漠斑牙鲆迟缓爱德华氏菌的分离与鉴定     

贺宝玲  张玉芬  何生美  刘鹏  张秀军 《安徽农业科学》2009,37(12):5529-5530

[目的]为有效防治漠斑牙鲆疾病提供基础资料。[方法]通过病原菌的分离培养、人工感染试验、生理生化鉴定研究了导致漠斑牙鲆患病的病原。[结果]镜检结果表明：该病原菌为革兰氏阴性杆菌,菌体无荚膜,无芽孢,大小多为（0．5～0．9）μm×（1．1～2．0）μm。在普通营养琼脂平板上形成浅灰色、直径约0．5—1．0mm的菌落;在血液琼脂平板上形成浅乳白色菌落,其中可见狭窄的B溶血环;在SS琼脂平板上形成中间黑色、周边透明的圆形小菌落。腹腔注射菌悬液的漠斑牙鲆在7d内全部死亡。从发病漠斑牙鲆的肝、肾和脾等组织中可分离出与原病原菌一致的菌株,经再次感染又可分离到该菌株。[结论]所分离的3株病原菌为迟缓爱德华氏菌,具有原发病病原学意义及强致病作用。  相似文献   

用低龄动物制备高效价Et免疫血清的探讨     

朱壮春  陈阳  郝东升  王艳茹  马玉妹  曹向可  穆艮艮  李金坤  史相国 《安徽农业科学》2009,37(34):16861-16862

［目的］建立一种用低龄日本大耳白兔制备高效价迟钝爱德华氏菌（Edwardsiellatarda,Et）免疫血清的方法。［方法］先制备迟钝爱德华氏菌（Et）抗原。用日本大耳白兔作免疫动物,分2组试验,一组是2月龄组（T组）,另一组是6月龄（S组）。采取耳缘静脉注射的方法,小剂量连续多次免疫日本大耳白兔,免疫后,收集免疫血清,然后用微量凝集反应法测定免疫血清抗体效价。［结果］凝集反应显示,在免疫剂量相同的情况下,第1次试血测Et免疫血清效价,S组的血清效价比T组的血清效价高,但在第2次试血测Et免疫血清效价时T组的血清效价与S组的血清效价一致。［结论］试验中所采用的T组动物（日本大耳白免）月龄较小,免疫后仍产生了与S组一致的高效价抗血清,说明用低龄日本大耳白兔制备高效价Et免疫血清的方法可行。  相似文献   

两种鮰爱德华菌ELISA快速检测方法的建立与应用   总被引：1，自引：0，他引：1  

张显昱  李强  李明  黄华  叶仕根  李华 《中国农业科技导报》2013,15(3):175-182

为了对水产动物致病菌鮰爱德华菌进行早期、快速地检测,以鮰爱德华菌单克隆抗体5D11作为检测抗体,分别建立了间接ELISA和竞争ELISA两种快速检测鮰爱德华菌的方法,并用棋盘滴定法进行了条件的优化。结果显示,间接ELISA实验中采用37℃过夜这种包被方法能有效促进酶标板对细菌的吸附作用,单克隆抗体和二抗的最佳稀释倍数分别为1∶80和1∶1 000,病原菌的检测灵敏度为5×106 cells/mL,交叉反应实验证明该方法特异性强,并且可用于对鮰爱德华菌标准菌株及其分离株的快速检测;同时采用棋盘滴定法确定了竞争ELISA实验中包被抗原-抗体最佳工作组合为5×108~1∶80、抗体和竞争抗原比例为3∶7,并制作出了相关系数为0.990 1的标准曲线,该方法特异性强,最低检出限106 cells/mL,可在一定范围内对鮰爱德华菌进行定性和定量检测,弥补了间接ELISA的不足。  相似文献   

First isolation and characterization of Edwardsiella tarda from diseased striped catfish,Pangasianodon hypophthalmus (Sauvage)     

M Shetty  B Maiti  M N Venugopal  I Karunasagar  I Karunasagar 《Journal of fish diseases》2014,37(3):265-271

  相似文献   

First isolation and characterization of Edwardsiella tarda from diseased Asian swamp eel,Monopterus albus (Zuiew)          下载免费PDF全文

Jianchun Shao  Junfa Yuan  Yongliang Shen  Ruixue Hu  Zemao Gu 《Aquaculture Research》2016,47(11):3684-3688

  相似文献   

迟缓爱德华氏菌SYBR Green I实时荧光定量PCR检测方法的建立及其应用     

荣小军  廖梅杰  张正  王印庚  刘智超  李彬  王岚  陈贵平 《水产学报》2013,37(12):1829-1838

根据克隆得到的迟缓爱德华氏菌gyrB基因序列设计并合成一对特异性引物,通用性和特异性检测结果显示所设计的引物具有良好的种间特异性和种内通用性,构建含gyrB基因的重组质粒作为标准品,经过反应体系优化后建立了检测迟缓爱德华氏菌的SYBR Green I实时荧光定量PCR检测方法。结果显示,该方法线性关系良好,在Tm为63℃时,扩增产物的熔解曲线仅有一个单特异峰,扩增所得标准曲线为y=-3.32x 39.38,相关系数为0.998,扩增效率为1.00,最低能检测到60个拷贝。应用建立的方法对人工感染的大菱鲆病样进行了检测,三个被检样品均呈阳性反应,证明该方法具有较好的适用性。实验结果表明所建立的实时荧光定量PCR方法具有特异、敏感、快速、定量的优点,可用于迟缓爱德华氏菌病的快速检测。  相似文献   

用低龄动物制备高效价Et免疫血清的探讨   总被引：1，自引：0，他引：1  

朱壮春  陈阳  郝东升  王艳茹  马玉妹  曹向可  穆艮艮  李金坤  史相国 《农业科学与技术》2009,10(5):116-118

[目的]建立一种用低龄日本大耳白兔制备高效价迟钝爱德华氏菌（Edwardsiella tarda,Et）免疫血清的方法。[方法]先制备迟钝爱德华氏菌（Et）抗原。用日本大耳白兔作免疫动物,分2组试验,一组是2月龄组（T组）,另一组是6月龄（S组）。采取耳缘静脉注射的方法,小剂量连续多次（第1、7、14、21、27、33、41天时免疫剂量分别为O．2、0．2、0．25、0．2、0．25、0．3、0．4ml）免疫日本大耳白兔。免疫后,收集免疫血清,然后用微量凝集反应法分2次试血（第1次是免疫第33天后的第7天,采用1：20抗血清;第2次是免疫第41天时,采用1：40抗血清）,测定免疫血清抗体效价。[结果]凝集反应显示,在免疫剂量相同的情况下,第1次试血测＆免疫血清效价,2月龄组T：血清效价最高为1：640,6月龄组S1、S2和S4血清效价均达1：1280,显示6月龄组的体液免疫应答反应强于2月龄组;经继续免疫8d后,第2次试血测凸免疫血清效价可见,2月龄组的T1、T2、T3和6月龄组的S1、S2、S4免疫血清效价一样,均高达1：5120。表明此时在接受相同剂量助抗原刺激后,2月龄组和6月龄组的体液免疫应答反应已趋相同。[结论]试验中所采用的T组动物（日本大耳白兔）月龄较小,免疫后仍产生了与S组一致的高效价抗血清,说明用低龄日本大耳白兔制备高效价凰免疫血清的方法可行。  相似文献   

迟缓爱德华菌人工感染斑马鱼的致病性及组织病理学变化     

彭国瑞  王成龙  王雪鹏  陆承平 《畜牧与兽医》2011,43(1)

用迟缓爱德华菌真鲷分离株(E.t-CD)对斑马鱼进行人工感染试验,观察其发病、死亡以及相关病理学变化。结果表明,该菌对斑马鱼的半数致死浓度(LD50)为2.69×102 cfu/尾;感染发病鱼呈现岀血、溃疡、腹水、败血等症状;病理组织学检查以肝脏水肿变性,肝细胞萎缩、坏死、脱落;脾脏散在增生性结节、充血、水肿、淋巴细胞大量缺失等病变为主。结果表明,斑马鱼可作为研究迟缓爱德华菌致病性的动物模型。  相似文献   

Comparative Susceptibility of Channel Catfish,Ictalurus punctatus; Blue Catfish,Ictalurus furcatus; and Channel (♀) × Blue (♂) Hybrid Catfish to Edwardsiella piscicida,Edwardsiella tarda,and Edwardsiella anguillarum          下载免费PDF全文

Cynthia Ware  Lester H. Khoo  Terrence E. Greenway  David J. Wise  Brian G. Bosworth  Mark L. Lawrence  Matt J. Griffin 《Journal of the World Aquaculture Society》2018,49(1):197-204

Members of the genus Edwardsiella are important pathogens of cultured and wild fish globally. Recent investigations into the phenotypic and genotypic variation of Edwardsiella tarda have led to the segregation of E. tarda into three distinct taxa: E. tarda, Edwardsiella piscicida, and Edwardsiella anguillarum. In catfish aquaculture in the southeastern USA, E. piscicida has been more commonly associated with disease than E. tarda or E. anguillarum, and recent research has demonstrated E. piscicida to be more pathogenic in channel catfish than E. tarda or E. anguillarum. Anecdotal reports from industry suggest an increased prevalence of E. piscicida associated with the culture of channel (♀) × blue (♂) hybrid catfish. This work investigated the comparative susceptibility of channel catfish, blue catfish, and their hybrid cross to molecularly confirmed isolates of E. tarda, E. piscicida, and E. anguillarum. There was significantly higher mortality in hybrid catfish compared to channel catfish following intracoelomic injection of E. piscicida. To our knowledge, E. piscicida is the first bacterial pathogen to demonstrate increased pathogenicity in hybrid catfish compared to channel catfish.  相似文献   

黄颡鱼迟钝爱德华菌的分离鉴定及其致病性研究     

石征宇  易弋  韩书煜  罗福广  黄杰  鲁晶娣  黎娅 《中国畜牧兽医》2018,45(3):807-813

为了确定黄颡鱼发病的原因,试验从患病黄颡鱼体内分离得到1株病原菌,命名为GDYM20160809,通过形态学观察、生理生化特性鉴定、16S rDNA分析及系统进化树构建等方法对分离菌进行鉴定,采用滤纸片扩散法对分离菌进行药敏试验。结果显示,该分离菌为革兰氏阴性短杆菌,PCR扩增其16S rDNA片段,经测序及BLAST比对,显示其与迟钝爱德华菌（Edwardsiella tarda）的同源性达100%,结合生理生化鉴定结果确定分离菌为迟钝爱德华菌。药敏试验结果显示,分离菌对磺胺类药物、头孢类药物、青霉素、复方新诺明等药物敏感,对磺胺间甲氧嘧啶钠、新生霉素、多黏菌素B、阿米卡星、卡那霉素和万古霉素6种药物耐药;人工感染试验结果证实,菌株对罗非鱼、禾花鲤、草鱼和黄颡鱼都有很强的致病性。本试验结果为有效防控黄颡鱼细菌性疾病提供了理论依据,并可指导养殖户合理用药。  相似文献