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101.
102.
将pGFP-2质粒线性化,利用精子介导,通过人工授精技术导入意大利蜜蜂处女王,然后将授精王介绍到无王群繁殖后代。结果:试验群产生了一群绿色荧光阳性蜜蜂;对阳性蜂群后代分析发现,1~2日龄幼虫能检测到荧光,提取蜜蜂DNA进行PCR扩增得到预想的片断,通过RT-PC分析,从转录水平上证实转导的外源基因获得表达。结论:以绿色荧光蛋白(GFP)基因为报告基因,通过精子介导法能够生产克隆转基因蜜蜂。 相似文献
103.
以木薯腋芽为外植体,通过添加不同含量的2,4-D和picloram摸索诱导体细胞胚及FEC的最佳激素条件;利用优化的再生体系,以木薯脆性胚性愈伤组织(FEC)为受体,对农杆菌侵染FEC的侵染浓度、侵染时间以及侵染后潮霉素抗性筛选浓度进行了研究。结果表明,12 mg·L~(-1)的picloram能较快诱导出体细胞胚及FEC;农杆菌菌液浓度OD600=0.4并侵染30 min为FEC转化效率及植株再生率的最佳条件;共培养后,通过逐渐增加潮霉素筛选浓度(0,5,8,15 mg·L~(-1))能更有效地提高植株的再生率。 相似文献
104.
Sébastien?Saint-JeanEmail author Antonino?Testa Sophien?Kamoun Laurence.?V.?Madden 《European journal of plant pathology / European Foundation for Plant Pathology》2005,112(4):391-394
The purpose of this study was to develop a new technique to evaluate the number of spores incorporated in splash droplets by the use of an engineered fluorescent pathogen strain and image analysis hardware and software. The inoculum source consisted of a tomato leaflet infected with a Phytophthora infestans strain transformed with the gene encoding the green fluorescent protein (GFP). Splash droplets formed after impact of incident drops on sporulating lesions were collected on microscope slides located at different distances from the source. Each slide was examined using a fluorescent microscope to visualize the GFP expressing sporangia. Photographs were taken and assessed using image processing to count the sporangia incorporated in each droplet. Data analysis confirmed characteristics of splash dispersal shown using other methods. The use of fluorescent sporangia also facilitates the selective detection and counting of viable (living) sporangia, and is a tool that can be use in the study of splash dispersed diseases*Authors S. Saint-Jean and A. Testa contributed equally to this work and should both be considered first author. 相似文献
105.
鸡传染性法氏囊病病毒VP2蛋白GFP融合分子在COS7细胞内的表达 总被引：1，自引：0，他引：1
将鸡传染性法氏囊病病毒（IBDV）VP2蛋白基因插入增强型绿色荧光表达载体pEGFP-C1中,构建了真核表达载体pEGFP-VP2。PCR与酶切鉴定结果表明VP2基因成功插入到表达载体pEGFP-C1中。脂质体法转染COS7细胞后,荧光显微镜检测到了GFP-VP2融合蛋白的表达。用200 μg/ml的G418成功筛选到了稳定表达GFP-VP2融合蛋白的细胞系,表达蛋白经镍亲和柱得到了纯化。 相似文献
106.
108.
从水稻白叶枯病菌中克隆hrpF基因,hrpF与gfp(Green fluorescent protein)基因融合,连接pET30a( )载体,构建重组质粒pET30a( )::hrpFXoo::gfp,转化宿主菌BL21 (DE3) 产生表达菌株pOFG.表达菌株经IPTG诱导培养,获得了HrpF的GFP融合蛋白.收集菌体通过超声波破碎后,分别取上清和沉淀进行SDS-PAGE电泳,可见116 300 大小的组氨酸标记的HrpF与GFP的融合蛋白条带,与分析软件推测大小一致.该研究结果将促进HrpF蛋白功能研究. 相似文献
109.
巴西橡胶树离体材料的绿色荧光背景研究 总被引：1，自引：1，他引：0
绿色荧光蛋白GFP是植物遗传转化常用的报告基因,但是有些植物组织由于具有绿色荧光背景而不能使用.为了探索GFP基因作为报告基因在巴西橡胶树遗传转化中利用的可行性,对巴西橡胶树不同的离体材料进行荧光背景检测,发现花药愈伤组织、未授粉胚珠愈伤组织、游离小孢子、花药壁体细胞均能发出极强的绿色荧光,叶片侧脉细胞发出弱的绿色荧光,而叶肉细胞不能发出绿色荧光.这表明橡胶树愈伤组织、游离小孢子、花药壁体细胞、叶片侧脉细胞含有自发荧光物质,在以它们为受体构建转化体系时不能以GFP基因作为报告基因. 相似文献
110.
以GFP叶绿体转基因烟草及对照烟草（非转基因烟草）为材料,在实验室条件下研究了叶绿体转基因烟草及对照烟草（非转基因烟草）在茎叶降解过程中及完全降解后对土壤微生物主要类群（细菌、真菌、放线菌）的影响,并对相关的土壤酶活性进行了分析。结果表明,在烟草茎叶降解过程中及完全降解后：（1）叶绿体转基因烟草及对照烟草（非转基因烟草）对微生物的数量影响不显著;（2）土壤微生物总量相比为细菌〉放线菌〉真菌;（3）叶绿体转基因烟草茎叶降解对土壤酶活性没有显著影响;（4）GFP基因没有水平转移到土壤微生物基因组中。以上结果显示GFP叶绿体转化烟草茎叶降解对土壤微生物数量及土壤酶活性没有显著的影响。 相似文献