2岁蒙古马睾丸组织于低温环境下进行机械分离,将1~3 g睾丸组织剪碎,采用重力沉淀法去除游离的红细胞和间质细胞;使用0.1%胶原酶Ⅳ和0.25%胰蛋白酶+EDTA逐步进行组织消化,并用含有10%胎牛血清的培养基进行细胞培养;在接种后采用差异贴壁法分离纯化支持细胞,使用Tris-HCl低渗法去除杂质细胞,并采用碱性磷酸酶(AKP)染色、HE染色、实时荧光定量PCR方法进行鉴定。结果显示,支持细胞贴壁性能较强,培养24 h后大多数细胞开始贴壁,细胞形状呈椭圆形;培养48 h后胞质增多,折光性变强;培养3~4 d细胞胞质展开紧密连接,此时细胞呈三角形,有明显的核仁,培养6~7 d细胞生长状态进入稳定期。实时荧光定量PCR结果显示,GATA4和GDNF基因在培养细胞中极显著表达(P<0.01),AKP染色支持细胞呈阴性表达,表明分离培养的细胞确为支持细胞。本试验使用机械分离法与两步酶消化法处理组织,可快速高效地获得睾丸支持细胞,成功构建了蒙古马睾丸支持细胞体外培养方法。 相似文献
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蒙古马与英纯血马血液生化指标的比较研究 总被引:1,自引:0,他引:1
本文随机测定了蒙古马(Mongolian Horse)26匹、英纯血马(Thoroughbred)29匹的白蛋白、总蛋白、丙氨酸氨基转移酶、门冬氨酸氨基转移酶、乳酸脱氢酶、碱性磷酸酶、尿素等7项血液生化指标。结果表明蒙古马各项指标中总蛋白、白蛋白、乳酸脱氢酶、碱性磷酸酶等4项差异极显著。蒙古马中青年马的乳酸脱氢酶和碱性磷酸酶高于老龄马,总蛋白、白蛋白、尿素、碱性磷酸酶、门冬氨酸氨基转移酶、丙酸氨基转移酶等6项指标差异不显著。英纯血马中青年马的白蛋白、尿素和丙氨酸氨基转移酶低于老龄马,白蛋白、尿素、乳酸脱氢酶、丙氨酸氨基转移酶等4项指标差异不显著,总蛋白和碱性磷酸酶差异极显著。 相似文献
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在内蒙古赤峰市阿鲁科尔沁旗的一个牧场,牧场的主人叫斯日吉噶瓦,2007年5月18日一早,噶瓦带着牧场里的工人们训起马来.每年的这个时间,牧场里都会经历这样一段人仰马翻的艰难时刻,但是这一刻对噶瓦来说也是最重要的.因为5月份是噶瓦牧场的销售旺季,他要在客商来草原买马之前把蒙古马训老实,方便顾客挑选. 相似文献
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蒙古马染色体核型初步分析 总被引:3,自引:0,他引:3
本文采用外周血淋巴细胞短期培养方法,对蒙古马染色体进行了核型分析。分析结果表明,蒙古马的二倍体细胞染色体数为2n=64。其中有31对常染色体和1对性染色体(XY型)。31对常染色体中有13对为中部着丝点染色体和18对为端都着丝点染色体。X为近中着丝点染色体,Y为端部着丝点染色体。 相似文献
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本试验旨在探讨饲粮中添加不同水平的紫花苜蓿草粉对蒙古马运动性能及养分表观消化率的影响,试验选用体重、年龄、体尺、运动成绩相近的蒙古马27匹随机分为3组,每个组3个重复,每个重复3匹,1组饲喂基础日粮为对照组,2、3组分别在基础日粮中添加2.5%、5.0%紫花苜蓿草粉,试验开始第20天对各组马匹逐个进行20 km模拟比赛,在赛后0、20 min测定试验马匹的体温、脉搏、呼吸等运动性能,采集粪便测定养分表观消化率。结果表明:(1)试验2、3组平均速度高于1组(P> 0.05);试验2、3组赛后0 min体温低于1组(P> 0.05);试验3组赛后5 min呼吸频率较1组相比降低22.3%(P <0.05);试验3组赛后0、20 min的心率较1组相比分别降低15.3%,33.1%(P <0.05)。(2)试验2、3组的有机物、粗蛋白质、钙、磷表观消化率均高于1组(P> 0.05);试验3组干物质、中性洗涤纤维、酸性洗涤纤维表观消化率较1组相比分别提高10.0%、13.4%、15.5%(P <0.05)。综上,在饲料中添加5.0%紫花苜蓿草粉可提高蒙古马运动性能,有利于运动后生理指标的快速恢复,同时提高养分表观消化率。 相似文献
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