狂犬病病毒核蛋白基因在大肠杆菌中稳定表达条件的优化及纯化   总被引：1，自引：0，他引：1  

于志凤  张守峰  刘晔  张菲  扈荣良 《吉林农业大学学报》2006,28(5):581-585

将狂犬病病毒SRV9株核蛋白基因按正确的读码框克隆至GST融合表达载体pGEX-4T-1中,转化至大肠杆菌Rosetta株,IPTG诱导表达。表达的融合蛋白经SDS-PAGE分析显示,相对分子量约为82 kD,与预期大小一致。Western-blot检测结果表明,融合蛋白能与多克隆阳性血清发生特异性反应。为获取大量ELISA包被用核蛋白,试验还借助SDS-PAGE方法对重组目的基因的表达条件进行了优化,比较了诱导温度、菌密度I、PTG浓度、诱导时间等参数对重组基因表达的影响,以确定最佳诱导表达条件。结果表明:27~32℃,OD5500.3~0.4,IPTG 0.06 mmol/L、诱导至OD550值不再增加时为最佳诱导表达条件。优化后经扫描分析显示,所表达融合蛋白占菌体总蛋白的20%以上。经包涵体纯化和亲和层析纯化,可获得纯度较高的GST融合蛋白。  相似文献   

烟草蚀纹病毒弱株系的选育及免疫效果研究     

张满良 《西北农林科技大学学报(自然科学版)》1998,26(2):53-56

１９９１～１９９５年利用钴６０照射和亚硝酸处理进行了烟草蚀纹病毒（ＴＥＶ）弱株系的选择及防病效果试验。结果表明,钴６０照射病毒溶液能产生弱株突变体的适宜剂量是１．２９,２．５８Ｃ／ｋｇ,亚硝酸处理的适宜浓度和时间是１ｍｏｌ·Ｌ－１,３０～５０ｍｉｎ．经选择效果明显的弱株有Ｒ４和Ｈ３８,其室内交互保护试验的效果最高分别是８５．８％和４７．４％;田间防病效果分别为８１．６％和４０．３％．两个弱株免疫后接种强株,其烟株体内病毒含量均低于强株对照。试验还表明,亚硝酸处理较钴６０能产生较多的弱株突变体。  相似文献   

烟草感染马铃薯Y病毒脉坏死株系后PPO活性及其同工酶变化的研究   总被引：5，自引：0，他引：5  

刘才艺  吴元华 《华中农业大学学报》2000,19(4):328-330

感染马铃薯Ｙ病毒脉坏死株系（ＰＶＹ＾Ｎ）后,敏感烟草体内的多酚氧化酶（ＰＰＯ）活性升高,而抗性烟草的ＰＰＯ活性降低,但其活性值均高于敏感烟草健康植株;敏感烟草从接种ＰＶＹ＾Ｎ后第８ｄ起出现２条新的ＰＰＯ同工酶谱带,而且随着病害程度的加重其强度增加,抗性烟草则没有新的ＰＰＯ同工酶谱带出现,在未接种的情况下,抗性烟草体内的ＰＰＯ活性明显高于敏感烟草,其ＰＰＯ同工酶谱带数比敏感烟草多１条。  相似文献   

鸡新城疫病毒V4株一些特性的研究     

余旭平  应琦华  纪素华  徐仲均 《浙江大学学报(农业与生命科学版)》1997,(5)

对鸡新城疫病毒（ＮＤＶ）Ｖ４株的毒价、血凝（ＨＡ）稳定性和致病指数进行了研究，结果显示ＮＤＶＶ４株的毒价（ＥＩＤ）为１０－８．３～１０－１０．１／０．１ｍＬ，２５℃存放２８ｄ、３７℃存放１２ｄ及反复冻融７次ＨＡ滴度不变，其１日龄雏鸡脑内接种、６周龄鸡静脉接种发病指数和鸡胚平均致死时间分别为：ＩＣＰＩ＝０．００，ＩＶＰＩ＝０．００，ＭＤＴ＞１５０ｈ  相似文献   

聚类分析在西瓜抗枯萎病品系筛选中的应用     

王桂英  赵建明 《北京农学院学报》1997,12(1):34-40

对28个西瓜品种进行抗枯萎病筛选．苗期用特定浓度接种，每隔7d调查其感病情况及植株生长情况．株高、茎粗、叶片数等生长势指标与发病率均呈极显著负相关，相关系数分别为－0．5480、－0．6052、－0．8114．利用聚类分析方法统计，把28个西瓜品种按其抗性表现归类，从而得出抗病水平不同的各组西瓜品种，并筛选出一组抗性水平相当高的品种．为选育高抗西瓜品种以及研究各西瓜品种的抗病性关系提供了一种简捷的科学方法．  相似文献   

肉鸽的品系杂交效果分析     

韩占兵  李婉平 《甘肃农业大学学报》1997,32(3):285-289

４个来源不同、经过３ａ选育的肉用白王鸽品系，从中选出３个品系进行品系杂交试验（Ａ、Ｂ、Ｃ、Ｄ组），并用４个纯系（Ⅰ、Ⅱ、Ⅲ、Ⅳ）作对照，试图筛选出杂交效果优秀的组合用于商品生产。杂交试验结果显示，杂交效果不够理想。杂种优势率最高的仅为３．０４％（Ｃ组的孵化率），而４周龄体重（Ａ、Ｃ组）和４周龄成活率（Ｂ、Ｃ组）的杂交优势率为负值。正反杂交组合比较，在４周龄体重上，Ⅲ系作为父本（Ｂ、Ｄ组）显著高于作为母本（Ａ、Ｃ组）的组合（Ｐ＜０．０５）。各品系的全面配合力测定，有待于进一步试验。  相似文献   

H5亚型禽流感灭活疫苗的研制     

王贺民 何诚张建平  李浩鹏 《中国农业大学学报》2004,9(1):41-44

以H5N1亚型禽流感病毒接种鸡胚，收取鸡胚液为抗原研制了禽流感灭活疫苗，并对制苗抗原以及疫苗的物理性状、安全性、免疫效力、免疫剂量和保护期等进行了试验。结果表明，获得了较高效价的制苗抗原．灭活前后HA分别为2^10.0-11.0和2^9.0-10.0。试制疫苗物理性状符合要求，安全性良好。试验鸡在免疫14d后血清抗体达到2^7.5，210d血清HI抗体仍维持在2^5.0左右；免疫后18d使用高致病性H5亚型禽流感病毒攻毒，获得100％的保护。分别使用0．1，0．3和0．5mL免疫鸡，发现0．3～0．5mL剂量组免疫后血清抗体达到2^7.4-8.0。疫苗在2～8℃保存540d，疫苗物理性状没有改变，免疫后血清HI抗体可以达到2^7.5。这提示研制的疫苗可以有效控制禽流感H5亚型的流行。  相似文献   

保障中俄东线天然气管道长期安全运行的若干技术思考     

程玉峰 《油气储运》2020,(1):1-8

针对中俄东线天然气管道的实际服役状况,分析了土壤运动(冻胀与解冻沉降)对管道结构完整性的影响以及基于管体结构-土壤弹簧模型在确定管-土交互作用方面的局限性,即非线性、大应变与多轴加载评估的保守性、土壤本构模拟与真实状况的偏离,建议发展新型多模块耦合集成技术确定土壤运动产生的机械效应。明确了X80高强管线钢在服役条件下发生应变时效及其导致管线钢(尤其是焊缝区)材料韧性和止裂能力的降低,建议使用时效活化能与等效时效时间模拟、评估管线钢在漫长服役过程中发生应变时效的敏感性,并建立相应的理论基础。此外,详细分析3种常见的管道缺陷(机械损伤、腐蚀缺陷、裂纹)对管道完整性影响的评估技术现状。针对高压、大口径、高强钢天然气管道(特别是焊接金属与热影响区)在地质不稳定地区的材料韧性、裂纹扩展以及止裂能力开展实验与评价技术,建立精确的多物理场协同作用下的管道缺陷评估模型,是当前的国际性技术难题,这些问题的解决将有力保障中俄东线天然气管道以及相关油气管道的长期安全运行。  相似文献   

虫生真菌研究展望   总被引：6，自引：0，他引：6  

李增智 《安徽农业大学学报》1987,(3)

本文综述了生物工程技术在虫生真菌菌种选育工作中的作用,强调了制剂问题的意义及对剂型的具体要求,分析了虫生真菌在有害生物综合治理(IPM)系统中的地位及作用方式,评论了流行病学研究的动向及重要意义。  相似文献   

国外松枯梢病的松色二孢菌9个菌株生物学特性的研究   总被引：6，自引：0，他引：6  

彭星元  苏开君 《广东林业科技》1997,13(1):36-40

对来自不同发病程度，不同地点的国外松枯梢病松色二孢菌的９个菌株的生产，产孢等生物学特性进行了研究。结果表明，各菌株生长的最适温度为２５－３０℃，ＰＨ值为６－７，相对湿度为９０％以上；９２４５、Ｈ２１二菌株对湿度在培养其中加入１‰的硼对各菌株的生长和产孢有不同程度的抑制作用，尤以抑制产孢最明显，表现出硼对国外枯病的发生，发展有一定的控制作用。  相似文献